一、涂片查找抗酸杆菌的方法改进(论文文献综述)
曹翌明,刘欣,黄业伦,黄艳君,罗春明,关平,刘志辉,刘健雄,刘文[1](2020)在《支气管冲洗液涂片与培养在肺结核诊断中的价值分析》文中研究指明目的探讨应用支气管冲洗液进行结核病病原学检查的临床应用价值。方法 2019年1月至12月应用广州市胸科医院医学检验科LIS系统资料,对比分析在3周内并行痰、支气管冲洗液金胺O荧光染色涂片与分枝杆菌培养结果情况。结果 115例患者支气管冲洗液直接涂片与痰直接涂片、307例患者支气管冲洗液夹层杯法涂片与其痰直接涂片比较,应用支气管冲洗液样本的阳性检出率显着低于痰样本(P<0.001,P=0.049);应用MGIT 960系统对882例患者支气管冲洗液和痰进行分枝杆菌培养,支气管冲洗液、痰的培养阳性率分别为37.53%和33.90%,而且89例(10.09%)痰培养阴性患者支气管冲洗液培养阳性,差异具有统计学意义(χ2=353.555,P<0.001)。结论应用支气管冲洗液进行分枝杆菌培养是结核病病原学诊断的重要手段,而其涂片染色检查则价值不大。
牟宇泽[2](2020)在《2型糖尿病并发肺结核患者血糖管理及营养状况与转归预后的关联研究》文中研究说明背景及目的:有研究表明,2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,DM)患者患活动性肺结核(Pulmonary tuberculosis,PTB)的风险是非糖尿病患者的3.59倍。与单纯PTB患者相比,糖尿病并发肺结核(DM-PTB)患者的结核特征性症状,包括咳嗽、盗汗、咯血等更为严重;治疗过程中体重恢复困难,病程延长;且更易发展为耐多药肺结核,导致治疗失败、复发、死亡的风险增高。血糖管理对糖尿病转归预后是至关重要的,血糖管理可分为血糖控制水平与血糖波动水平两方面。而结核作为一种感染性疾病可以通过引起应激性高血糖、影响降糖药物效果以及增加胰岛素需求量而导致糖尿病并发肺结核患者的血糖管理不良,引起并促进糖尿病病情恶化。已有的研究发现血糖控制不良与肺结核合并糖尿病患者就诊时的症状严重程度及肺部空洞率呈正相关,但对于治疗转归及预后的影响,目前的报道尚不多见且结论并不一致。同时,结核患者大多存在营养不良,营养状况与疾病转归存在显着关联,已有研究发现营养不良与结核患者治疗前两个月体重恢复较慢的风险增加有关,且营养不良患者复治及结核死亡的风险均要显着升高。DM-PTB患者的营养状况更加复杂,其对疾病转归的影响尚鲜见报道。因此,本研究的主要目的是探讨血糖管理情况及营养状况对糖尿病并发初治肺结核患者治疗转归预后的影响,并对DM-PTB患者抗结核治疗2个月(强化期治疗)痰转阴失败及抗结核治疗不理想结局,包括抗结核治疗失败及死亡等的影响因素进行探究,以期优化DM-PTB患者的抗结核治疗策略、改善转归预后提供科学依据。方法:本研究分为两章,第一章探讨血糖管理与DM-PTB患者转归预后的关联,血糖管理包括基于糖化血红蛋白(HbA1c)指标评价的血糖控制水平和根据指尖血糖变异程度及波动幅度评价的血糖波动情况。第一章中血糖控制对DM-PTB患者转归预后的影响采用前瞻性队列研究的方法。根据基线糖化血红蛋白水平将患者分为血糖控制良好(糖化血红蛋白<8.0%)和血糖控制不良(糖化血红蛋白8.0%)两组,比较两组患者的一般人口学特征、生活行为习惯及抗结核治疗过程中的结核特征症状、痰细菌学结果、影像学结果的变化。血糖波动采用纵向研究方法,根据血糖波动幅度将患者分为血糖正常波动组及血糖异常波动组;根据血糖变异系数将患者分为血糖低变异及血糖高变异两组。分别在基线、一个月时观察分析平均血糖波动幅度、血糖变异系数与结核特征性症状、痰菌转阴、肺部影像学特征等的关联。第一章纳入的患者为2017年12月至2019年12月期间,就诊于青岛市胸科医院,经临床诊断确诊为2型糖尿病并发初治肺结核的住院治疗患者,且需满足在入院时进行了糖化血红蛋白(HbA1c)指标的检测,或抗结核治疗开始后至少测量了2天(每天至少3次)日间不同时段指尖血糖值的患者。第二章采用前瞻性队列研究的方法,探讨营养状况对DM-PTB患者转归预后的影响。