一、音频电对小鼠学习记忆障碍的改善作用（论文文献综述）
陈栋[1]（2021）在《调肠治神法针刺对孤独症儿童临床疗效及模型小鼠菌/脑效应研究》文中提出目的观察吴旭教授调肠治神法针刺对孤独症（autism spectrum disorde,ASD）儿童的临床疗效及对肠道菌群的影响。分析针刺疗效与肠道菌群变化的相关性,探讨调肠治神法针刺治疗ASD的可能的临床机制。同时,基于菌-脑轴,初步观察电针足三里单纯调肠对ASD模型小鼠行为学、肠道菌群、外周及中枢炎症水平的的影响,以期为调肠治神法针刺通过菌-脑轴治疗ASD提供科学依据。方法①临床研究:采用随机对照设计,60例病例随机分为针刺组（调肠治神法针刺结合常规教育康复训练）、康复组（常规教育康复融合训练）,每组30例。分别在治疗前及治疗后3个月末采用儿童孤独症评定量表（CARS）、孤独症儿童行为量表（ABC）及香港协康会《PEP-3自闭症儿童心理教育评核》第3版量表评估疗效;②肠道微生物研究:采用16S rDNA技术分析ASD儿童与正常儿童的肠道菌群差异、ASD儿童针刺干预前后或康复干预前后的肠道菌群差异,并采用采用简单线性回归分析针刺前后各肠道菌群与PEP-3总分的相关关系,筛选与针刺疗效相关的肠道菌群。③实验研究:采用丙戊酸（Valproic acid,VPA）孕鼠腹腔注射诱导小鼠ASD模型,并随机分为正常组、模型组、电针百会组、电针足三里组,治疗4周后处死小鼠。以三箱社交行为学检测、旷场实验、水迷宫试验等为行为学效应指标,以ASD小鼠粪便样品中肠道菌群结构的变化,多样性指数和相似性系数为肠道菌群观察指标,以外周的炎性因子TNF-α、IL-17a及海马区小胶质细胞活性为中枢炎症的观察指标,以探讨电针足三里对ASD模型小鼠行为学、肠道菌群、外周及中枢炎症水平的影响。结果临床研究:①PEP-3量表治疗前后评分统计发现两组均能改善ASD儿童认知,语言的理解及表达,大小肌肉及视觉动作模仿能力,以及情感表达、社交互动、非语言行和语言行为为特征（均P<0.05）。但与康复组相比,针刺组在认知、语言表达、理解,模仿,情感表达及语言行为特征等改善程度较优（均P<0.05）。②ABC量表各项总分在治疗前后差值统计分析发现两组均能不同程度的改善ASD儿童感觉、交往、运动、语言、自我照顾能力（均P<0.05）。但针刺组在患儿的感觉、语言、自我照顾能力及总分的改善程度均优于康复组（均P<0.05）。③CARS量表各项总分在治疗前后差值统计分析发现两组均可不同程度改善ASD患儿各项能力（均P<0.05）。而针刺组在调肠治神法针刺介入后患儿在情感反应、听觉反应、语言交流、总的印象及总分的改善程度均优于康复组（均P<0.05）。肠道菌群研究:①正常儿童与ASD儿童肠道菌群的组成和结构存在显着差异:在正常儿童组中,拟杆菌（门、纲、目、科、属）及脆弱类杆菌丰度均较多;而在ASD儿童组,厚壁菌门、梭状芽胞杆菌（纲、目）、毛螺菌科、瘤胃球菌科、粪杆菌种、放线菌（门、纲）、双歧杆菌（目、科、属）丰度较多。②针刺干预前后肠道菌群存在差异:与针刺干预前相比,针刺干预后拟杆菌（门、纲、目、科、属）,变形菌（门、纲）、交替单胞菌目、海原杆菌（科、属）丰度增多;放线菌（门、纲）、双歧杆菌（目、科、属）丰度减少。其中拟杆菌分别在门、纲、目、科、属丰度水平在针刺干预后发生显着变化,并趋向于正常儿童的菌群丰度水平。此外,针刺干预后,乳酸杆菌、厚壁菌门、梭状芽胞杆菌纲、瘤胃球菌科、罕见小球菌属丰度减少。③共筛选出五种与针刺效应密切相关的菌群,分别为拟杆菌门、拟杆菌属、双歧杆菌科、梭状芽胞杆菌纲,厚壁菌门。其中拟杆菌与针刺疗效呈正相关关系,而双歧杆菌科、梭状芽胞杆菌纲,厚壁菌门与针刺疗效呈负相关关系。实验研究:①三箱社交实验、旷场实验、水迷宫实验提示ASD模型小鼠具有明显的社交能力障碍、新鲜事物偏好障碍、探索能力障碍、刻板运动、空间记忆能力下降。电针足三里或百会均可改善上述功能障碍,同时,电针足三里组可显着提高ASD模型小鼠的运功能力,电针百会组可显着提高ASD模型小鼠的学习记忆能力;②ASD模型小鼠外周血清炎症因子TNF-α、IL-17a水平均显着升高,而电针百会或电针足三里均可下调ASD模型小鼠外周血清炎症水平,同时,电针足三里组的外周抗炎作用优于电针百会组;③AS D模型组小鼠海马区小胶质细胞活性升高,而电针百会或电针足三里均可抑制ASD模型小鼠海马区小胶质细胞活性,同时,电针足三里组抑制中枢炎症的作用优于电针百会组;④小鼠肠道菌群实验结果表明:1)在正常组小鼠中,拟杆菌（门、纲、目）、拟杆菌S24-7科丰度增多;而在模型组小鼠中,则表现为厚壁菌门、梭状芽胞杆菌（纲、目）、瘤胃球菌科等丰度增多。2)电针足三里组干预后拟杆菌（门、纲、目、科、属）、疣微菌（门、纲、目、科、属）、艾克曼菌属等菌群丰度水平增多。而电针百会穴则主要以拟杆菌S24-7科丰度增加为主。结论调肠治神法针刺结合常规教育康复训练能有效改善ASD儿童的临床症状,在认知、语言表达、理解、语言行为特征,模仿,情感表达等方面优于单纯教育康复训练。治疗过程中未出现不良反应。是孤独症医教综合治疗可行、可推广的方案。ASD儿童与正常儿童肠道菌群存在差异,调肠治神法针刺可良性调节ASD儿童肠道菌群。电针足三里可改善ASD模型小鼠行为学、肠道菌群紊乱、外周及中枢炎症水平。
蔡真真[2]（2021）在《轻度认知障碍老年人以正念为核心的睡眠干预方案构建及效果评价》文中进行了进一步梳理目的:了解养老机构认知障碍老年人的睡眠质量及影响因素。构建适合养老机构轻度认知障碍患者的正念睡眠干预方案,并探讨方案的科学性、适用性及可行性。评价正念睡眠干预对轻度认知障碍合并失眠患者的干预效果。方法:首先本研究对四家养老机构的275位老年人,使用匹兹堡睡眠质量问卷、蒙特利尔认知评估量表、简易精神状态量表及睡眠影响因素调查表,于2020年6月-9月进行问卷调查。接着通过文献研究形成以正念为核心的轻度认知障碍老年人睡眠干预方案初稿。通过专家会议论证并修订形成干预方案的修订稿。再选取8名符合标准的对象实施预实验,进一步完善干预流程。采用随机对照试验设计,将符合纳入排除标准的75名参与者随机分为正念干预组（38人）及健康教育组（37人）,分别接受每周1次,每次1.5小时的干预,共八周。在干预前及干预后采用蒙特利尔认知评估量表（Mo CA）、简易精神状态量表（MMSE）、匹兹堡睡眠量表（PISQ）、失眠严重指数量表（ISI）、阿森斯失眠量表（AIS）、听觉词语学习测验（AVLT）、词语流畅性测验（VFT）、符号数字模式测验（SDMT）、形状连线测验（STT）、日常生活活动问卷（ADL）、老年抑郁量表（GDS）、焦虑自评量表（SAS）、感知压力问卷（PSS）及闭眼和冥想状态下的脑电图进行评估,评价干预效果。对主要和次要结局指标采用依从方案受试者分析（Per-protocol subjects analysis,PP）和意向性治疗分析（Intention-to-treat analysis,ITT）的原则进行统计分析。结果:机构认知障碍老年人的睡眠质量总得分为（8.29±4.51）分,配偶、慢病数量、助眠药物、失眠家族史、参加体育锻炼和参加机构组织活动是睡眠质量的主要原因。多元线性回归分析表明婚姻状况、助眠药物的使用及体育锻炼情况是影响认知障碍老年人睡眠质量的重要因素（P<0.05）。构建以正念为核心的轻度认知障碍老年人睡眠干预方案,包括干预要素、方案内容。预实验结果显示,8名参与者对方案的满意度高,反馈结果提示正念干预有利于改善认知功能（P=0.002）及睡眠质量（P=0.011）。随机对照试验结果:干预前,两组入组对象的一般资料、主要指标和次要指标比较,差异均无统计学意义（P>0.05）,组间均衡可比。（1）ITT分析结果显示,主要结局指标在干预后,两组的Mo CA得分、MMSE得分和PSQI得分比较,差异具有统计学意义（P<0.05）,次要结局指标干预后两组的VFT、AVLT、STT、SDMT、GDS得分比较,差异无统计学意义（P>0.05）,ISI、AIS、SAS、PSS得分比较,差异具有统计学意义（P<0.05）,PP分析结果与ITT结果一致。（2）在脑电图方面,不同状态下,β频段绝对功率比较,在全脑及各个部位的差异均有统计学意义（P<0.05）。γ频段绝对功率比较,在额叶（P=0.024）、颞叶（P=0.015）、枕叶（P=0.045）及全脑（P=0.023）差异具有统计学意义。δ频段的相对功率比较,在额叶（P=0.004）、颞叶（P=0.037）、顶叶（P=0.029）及全脑（P=0.006）差异具有统计学意义。θ频段相对功率比较,在颞叶（P=0.043）、顶叶（P=0.024）差异具有统计学意义。结论:养老机构认知障碍老年人睡眠质量较差,睡眠问题较突出,医护人员应提起对机构认知障碍老年人睡眠质量的重视,提供多种方法结合的睡眠干预,提高认知障碍老年人的睡眠质量和身心健康。本研究以正念为核心的轻度认知障碍老年人睡眠干预方案具有科学性,方案得到参与者的喜爱,实施过程中适用性较好,可行性强、安全性高、满意度好。正念干预能够改善MCI患者的主观睡眠质量、总体认知功能及不良的心理状态。正念冥想可以引起大脑放松反应,提升自我意识,还能够使与认知任务有关的内在注意力提高。
唐艳鹏[3]（2021）在《基于数据挖掘探究王素梅教授治疗儿童多动症经验》文中研究说明目的当前,中医药治疗儿童注意力缺陷多动障碍越来越引起大家的关注,本课题采用中医传承辅助平台（V2.5）,对王素梅教授门诊的多动症病案进行数据挖掘分析研究,总结王素梅教授治疗儿童多动症的诊疗思路及用药规律,为临床治疗该病提供更多方法。方法收集王素梅教授自2019年8月至2020年12月在北京中医药大学东方医院儿科门诊就诊的儿童多动症病案,进行规范化后,得到符合纳入标准的54例病案,168次处方记录。将患者的一般信息、四诊信息录入平台系统,统计分析男女性别比例、年龄分布、药物性味归经等,采用频次统计、关联规则分析、熵聚类和改进的互信息法等方式统计出处方中的症状及证候频次、药物频次、药物关联度、核心药物组合等,从而得出王素梅教授治疗儿童多动症的证型分布、用药导向及潜在的新方,由此总结王教授对儿童多动症的认识及治疗该病的思路和用药规律。结果1.本研究纳入的54名患儿中,男童43例（79.63%）,女童11例（20.37%）,男女比例约为3.9:1,男童患病率明显高于女童。就诊年龄多集中在7-10岁,约占总数的 64.82%。2.在本次研究的54例病案中,出现的常见症状共有18种,排名前7的分别是注意力不集中、多动、冲动、大便干、做事拖延、纳呆、睡眠不安。3.本研究涉及四种中医证型:脾肾两虚,心肝火旺证144次（85.71%）,痰火内扰证11次（6.55%）,脾肾两虚,痰湿内盛证9次（5.36%）,肝肾阴虚证4次（2.38%）,其中脾肾两虚,心肝火旺证的多动症患儿人数最多。4.本研究中王素梅教授治疗儿童多动症共使用药物146味,其中使用频次最高的前20位中药分别是益智仁、龟甲、石菖蒲、龙骨、远志、牡丹皮、钩藤、百合、陈皮、熟地黄、决明子、柴胡、龙胆、黄连、天麻、栀子、白芍、法半夏、茯苓、竹茹。5.四气五味归经统计:在王教授治疗儿童ADHD的方剂中,以应用寒性药、温性药、平性药为主;五味主要以甘、辛、苦味为主;归经主要集中在肝经、心经、肾经、脾经。6.王教授治疗小儿多动症的常用中药组合共74条,包含中药10味。2味药物组合26组,3味药物组合31组,4味药物组合15组,5味药物组合2组。7.经聚类分析得到核心药物组合28组,挖掘出潜在新方14首。结论1.王素梅教授认为儿童多动症病位主要涉及心、肝、脾、肾四脏。脾肾两虚,心肝火旺为该病的主要病机。2.王教授在用药上以寒性,甘味,归肝、心、肾、脾经的药物为主,常用药物有益智仁、龟甲、石菖蒲、龙骨、远志、牡丹皮、钩藤、百合、陈皮等。3.王教授治疗本病方用自拟“静心安神汤”加减,以“补肾健脾,清心平肝”为治则。
任家谋[4]（2020）在《MEF2C基因沉默对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力及大脑皮层分子病理改变的影响》文中研究说明目的:肌细胞增强因子2C（Myocyte enhancer factor 2C,MEF2C）在神经系统中大量存在并且能够调节神经元的发育、突触的可塑性以及炎症的水平,但其在阿尔茨海默症（Alzheimer disease,AD）中的作用机制尚不清楚。本研究选用AD患者脑组织标本,APPswe/PSEN1d E9双转基因小鼠模型,经Aβ寡聚体（Amyloid peptide oligomers,AβOs）处理的神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）为研究对象,采用Ad-sh RNA-Mef2c腺病毒侧脑室注射APP/PS1双转基因小鼠、以及GV248-sh RNA-Mef2c转染SH-SY5Y细胞以沉默MEF2C基因,研究:MEF2C和Aβ在AD患者脑组织和APP/PS1双转基因小鼠皮质中表达及分布,以及在AD患者脑组织中二者是否具有相关性;在APP/PS1双转基因小鼠中以及暴露于AβOs的SH-SY5Y细胞模型中,MEF2C是否能够通过调控Nrf2-ARE信号通路水平,减少Aβ的产生和聚集,缓解Aβ的神经毒性作用,改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力。方法:（1）人脑组织标本:采用免疫组织化学方法,检测AD患者及对照组（非神经系统疾病）尸解大脑中MEF2C,Aβ的表达及分布;Pearson相关性检验分析MEF2C/Aβ在不同人脑区的相关性。（2）动物实验:采用免疫组织化学方法,检测APP/PS1双转基因小鼠中MEF2C和Aβ的表达及分布;采用蛋白印迹法（Western blot,WB）方法,检测APP/PS1双转基因小鼠脑中MEF2C蛋白的表达;构建使MEF2C沉默的腺病毒载体p DC316-sh RNA-Mef2c-mus-829,用腺病毒包装的方法获得含有目的基因的腺病毒,标记为Ad-sh RNA-MEF2C,分别将沉默病毒及空白病毒对照通过侧脑室注射方法分别处理6月龄和10月龄的APP/PS1的双转基因小鼠和C57野生小鼠;Morris水迷宫测定各组小鼠空间学习及记忆能力;苏木素伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色评估各组小鼠脑组织病理学改变;刚果红染色检测个各组小鼠脑组织皮质中的老年斑的变化情况;原位末端转移酶标记（Td T-mediated d UTP Nick-End Labeling,TUNEL）染色检测各组小鼠脑组织皮质中细胞的凋亡的情况;透射电镜检测各组小鼠脑组织皮质中线粒体的形态的改变;免疫荧光检测各组小鼠中MEF2C/Aβ、IBA1、IL-6在各组小鼠脑皮质中的表达;酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测小鼠皮质中白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）表达水平的变化;生物化学方法测定小鼠皮质中丙二醛（Methane dicarboxylic aldehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）的活性;Western blot检测皮质中MEF2C蛋白和Nrf2-ARE信号通路相关蛋白核因子E2相关因子2（Nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2）、血红素加氧酶1（Heme oxygenase 1,HO-1）、NADPH醌脱氢酶1（NADPH Dehydrogenase,Quinone1,NQO1）、SOD2,凋亡相关蛋白BAX、Bcl-2,突触相关蛋白突触素（synaptophysin,SYN）、突触后膜蛋白（postsynaptic density 95,PSD-95）,β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（β-Site amyloid precursor protein-cleaving enzyme1,BACE1）、β-淀粉样前体蛋白裂解酶2（BACE2）等蛋白的表达水平。（3）细胞实验:构建MEF2C沉默质粒GV40-sh RNA-Mef2c,通过Lip3000将GV40-sh RNA空载质粒和GV40-sh RNA-Mef2c质粒转染到SH-SY5Y细胞中,48小时之后暴露于1μmol/L的AβO中,24小时之后收集细胞,通过流式细胞术检测细胞的凋亡以及活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的变化情况,收集细胞提取蛋白质,通过Western blot检测细胞中MEF2C、Nrf2、HO-1、NQO1、SOD2、BAX、Bcl-2、SYN、PSD-95等蛋白的表达水平。