根据患者基线时的营养状况进行分组,比较两组患者的一般人口学特征、生活行为习惯及治疗过程中的结核特征症状、痰细菌学结果、影像学结果的变化。纳入自2018年3月至2019年3月期间,就诊于青岛市胸科医院,经临床诊断为2型糖尿病并发初治肺结核的住院治疗患者,且收集到抗结核治疗开始时(即基线)血液样本的患者,按患者基线是否患有低蛋白血症、淋巴细胞减少症、贫血以及体质指数(BMI)进行分组。采用单因素及多因素Cox回归模型判断2个月痰转阴失败及抗结核治疗不良结局的相关危险因素,用风险比(Hazard Ratio,HR)对影响因素与转归预后的关联强度进行评估,使用95%置信区间(95%CI)对总体参数的范围进行估计。结果:在血糖管理与DM-PTB患者转归预后的关联分析中(第一章),在基线时共纳入404例DM-PTB患者。研究发现DM-PTB患者中基线血糖控制不良的患者占54.70%、血糖异常波动的患者占52.17%、血糖高变异的患者占55.28%。血糖管理不良与患者基线结核症状及指征相关。且发现血糖控制不良的患者2个月痰转阴率更低,但并未发现最终治疗结局间存在差异。在对混杂因素(性别、年龄及糖尿病病程)进行调整后发现基线血糖控制不良(HR=2.01,95%CI:1.10-3.67)、吸烟者(HR=2.29,95%CI:1.07-4.02)及基线淋巴细胞减少症(HR=1.80,95%CI:1.01-3.19)会增加2个月痰转阴失败的风险。在对年龄、糖尿病病程、基线痰细菌学检查呈阳性以及基线糖化血红蛋白水平进行调整后发现,吸烟者(HR=2.11,95%CI:1.02-4.37)及基线低蛋白血症(HR=2.34,95%CI:1.18-4.61)是在接受抗结核治疗后,最终呈现不理想结局的独立危险因素。在营养状况对DM-PTB患者转归预后影响的研究中(第二章),基线时共纳入245例DM-PTB患者。发现DM-PTB患者基线合并低蛋白血症的比例为24.49%、合并淋巴细胞减少症的患者占23.27%、合并贫血的患者占25.71%、BMI 24.0kg/m2的患者占34.04%。无论抗结核治疗强化期还是巩固期,合并低蛋白血症的患者痰转阴率均下降,并且抗结核治疗不理想结局的风险升高。在对性别、年龄、糖尿病病程及吸烟情况进行调整后,发现基线患有低蛋白血症(HR=1.86,95%CI:1.08-3.20)是2个月痰转阴失败的独立危险因素;并在对混杂因素进行调整后发现,低蛋白血症(HR=1.85,95%CI:1.08-3.15)还增加了抗结核治疗后呈现不理想结局的风险。结论:基线血糖控制不良及营养不良的糖尿病并发肺结核患者抗结核治疗期间痰转阴率降低,且基线营养不良的患者在抗结核治疗后呈现不理想结局的可能性升高。基线血糖控制不良、淋巴细胞减少症、低蛋白血症、吸烟者会增加患者抗结核治疗2个月痰转阴失败的风险;基线合并低蛋白血症、吸烟者会增加抗结核治疗不理想结局的风险。故此应加强DM-PTB患者的血糖管理,严格的血糖管理可能会在一定程度上改变基线血糖管理不良对治疗结局的影响;同时加强烟草的管控力度以及改善患者健康状况,扭转营养不良,这能够改善肺结核转归过程,降低DM-PTB患者抗结核治疗不理想结局的风险。
张倩[3](2020)在《RQ-PCR检测对肺结核临床诊断价值的研究》文中研究指明目的:通过实时荧光定量PCR(Real-time Quantititative polymerase chain reaction,RQ-PCR)技术检测结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(Mycobacterium TuberculosisDeoxyribonucleic acid,TB-DNA),观察其诊断肺结核的临床价值,着重探讨其对结核性胸膜炎的临床诊断价值。方法:收集2019年01月至2020年01月在西安医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科和陕西省结核病防治院住院治疗的患者共122例,将其分为两组,包括肺结核组61例,非结核组61例,其中肺结核组包括结核性胸腔积液组25例,非结核组包括非结核性胸腔积液组31例。所有纳入本研究的患者收集临床资料,并在入院48小时内行胸腔穿刺术或胸腔闭式引流术收集胸水标本,或获取深部痰标本,或行电子支气管镜检查获取肺泡灌洗液标本,采用RQ-PCR技术检测标本中TB-DNA;对于存在胸腔积液的患者同时行胸水常规、生化、ADA、外周血T-SPOT等检查。采用Shapiro-Wilk(W检验)、t检验、Man Whitney U检验、?2检验进行相关统计分析,以P<0.05具有统计学差异,P<0.01具有显着统计学差异。分别统计入组患者TB-DNA的阳性率及阴性率;分别统计胸腔积液TB-DNA、胸腔积液ADA、外周血T-SPOT三种诊断方法单项检测的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值,以及串联联合检测(胸腔积液TB-DNA、胸腔积液ADA、外周血T-SPOT三种诊断方法结果均为阳性,则视串联联合检测结果为阳性)和并联联合检测(胸腔积液TB-DNA、胸腔积液ADA、外周血T-SPOT三种诊断方法任何一种结果为阳性,则视并联联合检测结果为阳性)的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果:1.肺结核组和非结核组TB-DNA阳性率分别为65.57%、0.00%,肺结核组TBDNA阳性率明显高于非结核组,两组比较具有显着统计学差异(P<0.01);结核性胸腔积液组和非结核性胸腔积液组TB-DNA阳性率分别为24.00%、0.00%,结核性胸腔积液组TB-DNA阳性率明显高于非结核性胸腔积液组,两组比较具有显着统计学差异(P<0.01)。2.结核性胸腔积液组和非结核性胸腔积液组ADA阳性率分别为56.00%、3.23%,结核性胸腔积液组ADA阳性率明显高于非结核性胸腔积液组,两组比较具有显着统计学差异(P<0.01)。结核性胸腔积液组ADA含量的中位数和四分位数间距为50.00(31.75-64.00)U/L,非结核性胸腔积液组ADA含量的中位数和四分位数间距为6.30(4.10-13.00)U/L,两组比较具有显着统计学差异(Z=-5.447,P=0.000<0.01)。3.结核性胸腔积液组和非结核性胸腔积液组T-SPOT阳性率分别为96.00%、25.81%,结核性胸腔积液组T-SPOT阳性率明显高于非结核性胸腔积液组,两组比较具有显着统计学差异(P<0.01)。4.胸腔积液TB-DNA、胸腔积液ADA、外周血T-SPOT单项检测结果:TB-DNA的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为24.00%、100.00%、100.00%和62.00%;ADA的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为56.00%、96.77%、93.33%和73.17%;T-SPOT的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.00%、74.19%、75.00%和95.83%。5.外周血T-SPOT检测灵敏度高于胸腔积液ADA,两组比较具有统计学差异(?2=6.750,P<0.05);胸腔积液ADA检测灵敏度高于胸腔积液TB-DNA,两组比较具有统计学差异(?2=4.083,P<0.05)。胸腔积液TB-DNA检测特异度高于外周血T-SPOT,两组比较具有统计学差异(?2=6.125,P<0.05);胸腔积液ADA检测特异度高于外周血T-SPOT,两组比较具有统计学差异(?2=4.000,P<0.05);胸腔积液TB-DNA检测与胸腔积液ADA检测的特异度比较无统计学差异(?2=0.000,P>0.05)。6.胸腔积液TB-DNA、胸腔积液ADA、外周血T-SPOT三种诊断方法行串联联合检测时,特异度、阳性预测值和阴性预测值分别高达100.00%、100.00%和100.00%,灵敏度为16.00%;行并联联合检测时,灵敏度、阴性预测值分别高达100.00%、100.00%,特异度为70.97%,阴性预测值为73.53%。