结果:（1）人脑组织标本:免疫组化结果显示,在AD患者的颞叶、额叶及海马中Aβ沉积明显,在正常对照组中表达较少,MEF2C主要在AD患者和正常对照组颞叶、额叶中表达而海马中基本不表达,并且MEF2C在AD患者组中明显低于正常对照组,Pearson相关性检验分析显示,MEF2C/Aβ在不同脑区表达呈明显的负相关。（2）动物实验:（1）与同月龄的C57野生小鼠相比,6月龄和10月龄的APP/PS1双转基因小鼠皮质中,免疫组化结果显示,MEF2C表达降低,Aβ沉积明显;Western blot结果显示,小鼠皮质中MEF2C蛋白表达降低。（2）和同月龄的注射Ad-sh RNA空载的C57野生小鼠相比,6月龄和10月龄注射Ad-sh RNA空载的APP/PS1双转基因小鼠中,Morris水迷宫结果显示,小鼠的平台逗留时间减少,穿越平台次数减少,逃避潜伏期也有相应增加。和同月龄的注射Ad-sh RNA空载的APP/PS1双转基因小鼠相比,6月龄和10月龄的注射Ad-sh RNA-Mef2c质粒的APP/PS1双转基因小鼠中,Morris水迷宫结果显示小鼠的平台逗留时间减少,穿越平台次数减少,逃避潜伏期也相应增加。（3）和同月龄的注射Ad-sh RNA空载的C57野生小鼠相比,6月龄和10月龄注射Ad-sh RNA空载的APP/PS1双转基因小鼠以及注射Ad-sh RNA-Mef2c的C57野生小鼠的皮质中,HE染色显示,脑组织未发生明显的病理学改变,透射电镜结果显示,皮质中线粒体嵴水肿加重,密度降低,空泡化程度加重,破坏增加。和同月龄的注射Ad-sh RNA空载组的APP/PS1双转基因小鼠相比,6月龄和10月龄注射Ad-sh RNA-Mef2c质粒的APP/PS1双转基因小鼠的皮质中,HE染色显示,脑组织未发生明显的病理学改变,透射电镜结果显示,皮质中线粒体嵴水肿加重,密度降低,空泡化程度加重,破坏增加。（4）和同月龄的注射Ad-sh RNA空载的C57野生小鼠相比,6月龄和10月龄的注射Ad-sh RNA空载质粒的APP/PS1双转基因小鼠皮质中,MEF2C/Aβ、Iba1、IL6免疫荧光结果显示,皮质中MEF2C的表达降低、Aβ沉积明显、Iba1和IL6表达增加,TUNEL结果显示,皮质中细胞的凋亡增加,刚果红染色显示,皮质中的老年斑沉积明显;6月龄和10月龄注射Ad-sh RNA-Mef2c质粒的C57野生小鼠的皮质中,未见Aβ沉积,其余指标和注射Ad-sh RNA的APP/PS1双转基因小鼠变化一致。和同月龄的注射Ad-sh RNA空载的APP/PS1双转基因小鼠相比,6月龄和10月龄注射Ad-sh RNA-Mef2c质粒的APP/PS1双转基因小鼠的皮质中,MEF2C/Aβ、Iba1、IL6免疫荧光结果显示,皮质中MEF2C的表达降低、Iba1和IL6表达升高、小鼠皮质中Aβ沉积增加,刚果红染色显示,小鼠皮质中老年斑沉积有增加的趋势,TUNEL染色结果显示,皮质中细胞的凋亡增加。（5）和同月龄的注射Ad-sh RNA空载的C57野生小鼠相比,6月龄和10月龄注射Ad-sh RNA空载的APP/PS1双转基因小鼠脑皮质中以及注射Ad-sh RNA-Mef2c的C57野生小鼠的脑皮质中,Western blot结果显示,皮质中MEF2C、NRF2、HO-1、SOD2、NQO1、SYN、PSD95、BACE2、BCL-2蛋白表达降低,而BACE1、BAX表达升高,ELISA结果显示,皮质中IL-6的表达升高,生物化学结果显示,皮质中MDA的含量增加,SOD的活性减弱。和同月龄的注射Ad-sh RNA空载的APP/PS1双转基因小鼠相比,6月龄和10月龄的注射Ad-sh RNA-Mef2c质粒的APP/PS1双转基因小鼠皮质中,Western blot结果显示,皮质中MEF2C、NRF2、HO-1、SOD2、NQO1、SYN、PSD95、BACE2、BCL-2蛋白表达降低,而BACE1、BAX表达升高,ELISA结果显示,皮质中IL-6的表达升高,生物化学结果显示,皮质中MDA的含量增加,SOD的活性减弱。（3）细胞实验:在SH-SY5Y细胞中分别转染GV248-sh RNA和GV248-sh RNA-Mef2c、48小时后暴露于1μmol/L AβO中作用24小时。与GV248-sh RNA组相比,在GV248-sh RNA+Aβ和GV248-sh RNA-Mef2c组中,Western blot结果显示MEF2C、NRF2、HO-1、NQO1、SOD2、BCL-2、SYN、PSD95蛋白表达降低,BAX蛋白表达升高;流式细胞术显示,细胞的凋亡和ROS水平增加。与GV248-sh RNA+Aβ组相比,在GV248-sh RNA-Mef2c+Aβ组中,Western blot结果显示MEF2C、NRF2、HO-1、NQO1、SOD2、BCL-2、SYN、PSD95蛋白表达降低,BAX蛋白表达升高;流式细胞术结果显示,细胞的凋亡和ROS水平增加。结论:（1）MEF2C在AD患者脑中表达降低,这可能是AD中Aβ大量聚集以及神经毒性加重的原因之一。（2）MEF2C下调可能通过减少AD动物皮质中Nrf2-ARE信号通路的激活,增加BACE1的水平、降低BACE2的水平,增加Aβ的产生和聚集,损伤突触的可塑性,降低了学习记忆能力。（3）MEF2C下调可能通过减少AD动物皮质中Nrf2-ARE信号通路的激活,提高细胞的氧化应激水平、促进炎症因子的释放,增加了神经细胞的损伤。
徐毅[5]（2020）在《2型糖尿病脑组织尼古丁受体的改变及增强α7尼古丁受体功能改善糖尿病小鼠空间学习记忆障碍的分子机制》文中指出目的:2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）因其高患病率而成为全球的公共健康问题;T2DM患轻度认知障碍和痴呆症的风险明显升高。导致T2DM相关认知障碍的机制仍不清楚,更缺乏有效的治疗措施。大脑组织神经元中尼古丁胆碱能受体（Neuronal nicotinic acetylcholine receptors,n ACh Rs）表达减少与认知功能障碍密切相关,增强n ACh Rs功能可改善认知功能。目前,T2DM脑组织内n ACh Rs的表达及其与认知功能的关系尚不清楚。本课题选用T2DM患者死后的尸体解剖脑组织标本、T2DM动物模型db/db小鼠、脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的小胶质细胞（大鼠原代培养小胶质细胞或人小胶质细胞系HMC3）与神经元细胞（大鼠原代培养神经元或人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y）体外共培养来研究（1）T2DM脑组织内n ACh R亚单位蛋白的表达;（2）应用a7 n ACh Rs激动剂/拮抗剂后对db/db小鼠空间学习记忆能力的影响,以及对动物脑组织和培养细胞中有关神经炎症反应、胰岛素信号、细胞能量通路的影响,探讨增强a7 n ACh Rs功能对db/db小鼠认知功能障碍的神经保护分子机制。方法:1.检测T2DM对脑的影响:（1）研究对象:T2DM患者及对照组（非糖尿病）尸体解剖的海马及皮质额叶、颞叶区组织切片标本,db/db小鼠及非糖尿病对照db/m小鼠的脑组织。（2）测定方法:采用免疫荧光方法,检测T2DM患者及对照脑组织中n ACh Ra7、a4、b2亚单位蛋白的表达;用Morris水迷宫（Morris water maze,MWM）检测小鼠的空间学习记忆能力;分别用蛋白印迹法（Western-blotting,WB）及实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测小鼠脑内n ACh Ra7、a4、b2亚单位蛋白及m RNA的表达。2.应用a7 n ACh Rs激动剂/拮抗剂干预实验:（1）实验对象:雄性db/db小鼠及db/m小鼠,LPS诱导的小胶质细胞（大鼠原代培养小胶质细胞或人小胶质细胞系HMC3）与神经元细胞（大鼠原代培养神经元或人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y）体外共培养模型。（2）处理方法:10周龄db/db和db/m小鼠分别每日一次腹膜注射等体积量的MLA（选择性a7 n ACh Rs拮抗剂,1mg/kg）、PNU-282987（选择性a7 n ACh Rs激动剂,0.5 mg/kg）、生理盐水（Normal saline,NS）,连续处理8周;细胞共培养模型分组采用MLA+PNU-282987+LPS、PNU-282987+LPS、LPS处理,孵育时间为26 h。（3）测定方法:用快速血糖仪检测小鼠空腹血糖;MWM测定小鼠空间学习记忆能力;用WB检测小鼠脑内及体外培养神经细胞的JAK/STAT通路（JAK2/p-JAK2、STAT3/p-STAT3）,胰岛素信号通路相关蛋白（IRS-1/p-IRS-1（Ser636）、PI3K/p-PI3K（110）、AKt/p-AKt（Thr308））,糖酵解关键酶（己糖激酶2（Hexokinase2,HK2）、磷酸果糖激酶-2（Phosphofructokinase-2,PFK-2））的蛋白表达水平;高效液相-质谱法检测小鼠海马组织6-磷酸葡萄糖、1,6-二磷酸果糖,反式乌头酸、富马酸、苹果酸、ATP含量;免疫荧光检测细胞内NF-kB（p65）的核易位;ELISA试剂盒检测培养基中细胞因子（肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor,TNF-a）、白细胞介素（Interleukin,IL-1b））浓度;JC-1检测线粒体膜电位。结果:1.T2DM对脑的影响:（1）n ACh R亚单位在各脑区表达:人脑标本结果显示,在海马区域,T2DM患者组的n ACh Ra7、a4亚单位蛋白表达水平均明显低于非糖尿病对照（P<0.01）;在额叶、颞叶皮质区域,T2DM患者组的n ACh Ra7、a4亚单位蛋白表达水平与非糖尿病对照组之间均无明显差异。在海马、额叶、颞叶皮质区域,n ACh Rb2亚单位蛋白表达水平在两组之间无明显差异。小鼠脑标本结果显示,在海马区域,db/db组的n ACh Ra7、a4亚单位蛋白表达水平明显低于db/m组（P<0.01）;在皮质区域,db/db组的n ACh Ra7、a4亚单位蛋白表达水平与db/m组之间均无明显差异。在海马和皮质区域,n ACh Rb2亚单位蛋白表达水平在两组之间均无明显差异。（2）db/db小鼠的空间学习记忆能力明显较db/m小鼠差。2.应用a7 n ACh Rs激动剂/拮抗剂干预后:（1）动物实验:db/db小鼠的结果显示,1)相较于control组,PNU-282987处理组的p-JAK2、p-STAT3蛋白表达明显升高,细胞内NF-kB核易位减少,炎症因子TNF-a、IL-1b的释放减少,而MLA及NS处理组的上述指标与对照组无明显差异;2)相较于control组,PNU-282987处理组的pIRS-1（Ser636）蛋白表达明显降低,p-PI3K（110）、p-AKt（Thr308）表达明显升高,而MLA及NS处理组的上述指标与对照组无明显差异;3)在db/db小鼠的海马组织,PNU-282987处理组的HK2、PFK-2蛋白表达水平明显升高,6-磷酸葡萄糖、1,6-二磷酸果糖、反式乌头酸、富马酸、苹果酸、ATP浓度明显高于MLA及NS处理组;4)PNU-282987处理组小鼠的空间学习记忆能力明显优于其他处理组。（2）细胞实验:原代神经元与小胶质细胞共培养、SH-SY5Y与HMC3细胞共培养模型均显示,相较于单纯LPS处理组,PNU-282987处理组的神经细胞的p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平明显升高,促炎细胞因子TNF-a、IL-1b的释放减少,p-IRS-1（Ser636）蛋白表达水平明显降低,pPI3K（110）、p-AKt（Thr308）、HK2、PFK-2蛋白表达水平明显升高,线粒体膜电位更高;用MLA预处理则消除了PNU-282987的这些效应。结论:1.T2DM患者及实验动物海马区域n ACh Ra7、a4亚单位蛋白表达减少;2.增强a7n ACh Rs功能可通过激活“胆碱能抗炎通路”减轻神经炎症反应,提高脑胰岛素敏感性,进而改善db/db小鼠海马神经元细胞及体外共培养的神经细胞的能量代谢;3.增强a7 n ACh Rs功能可改善db/db小鼠的空间学习记忆能力,其机制与改善海马能量代谢有关;4.T2DM认知功能降低可能与海马nAChRs表达低下有关。
吴静[6]（2020）在《CREB调控海马GABAA受体表达在耐药性癫痫中的作用研究》文中研究表明目的:癫痫是一种常见的神经系统疾病。c AMP反应元件结合蛋白（c AMP response element binding protein,CREB）和苔藓纤维出芽（mossy fiber sprouting,MFS）可能在癫痫发病、发作、耐药性和认知功能障碍中具有重要作用。然而其参与癫痫病理过程的具体机制尚不明确。本研究旨在大鼠原代海马神经元和大鼠癫痫模型中探讨CREB对γ-氨基丁酸（gamma-Aminobutyric acid,GABA）A受体表达和癫痫发作的调控作用以及MFS与癫痫发作、耐药性以及认知功能障碍之间的相关性。方法:第一部分:构建CREB过表达慢病毒、CREB sh RNA干扰慢病毒和相应对照慢病毒。由SD乳鼠分离获得大鼠原代海马神经元。在10天的培养和Neu N抗体免疫荧光鉴定后,将原代海马神经元分为对照组、过表达组、过表达对照组、干扰组和干扰对照组。使用CREB过表达慢病毒、CREB干扰慢病毒和其对照慢病毒分别转染并改变相应组中原代海马神经元CREB表达水平。7天后使用Western blot检测并比较各组原代海马神经元（n=3）中CREB、p-CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。同时使用荧光定量PCR检测并比较各组原代海马神经元（n=3）中CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基m RNA水平。第二部分:除10只作为正常对照外,使用剩余190只SD大鼠构建氯化锂-匹罗卡品癫痫模型。随后使用苯妥英钠和苯巴比妥进行耐药性筛选。根据耐药性筛选结果,将SD大鼠分为对照组、药敏过表达组、药敏过表达对照组、药敏干扰组、药敏干扰对照组、耐药过表达组、耐药过表达对照组、耐药干扰组和耐药干扰对照组（n=10）。将CREB过表达慢病毒、CREB干扰慢病毒和其对照慢病毒分别注射至相应组中大鼠双侧海马区域。视频监测各组大鼠转染前后癫痫发作频率和持续时间。使用脑深部电极记录右侧海马脑电图。使用Western blot检测各组大鼠（n=3）海马组织中CREB、p-CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。使用免疫组化检测各组大鼠（n=3）海马齿状回颗粒层CREB和GABAA受体α1亚基蛋白水平。使用Timm染色检测各组大鼠（n=4）海马齿状回MFS情况。统计分析各组间癫痫发作频率、发作持续时间、脑电频率、脑电波幅、蛋白表达水平和Timm评分是否存在差异。第三部分:除12只作为对照组外,38只SD大鼠被用于构建氯化锂-匹罗卡品癫痫模型。经苯妥英钠和苯巴比妥耐药性筛选分为药敏组（n=18）和耐药组（n=8）。视频监测各组大鼠癫痫发作频率。使用新物体识别试验和Morris水迷宫试验检测其认知功能障碍。使用Timm染色检测大鼠齿状回MFS水平。比较各组间癫痫发作频率、物体记忆、空间记忆和MFS水平的差异。使用Spearman秩相关性检验分析各因素间相关性。结果:第一部分:过表达组中原代海马神经元较过表达对照组CREB蛋白和m RNA水平以及p-CREB蛋白水平均明显增高,GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白和m RNA水平均明显降低。干扰组原代海马神经元较干扰对照组原代海马神经元CREB蛋白和m RNA水平以及p-CREB蛋白水平均明显下降,而GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白和m RNA水平均明显增高。