7.结核性胸腔积液组胸水白细胞计数、胸水总蛋白、ADA、LDH含量明显高于非结核性胸腔积液组,两组比较具有显着统计学差异(P<0.01);结核性胸腔积液组胸水中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比和非结核性胸腔积液组相比较均无统计学差异(P>0.05);结核性胸腔积液组胸水CEA含量明显低于非结核性胸腔积液组,两组比较具有显着统计学差异(P<0.01)。8.结核性胸腔积液组外周血血沉、肝功总蛋白含量高于非结核性胸腔积液组,两组比较具有统计学差异(P<0.05);结核性胸腔积液组外周血FIB含量明显高于非结核性胸腔积液组,两组比较具有显着统计学差异(P<0.01);结核性胸腔积液组外周血CRP、PCT、D-二聚体和非结核性胸腔积液组相比较无统计学差异(P>0.05)。结论:1.胸腔积液TB-DNA与胸腔积液ADA或外周血T-SPOT进行2种诊断方法串联(胸腔积液TB-DNA+胸腔积液ADA、胸腔积液TB-DNA+外周血T-SPOT)或3种诊断方法串联(胸腔积液TB-DNA+胸腔积液ADA+外周血T-SPOT)联合检测具有很高的特异度,可以更好的降低临床误诊率。2.胸腔积液TB-DNA与胸腔积液ADA或外周血T-SPOT进行2种诊断方法并联(胸腔积液TB-DNA+胸腔积液ADA、胸腔积液TB-DNA+外周血T-SPOT)或3种诊断方法并联(胸腔积液TB-DNA+胸腔积液ADA+外周血T-SPOT)联合检测具有较高的灵敏度,可以更好的降低临床漏诊率。3.RQ-PCR检测胸腔积液TB-DNA诊断结核性胸膜炎具有较高特异度,但灵敏度低,成本相对较高,建议临床工作中与其他指标联合使用。
柏极[4](2020)在《抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖荧光抗体的制备》文中研究说明目的制备抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomanan,LAM)荧光抗体,为应用于痰涂片镜检打下基础。方法LAM经兔皮下免疫后,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测抗体效价,兔心脏采血获得足量高效价的兔血清。兔血清依次经过盐析法粗提,G蛋白亲和层析纯化抗体,通过SDS-PAGE鉴定纯化效果,透析除盐后浓缩,BCA法检测抗体浓度。经荧光素异硫氰酸酯(FITC)偶联,测定F/P值,获得荧光抗体。结果成功进行6次LAM兔皮下免疫,成功构建ELISA法检测抗体效价,测得抗体效价达到1:51200,顺利行心脏采血,获得约100 mL含抗LAM抗体兔血清。顺利完成盐析法,G蛋白亲和层析纯化抗体,经SDS-PAGE鉴定,获得了高纯度多克隆IgG。抗体经除盐浓缩,BCA法测定抗体浓度为7.26 mg/mL。经FITC偶联,制备荧光抗体,测F/P值2.7。结论成功制备荧光抗体,为建立直接免疫荧光法检测痰中结核分枝杆菌打下基础。
常中宝[5](2019)在《人型结核分枝杆菌新靶标mts90临床应用分析》文中认为背景:结核病在世界范围内,每年大约造成100-200万人死亡,在本世纪仍然是严重威胁人类健康的主要传染病,虽然感染率及死亡率有一定的下降趋势,但总体医疗负担仍然很重。结核病的早期诊断对于结核病的治疗以及控制结核分枝杆菌的广泛传播具有重要意义,目前结核病的实验室诊断主要依赖痰涂片抗酸染色镜检法、结核分枝杆菌培养和核酸扩增检测,但各种方法均有不同的缺点或受到实验室环境、设备的限制,很难得到全面推广,因此迫切需要一种新的结核病实验室诊断方法,实现更高效的筛查策略。随着结核分枝杆菌全基因组测序研究的深入开展,除了传统的16SrRNA、23SrRNA、IS6110、rpoB和mtp40等分子标志,新近发现的分子靶标和分子生物学方法的改进相结合,可稳健地用于结核分枝杆菌的构建及检测。目的:mts90是一种最新发现的人型结核分枝杆菌的分子靶标,但mts90的检测较为困难,临床中难以常规开展。本研究旨在建立一种敏感性及特异性均高、检测程序快速简便、更适用于实际临床的mts90检测方法。同时,规范化收集结核菌感染的临床标本,以探讨新构建的检测方法对结核病的临床应用价值。方法:以重组酶聚合酶扩增(RPA)技术对人型结核分枝杆菌的分子靶标mts90进行扩增检测。对所有引物和探针的二级结构进行检测并进行第一轮检测,筛选出最佳引物序列。对构建的mts90质粒标准品进行连续稀释,分别稀释成8 copies、8×101copies、8×102copies、8×103copies、8×104copies、8×105copies浓度,分别分析mts90 RPA检测法的灵敏度。以mts90质粒为阳性对照,以三种结核分枝杆菌菌种ATCC27294(人型结核分枝杆菌)、CMCC95049(非洲结核分枝杆菌)、CMCC95006(胃肠型结核分枝杆菌)及常见呼吸道病原体,如肺炎链球菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等为模板,提取所有病原体的基因组DNA,对比分析mts90 RPA法与PCR-荧光探针法以评价方法的特异性。对2018年6月-2019年2月收治的70例结核患者,分别采用抗酸染色法、结核分枝杆菌培养法、PCR-荧光探针法和构建mts90 RPA法同时检测患者样品,以评价人型结核分枝杆菌新靶标mts90 RPA检测的临床应用价值。结果:(1)Western-blot检测发现,引物F3/R7(序列为CCTCTGACCAGGCGACATAG ACAACAGTACCC/CACGCGGCCGTCGGGGCCGGTGTAGCTGGCTTGCC)的扩增效果最明显。探针(序列为CAGAGCATAGACACGATCTTGGAAGGTTTCAG T(THF)AAC(BHQ-dT)CCGTGGCGTGTCTCTTATTG-Spacer)筛选引物的反应产物蛋白表达最明显。可用于进一步实验。(2)当mts90质粒标准品的稀释液浓度介于8×1008×105copies之间时,质粒均可得到明显的扩增信号,且随着浓度的升高,扩增荧光信号越明显。为避免反应偶然性,我们对每个浓度稀释液进行了至少3次的重复检测,均得到阳性反应,大约在10min左右时,出现明显的扩增信号,且反应时间与模板浓度呈显着负相关关系。(3)RPA方法检测发现,仅有ATCC27294(人型结核分枝杆菌)菌种出现了阳性扩增信号,而其他菌种,包括CMCC95049(非洲结核分枝杆菌)、CMCC95006(胃肠型结核分枝杆菌)均未观察到扩增信号。琼脂糖凝胶电泳检测发现了与PCR反应相同的趋势。这表明,mts90 RPA具有较高的特异性。(4)我们对mts90 RPA法与其它三种最常用检测方法的检测性能进行比较分析,结果发现,mts90 RPA法检测阳性率显着高于痰涂片抗酸染色镜检法(卡方值为12.919,P<0.01),与结核杆菌培养法和PCR-荧光探针法相比无显着差异(P>0.05)。mts90 RPA、PCR的平均检测时间为11.9min、28.4min,最大检测时间分别为为19.6min、75min。这表明,两种检测方法的特异度及敏感度均接近,可在一定程度上相互替换。但mts90 RPA法的检测时间显着较短,且操作步骤简单,更具有操作优势。结论:结核分枝杆菌新靶标mts90 RPA检测方法较传统痰涂片抗酸染色镜检法和结核杆菌培养法具有更高敏感性,与传统PCR方法相比,其操作更加简便、反应时间更短,由于该方法对实验环境和条件要求不高,因此更适合在基层医疗机构普及,为结核病早期诊断提供了新的筛查工具。