第二部分:在药敏性和耐药性癫痫模型大鼠中,注射CREB过表达慢病毒后癫痫发作频率和持续时间均较注射前明显增高;注射CREB干扰慢病毒后癫痫发作频率和持续时间均较注射前明显降低;注射CREB过表达对照病毒和CREB干扰对照病毒前后癫痫发作频率和持续时间改变无统计学意义。药敏过表达组和耐药过表达组大鼠均较相应对照组大鼠具有更高的脑电频率和波幅、较高的海马CREB和p-CREB蛋白水平和较低的GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。药敏干扰组和耐药干扰组大鼠均较相应对照组大鼠具有较低的脑电频率和波幅,较低的海马CREB和p-CREB蛋白水平和较高的GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。第三部分:氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠较正常大鼠物体记忆和空间记忆学习能力均明显下降。耐药性癫痫大鼠较药敏性癫痫大鼠癫痫发作更为频繁,MFS更为明显,空间记忆学习能力障碍也更为严重。氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠的癫痫发作频率和空间记忆学习能力之间可能存在相关性。结论:改变大鼠海马神经元中CREB蛋白表达可能可以相应的改变p-CREB蛋白水平并负向调控GABAA受体α1、β2和γ2亚基表达和转录水平。过表达CREB蛋白可能增高氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠发作频率和强度,而干扰CREB蛋白表达可能降低其发作频率和强度。MFS可能与癫痫模型大鼠耐药性有关。癫痫发作频率、耐药性和空间记忆功能损害三者在癫痫模型大鼠中可能存在相关性。
余晓旭[7]（2020）在《ZL006在七氟烷引起小鼠早期记忆提取障碍中的作用及其机制的探讨》文中提出目的:观察使用ZL006后对七氟烷引起的成年小鼠早期记忆提取障碍的影响,探讨七氟烷引起的成年小鼠早期记忆提取障碍中的可能机制。方法:健康成年昆明小鼠24只,2月龄,雌雄不拘,体重30～35g,采用随机数字表法分为3组:七氟烷组（S组）,七氟烷+ZL006组（Z组）,氧气组（C组）,进行避暗实验训练,避暗记忆建立成功后24h,进行七氟烷麻醉。麻醉前半小时,Z组以1.0mg/kg剂量腹腔注射ZL006（用生理盐水将ZL006溶解成0.1mg/ml,以10ml/kg腹腔注射）;S组和C组腹腔注射等体积的生理盐水（以10ml/kg腹腔注射）。成功建立避暗记忆24h后,S组、Z组吸入40%O2+3.3%七氟烷2h,C组吸入40%O22h。在吸入七氟烷或者氧气后12h时点,测试步入潜伏期和Δ潜伏期(Δ潜伏期=潜伏期记忆成绩-潜伏期基础成绩)以及5分钟内错误次数,以评价小鼠被动逃避记忆提取能力的变化。记录完步入潜伏期和5min内错误次数后,立即进行断头处死,取海马组织,采用Western Blot法检测PSD95蛋白表达情况、n NOS蛋白表达情况,以及使用免疫共沉淀法检测PSD95、n NOS蛋白之间的相互作用的变化。结果:1.避暗实验结果:与C组比较,Z组与S组吸入七氟烷后12h,步入潜伏期缩短,Δ潜伏期负值增大和5分钟内错误次数增加（P<0.05）。与S组比较,Z组吸入七氟烷后12h,步入潜伏期延长,Δ潜伏期负值减小和5分钟内错误次数减少（P<0.05）。2.免疫共沉淀结果:与C组比较,Z组与S组吸入七氟烷后12h,PSD95与n NOS共表达上调（P<0.05）。与S组相比,Z组吸入七氟烷后12h,PSD95与n NOS共表达下调（P<0.05）。Western Blot测定结果:与C组比较,Z组与S组吸入七氟烷后12h,PSD95蛋白表达无显着差异（P>0.05）,n NOS蛋白表达无显着差异（P>0.05）。与S组相比,Z组吸入七氟烷后12h,PSD95蛋白表达无显着差异（P>0.05）,n NOS蛋白表达无显着差异（P>0.05）。结论:ZL006可以改善七氟烷引起的成年小鼠早期记忆提取障碍,七氟烷引起的成年小鼠早期记忆提取障碍其机制可能与PSD95-nNOS耦合有关。
李晓宇[8]（2020）在《灯盏乙素对β淀粉样蛋白诱导的SH-SY5Y细胞中Glu/GABA代谢通路的影响》文中研究表明目的:观察灯盏乙素（Scutellarin,Scu）对β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的细胞模型中谷氨酸（Glutamate,Glu）/γ氨基丁酸（Gamma-aminobutyric acid,GABA）能系统关键递质和蛋白的影响,探讨Scu抑制Aβ所致的Glu兴奋性毒性的作用机制。方法:选用神经母细胞瘤细胞分为对照组、Scu处理组（10μmol/L）、Aβ处理组（1μmol/L）和Scu（10μmol/L）+Aβ（1μmol/L）处理组。用生物化学法检测各组细胞外Glu的浓度;用ELISA法检测细胞外GABA的浓度;用蛋白印迹法检测各组细胞兴奋性氨基酸转运体3（Excitatory amino acid transpor3,EAAT3）、γ氨基丁酸转运体1（GABA transporter 1,GAT-1）、N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚型1（N-methyl-D-aspartate receptor subtype1,NMDAR1）的蛋白表达;实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,q PCR）法检测EAAT3、GAT-1、NMDAR1蛋白的m RNA相对表达量。用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定各组细胞的总超氧化物歧化酶（Total superoxide dismutase,T-SOD）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的含量。结果:（1）对照组与Scu处理组比较,各检测指标数据均无统计学差异（P>0.05）。（2）与对照组（Glu:41.90±3.67,GABA:6.06±0.57）和Scu处理组（Glu:49.16±9.75,GABA:5.98±0.71）比较,Aβ处理组细胞外Glu（119.23±10.87）含量升高,GABA含量降低（2.00±0.42）,差异均有统计学意义（P<0.05）;与Aβ处理组比较,Scu+Aβ处理组细胞外Glu（79.77±7.25）含量降低,GABA（3.35±0.29）含量升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）与对照组（EAAT3:0.15±0.07,NMDAR1:0.11±0.06,GAT-1:0.08±0.01）和Scu处理组（EAAT3:0.23±0.02,NMDAR1:0.17±0.04,GAT-1:0.11±0.01）比较,Aβ处理组细胞中EAAT3蛋白（0.49±0.06）、NMDAR1蛋白（0.39±0.03）和GAT-1蛋白（0.26±0.02）表达均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;与Aβ处理组比较,Scu+Aβ处理组细胞中EAAT3蛋白（0.40±0.02）、NMDAR1蛋白（0.30±0.02）和GAT-1蛋白（0.17±0.03）表达均降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。（4）与对照组（EAAT3-m RNA:1.07±0.06,NMDAR1-m RNA:1.02±0.04,GAT-1-m RNA:1.01±0.07）和Scu处理组（EAAT3-m RNA:1.36±0.09,NMDAR1-m RNA:1.26±0.13,GAT-1-m RNA:1.27±0.15）比较,Aβ处理组细胞中EAAT3-m RNA（3.27±0.33）、NMDAR1-m RNA（2.94±0.28）和GAT-1-m RNA（2.53±0.15）表达均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;与Aβ处理组比较,Scu+Aβ处理组细胞中EAAT3-m RNA（2.38±0.35）、NMDAR1-m RNA（2.13±0.28）和GAT-1-m RNA（1.80±0.19）表达均降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。（4）与对照组（T-SOD:92.54±8.82,MDA:0.94±0.11）和Scu处理组（T-SOD:99.46±10.89,MDA:0.89±0.12）比较,Aβ处理组细胞T-SOD（32.60±3.54）含量降低,MDA（2.85±0.31）含量升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;与Aβ处理组相比,Scu+Aβ处理组细胞中的T-SOD（49.84±6.70）含量升高,MDA（1.99±0.23）含量降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:Scu可能通过抗氧化,改善线粒体功能障碍,改善EAAT3和GAT-1的转运障碍,并且降低NMDAR1的转录和表达,从而减轻Aβ介导的谷氨酸兴奋性毒性损伤。
黄鑫怡,郑依婷,顾婷婷,王佳佳,方宗平[9]（2019）在《激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体（α7nAchR）增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病》文中认为目的检测α7烟碱型乙酰胆碱能受体（α7nAchR）对M2型小胶质细胞的影响,探索其减轻脓毒症脑病（SAE）的机制。方法采用盲肠结扎穿刺术（CLP）于2月龄雄性C57BL/6小鼠构建SAE模型,比较两组小鼠学习记忆能力的改变。采用Western blot法检测海马组织中α7nAchR的表达变化。给予腹腔注射α7nAchR的激动剂二甲氧基苯亚胺基假木贼碱（GTS-21）,观察给予激动剂后海马组织中α7nAchR的表达变化,同时探索GTS-21是否能减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。通过免疫荧光细胞化学染色法检测精氨酸酶1（ARG1）、离子钙结合接头蛋白1（Iba-1）的表达确定SAE小鼠M2型小胶质细胞数量的变化,以及GTS-21对M2型小胶质细胞数量的影响。结果 SAE小鼠的新物体识别及恐惧记忆能力显着下降,小鼠海马组织中α7nAchR表达显着降低。GTS-21可改善SAE小鼠的学习记忆障碍,增加脑组织中α7nAchR的表达。同时,脓毒症小鼠海马组织中M2型小胶质细胞显着减少,而GTS-21可显着增加M2型小胶质细胞的数量。结论 SAE小鼠海马组织中α7nAchR表达降低,使抑制炎症反应的M2型小胶质细胞减少, GTS-21可显着增加M2型小胶质细胞数量,减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。
朱泽军[10]（2019）在《脐带组织对大鼠学习记忆损伤的影响》文中指出目的研究脐带组织移植对大鼠辐射诱导的学习记忆损伤的保护作用,并探讨其机制。方法将120只SD大鼠随机分为3组,分别为对照组、模型组和治疗组,模型组大鼠给予辐射计量为20Gy的全脑X射线照射;治疗组大鼠给予辐射计量为20Gy的全脑X射线照射后立即在大鼠背部进行脐带组织移植;对照组大鼠不给于任何特殊处理。并于照射后第1、2、4、8周分别观察各组大鼠体重变化;在各个时间点对各组大鼠进行隐藏平台实验和空间探索实验并观察各组间的差异;将各组大鼠按时间点取材后进行HE染色,观察大鼠海马区神经元数量及形态;用免疫组织化学染色法观察小胶质细胞及星形胶质细胞的状态;用免疫印迹法观察海马NF-κB通路分子及IL-6的表达情况。结果1在接受放疗后的1周内,对照组体重随时间变化不断增加,模型组、干预组大鼠体重均减少。在接受放疗的2周内,对照组体重随时间变化不断增加,模型组、干预组分别在第7、8天体重降到最低值,并出现食欲下降、毛发粗糙、发黄以头颈部明显,下颌及部分颈部毛发脱落,出现呕吐现象。随后于第12天左右体重缓慢上升。第1、2、4周对照组大鼠体重均高于模型组与治疗组,差异具有统计学意义（P<0.05）;至第8周三组大鼠体重无明显差异（P>0.05）;2第2、4、8周大鼠潜伏期模型组均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;在第4周,治疗组大鼠潜伏期高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）且治疗组大鼠潜伏期低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）,表现为:对照组多以趋向式、直线式搜索策略为主;模型组多以边缘式搜索策略为主;治疗组以边缘式、趋向式搜索策略为主;3大鼠穿越平台次数在第2、4周对照组均高于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;第4周对照组高于治疗组,差异有统计学意义（P<0.05）;三组大鼠在站台所在象限时间上第4、8周均高于第2周,差异有统计学意义（P<0.05）;4根据对各组大鼠海马区HE染色可知,对照组大鼠神经元排列整齐,胞浆透明,细胞核呈圆形或椭圆形,染色质分布均匀核仁清晰。模型组大鼠部分神经元排列紊乱,胞体收缩呈三角形或不规则形,胞核固缩,结构不清。治疗组大鼠神经元变性坏死和缺失的数量较模型组减轻;5通过用免疫组织化学染色法观察大鼠海马区神经元、小胶质细胞、星形胶质细胞的表达可知,模型组神经元的表达均少于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;模型组、治疗组活化状态小胶质细胞的表达高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,活化状态的小胶质细胞随时间延长数量逐渐减少;星形胶质细胞模型组的表达均高对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,星形胶质细胞的表达随时间延长数量逐渐增多;6第1周模型组、治疗组TLR4、P65、IL-6的表达均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,模型组IL-6的表达高于治疗组,差异有统计学意义（P<0.05）;第2周模型组、治疗组TLR4、NF-κB P65、IL-6、BCL-2/Bax的表达均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,模型组的表达高于治疗组,差异有统计学意义（P<0.05）;第4、8周模型组、治疗组IL-6的表达均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1全脑照射可以造成大鼠行为学、病理学变化及学习记忆损伤;2脐带组织可以缓解由全脑照射造成大鼠的学习记忆损伤。图18幅;表4个;参173篇。
二、音频电对小鼠学习记忆障碍的改善作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、音频电对小鼠学习记忆障碍的改善作用（论文提纲范文）
（1）调肠治神法针刺对孤独症儿童临床疗效及模型小鼠菌/脑效应研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 一、祖国医学对孤独症的认识 |
| 1 对病名的认识 |
| 2 对病因病机的认识 |
| 2.1 心气不足,邪乘于心 |
| 2.2 心火不足,肝木虚弱,心肺俱怯 |
| 2.3 禀赋(母气)不足,肾气亏虚 |
| 2.4 脾胃虚弱,清气不升 |
| 2.5 乳母五火遗热,闭塞气道 |
| 2.6 病后亡津,会厌干涸 |
| 2.7 气结痰凝,上蒙心窍 |
| 2.8 金石之药损伤 |
| 3 古籍记载疗法 |
| 3.1 早期经验,取类比象 |
| 3.2 脏腑辨证、灸药结合 |
| 3.3 从幼填补,母婴同治 |
| 4 当代中医治疗 |
| 4.1 从“脏”论治 |
| 4.2 从“痰”论治 |
| 4.3 从“肠”-“神”论治 |
| 4.4 中医心理治疗 |
| 5 传统针灸推拿疗法 |
| 二、现代医学对孤独症的研究进展 |
| 1 流行病学研究 |
| 2 ASD发病机制研究进展 |
| 2.1 肠道微生物与ASD发生发展及行为严重性密切相关 |
| 2.2 异常的中枢及外周炎症过程可能是ASD的一个持续病因 |
| 2.3 中枢胶质细胞的过度激活,是ASD中枢炎症反应的重要标志 |
| 2.4 迷走神经介导微生物群和中枢神经系统交流,调控中枢炎症反应 |
| 2.5 针灸通过菌-肠-脑轴治疗孤独症的可能相关机制 |
| 3 治疗现状研究 |
| 3.1 药物治疗 |
| 3.2 应用行为分析治疗 |
| 3.3 感官刺激疗法 |
| 3.4 重复经颅磁刺激(rTMS) |
| 3.5 虚拟现实技术及人工智能运用 |
| 3.6 心理疗法 |
| 3.7 其它非药物疗法 |
| 4 总结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 |
| 一、资料和方法 |
| 1 研究病例来源及分组 |
| 2 诊断标准 |
| 2.1 西医诊断标准 |
| 2.2 纳入标准 |
| 2.3 排除标准 |
| 2.4 病例剔除标准 |
| 2.5 随机方法及治疗分配 |
| 3 临床研究方案 |
| 3.1 治疗方案 |
| 3.2 疗程 |
| 3.3 观察内容 |
| 3.4 观测时点 |
| 3.5 疗效评价 |
| 3.6 安全性评价 |
| 3.7 统计分析 |
| 二、结果部分 |
| 1 基线资料的可比性分析 |
| 2 疗效分析 |
| 2.1 总体疗效比较 |
| 2.2 两组PEP-3积分比较 |
| 2.3 两组ABC积分比较 |
| 2.4 两组CARS积分比较 |
| 2.5 安全性分析 |
| 三、讨论 |
| 1. 调肠治神取穴组方分析 |
| 2. 针刺手法分析 |
| 3. 疗效分析 |
| 参考文献 |
| 第三部分 肠道微生物研究 |
| 引言 |
| 一、材料与方法 |
| 1. 试剂与设备 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 研究分组与样本采集方法 |
| 2.2 样本采集方法及时点 |
| 2.3 粪便内总DNA的提取及质量鉴定 |
| 2.4 16S rDNA技术分析粪便样品中肠道菌群结构与多样性变化 |
| 3. 结果 |
| 3.1 测序结果的丰富度与多样性分析 |
| 3.2 正常儿童与ASD儿童肠道菌群的差异 |
| 3.3 针刺组儿童治疗前后肠道菌群的差异 |
| 3.4 康复组儿童治疗前后肠道菌群的差异 |
| 3.5 相关性分析 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 动物研究 |
| 引言 |
| 实验一 电针足三里对ASD模型小鼠行为学的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 实验动物及分组 |
| 1.3 造模及干预 |
| 1.4 观察指标 |
| 1.5 统计学处理 |
| 二、实验结果 |
| 2.1 三箱社交实验 |
| 2.2 旷场实验 |
| 2.3 水迷宫实验 |
| 三、讨论 |
| 实验二 电针足三里对ASD模型小鼠外周炎症因子及海马区小胶质细胞活性的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 动物分组、造模及干预 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.4 统计学处理 |
| 二、实验结果 |
| 2.1 各组小鼠外周炎症因子TNF-α与IL-17a含量对比 |
| 2.2 各组小鼠海马区小胶质细胞活性对比 |
| 实验三 电针足三里对ASD模型小鼠肠道菌群的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 动物分组、造模及干预 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.4 肠道菌群检测 |
| 1.5 统计学处理 |
| 二、实验结果 |
| 2.1 测序结果的丰富度与多样性分析 |
| 2.2 正常鼠与ASD模型鼠肠道菌群的差异 |
| 2.3 模型组、百会组、足三里组肠道菌群差异分析 |
| 三、讨论 |
| 实验小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（2）轻度认知障碍老年人以正念为核心的睡眠干预方案构建及效果评价（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 研究背景与立题依据 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.3 研究问题 |
| 1.4 研究目的 |
| 1.5 研究意义 |
| 2 研究理论框架 |
| 2.1 操作性定义 |
| 2.2 研究理论框架 |
| 2.3 研究假设 |
| 3 技术路线图 |
| 第一部分 养老机构认知障碍老年人睡眠情况调查 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究对象和方法 |
| 3 研究结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 养老机构老年人睡眠质量较差,睡眠问题较突出 |
| 4.2 养老机构老年人睡眠质量受到多种因素的影响 |
| 4.3 养老机构老年人中轻度认知障碍患者睡眠质量较差 |
| 第二部分 以正念为核心的MCI老年人睡眠障碍干预方案的构建 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 干预方案初步构建 |
| 2.2 方案修订 |
| 2.3 方案的预试验 |
| 3 讨论 |
| 3.1 构建轻度认知障碍老年人正念睡眠干预方案的必要性 |
| 3.2 轻度认知障碍老年人正念睡眠干预方案的科学性 |
| 3.3 轻度认知障碍老年人正念睡眠干预方案的适用性 |
| 3.4 轻度认知障碍老年人正念睡眠干预方案的可行性、安全性 |
| 3.5 轻度认知障碍老年人正念睡眠干预方案的初步应用效果 |
| 第三部分 基于正念的失眠干预对养老机构MCI患者干预效果的随机对照研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 研究设计 |
| 2.2 研究对象 |
| 2.3 干预方案 |
| 2.4 观察指标 |
| 2.5 研究工具 |
| 2.6 资料收集 |
| 2.7 资料分析方法 |
| 2.8 科研质量控制 |
| 2.9 科研伦理 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 正念干预改善MCI患者的主观睡眠质量 |
| 4.2 正念干预改善MCI患者的总体认知功能 |
| 4.3 正念干预改善MCI患者的心理状态 |
| 4.4 正念干预对MCI患者脑电功率谱的影响 |
| 总结 |
| 1 本研究的主要结论 |
| 2 研究创新点 |
| 3 研究局限性及今后研究方向 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 正念疗法用于老年认知障碍患者的研究现状 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）基于数据挖掘探究王素梅教授治疗儿童多动症经验（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 注意力缺陷多动障碍的中医研究 |
| 1 中医病名认识 |
| 2 中医病因病机认识 |
| 3 中医治疗 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 注意力缺陷多动障碍的西医研究 |
| 1 流行病学研究 |
| 2 病因研究 |
| 3 治疗研究 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 综述三 数据挖掘在名医经验传承方面的研究进展 |
| 1 数据挖掘的概述 |
| 2 数据挖掘在中医药行业的应用 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 基于数据挖掘探究王素梅教授治疗儿童多动症经验 |
| 1 一般资料 |
| 2 研究标准 |
| 3 研究方法 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 6 王素梅教授治疗儿童多动症的经验总结 |
| 7 不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（4）MEF2C基因沉默对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力及大脑皮层分子病理改变的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 Nrf2-ARE通路在阿尔茨海默病发病机制中的作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（5）2型糖尿病脑组织尼古丁受体的改变及增强α7尼古丁受体功能改善糖尿病小鼠空间学习记忆障碍的分子机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4.结论 |
| 参考文献 |
| 综述 脑胰岛素抵抗:2型糖尿病认知损害的潜在基础 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（6）CREB调控海马GABAA受体表达在耐药性癫痫中的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 CREB在正常大鼠原代海马神经元中调控GABA_A受体亚基蛋白表达 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 CREB在氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型中调控GABA_A受体亚基蛋白表达及癫痫发作 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 氯化锂-匹罗卡品大鼠耐药性癫痫模型认知功能障碍和苔藓纤维出芽 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 CREB蛋白与癫痫研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（7）ZL006在七氟烷引起小鼠早期记忆提取障碍中的作用及其机制的探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 老年术后认知功能障碍与麻醉的影响 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（8）灯盏乙素对β淀粉样蛋白诱导的SH-SY5Y细胞中Glu/GABA代谢通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 Glu/GABA能神经系统与阿尔茨海默病的关系 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（9）激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体（α7nAchR）增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 CLP建立小鼠SAE模型 |
| 1.2.2 条件性恐惧实验检测小鼠海马依赖的学习记忆能力 |
| 1.2.3 新物体识别实验检测小鼠的长期或短期记忆的形成能力 |
| 1.2.4 Western blot法检测脑组织α7nAchR的蛋白水平 |
| 1.2.5 免疫荧光组织化学染色法检测ARG1和Iba-1的表达确定脑组织M2型小胶质细胞比例 |
| 1.2.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 SAE小鼠学习记忆能力降低 |
| 2.2 SAE小鼠海马α7nAchR蛋白水平降低 |
| 2.3 GST-21减轻SAE小鼠学习记忆障碍 |
| 2.4 GST-21增加SAE小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量 |
| 3 讨论 |
（10）脐带组织对大鼠学习记忆损伤的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.1.3 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 行为学检测 |
| 1.2.2 大鼠海马HE染色 |
| 1.2.3 免疫组化 |
| 1.2.4 蛋白分子检测 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 全脑照射后大鼠体重变化 |
| 1.3.2 全脑照射引起大鼠学习记忆损伤 |
| 1.3.3 全脑照射与大鼠海马功能损伤 |
| 1.3.4 全脑照射引起大鼠海马神经细胞损伤 |
| 1.3.5 全脑照射激活大鼠海马区炎症通路 |
| 1.3.6 脐带组织缓解放疗引起的学习记忆损伤 |
| 1.4 小结 |
| 参考文献 |
| 第2章 综述 放疗对脑组织损伤及相关机制的研究 |
| 2.1 颅脑放疗与组织 |
| 2.1.1 颅脑放疗与前额皮质 |
| 2.1.2 颅脑放疗与海马 |
| 2.1.3 颅脑放疗与白质 |
| 2.2 颅脑放疗与细胞 |
| 2.2.1 放疗与神经元 |
| 2.2.2 放疗与小胶质细胞 |
| 2.2.3 放疗与星形胶质细胞 |
| 2.2.4 放疗与少突胶质细胞 |
| 2.3 放疗损伤的相关机制 |
| 2.3.1 放疗与血管损伤 |
| 2.3.2 放疗与炎症 |
| 2.3.3 放疗与CNS早期变化 |
| 2.4 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 学位论文数据集 |
四、音频电对小鼠学习记忆障碍的改善作用（论文参考文献）
- [1]调肠治神法针刺对孤独症儿童临床疗效及模型小鼠菌/脑效应研究[D]. 陈栋. 南京中医药大学, 2021(01)
- [2]轻度认知障碍老年人以正念为核心的睡眠干预方案构建及效果评价[D]. 蔡真真. 福建医科大学, 2021(02)
- [3]基于数据挖掘探究王素梅教授治疗儿童多动症经验[D]. 唐艳鹏. 北京中医药大学, 2021(08)
- [4]MEF2C基因沉默对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力及大脑皮层分子病理改变的影响[D]. 任家谋. 贵州医科大学, 2020(04)
- [5]2型糖尿病脑组织尼古丁受体的改变及增强α7尼古丁受体功能改善糖尿病小鼠空间学习记忆障碍的分子机制[D]. 徐毅. 贵州医科大学, 2020(04)
- [6]CREB调控海马GABAA受体表达在耐药性癫痫中的作用研究[D]. 吴静. 贵州医科大学, 2020(04)
- [7]ZL006在七氟烷引起小鼠早期记忆提取障碍中的作用及其机制的探讨[D]. 余晓旭. 贵州医科大学, 2020(04)
- [8]灯盏乙素对β淀粉样蛋白诱导的SH-SY5Y细胞中Glu/GABA代谢通路的影响[D]. 李晓宇. 贵州医科大学, 2020
- [9]激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体（α7nAchR）增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病[J]. 黄鑫怡,郑依婷,顾婷婷,王佳佳,方宗平. 细胞与分子免疫学杂志, 2019(06)
- [10]脐带组织对大鼠学习记忆损伤的影响[D]. 朱泽军. 华北理工大学, 2019(01)