曹鹏遥[6](2019)在《CA125、CA199、CEA在良恶性胸腔积液诊断中的应用》文中进行了进一步梳理目的检测患者良性胸腔积液、恶性胸腔积液与血清中CA125、CA199及CEA的表达水平和含量,以进一步探讨其在恶性胸腔积液和良性胸腔积液临床诊断中的意义。方法选取2015年11月-2018年12月经秦皇岛市第三医院诊断为胸腔积液的患者270例作为研究对象,其中患者男女比例5:3,平均年龄64.47±1.23岁,其中良性组包括结核性胸腔积液组120例、炎性胸腔积液40例、漏出性胸腔积液30例。恶性组为恶性胸腔积液组80例,取患者的血清和胸腔积液作为研究对象,同时选取10例查体健康人血清作对照组,采用酶联免疫吸附法进行检测患者血清中和胸腔积液中的CA125、CA199、CEA的表达水平和含量,并进行统计分析,绘制ROC曲线研究CA125、CA199、CEA的敏感度、特异度、准确性,并分析单一检测与三者联合检测的差别,为临床上恶性胸腔积液和良性胸腔积液临床早期诊断提供理论依据。结果1恶性胸腔积液组血清中CA125、CA199、CEA的表达和含量明显高于良性组,有统计学意义(P<0.05);良性组间血清中CA125、CA199、CEA的表达和含量无统计学意义,但明显高于对照组。2恶性胸腔积液组胸腔积液中CA125、CA199、CEA的表达和含量明显高于良性组,有统计学意义(P<0.05);良性组间胸腔积液中CA125、CA199、CEA的表达和含量无统计学意义。3恶性胸腔积液中CA125、CA199、CEA的表达和含量显着高于其血清的水平,存在显着差异性(P<0.05)。4结核性胸腔积液中CA125、CA199、CEA的表达和含量显着高于其血清的水平,存在显着差异性(P<0.05),随着抗结核的治疗,水平明显下降。5单一检测CA125、CA199、CEA的敏感度、特异度、准确性明显低于三者联合检测。结论1在血清与胸腔积液中CA125、CA199、CEA的表达和含量对鉴别诊断良性和恶性积液具有一定作用。2三者联合检测比单一检测对恶性与良性胸腔积液的鉴别及诊断具有一定意义。3血清学检测为不能行胸腔穿刺的患者胸腔积液的诊断提供一定思路。图3幅;表12个;参86篇。
高建鹏[7](2019)在《塔河马鹿源副结核分枝杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究》文中指出目的:副结核病又称约翰病,是由副结核分枝杆菌引起牛、羊、马鹿等反刍动物的一种渐进性消瘦和肉芽肿肠炎为主要特征的传染病。目前,我国马鹿的存栏约13万头,主要有3个品种,分布在塔里木河流域的塔河马鹿是其中之一,养鹿业已成为当地畜牧业发展的重要组成。但由于管理环节的缺失和防疫意识的淡薄,导致以腹泻、消瘦为主要特征的各种疫病高发,发病原因与副结核感染有关,但尚未进行相关的深入研究。为此,本研究以塔河马鹿为对象,进行以下方面研究:方法:采用现场流行病学调查的方法,收集塔河流域某马鹿养殖场的环境、气候、病史等现场资料,查找可能的传染源及传播途径;采集塔河流域5个鹿场共214份公鹿血清,采用ELISA方法调查副结核病的感染现状;分别无菌采集疑似副结核病感染的2头马鹿肠内容物和肠系膜淋巴结,去污处理后接种于卵黄培养基中进行病原的分离纯化;采用生理生化、培养特性结合16S rRNA、IS900的PCR扩增进行种的鉴定,同时扩增DMC、IS1311基因进行亚型鉴定;选择最适的培养基并优化细菌培养方法;以BALB/c小鼠为试验模型进行动物回归试验。结果:试验一塔河马鹿副结核病的现场和血清流行病学调查现场调查发现,鹿场内奶牛是可能的传染源,粪口途径为主要的传播途径;鹿场间为公鹿的引种更换;血清流行病学调查结果表明,5个试验鹿场均有副结核病的感染,其总阳性率为7.01%(15/214),最高为11.32%(6/53),最低为2.70%(1/37)。试验二副结核分枝杆菌的分离鉴定及培养条件优化从肠内容物中分离到一株副结核分枝杆菌,将该菌命名为MAPxj-RD。通过细菌培养查明了MAPxj-RD的生物学特性,16S rRNA、IS900、DMC、IS1311与保护性抗原基因检测均为阳性,两种亚型鉴定方法均显示分离株为C型副结核分枝杆菌;最适培养基为卵黄培养基;HPC去污比HPC和抗生素共同去污更容易分离到副结核分枝杆菌;初代接种物二次盲传后具可分离到副结核分枝杆菌;当液深<4 mm时细菌生长速度更快。试验三副结核分枝杆菌MAPxj-RD的动物试验动物试验表明,小鼠体重在试验周期中呈上升趋势,而检测粪便后未发现副结核分枝杆菌;使用优化的培养方法从小鼠的肝脏中成功分离到MAPxj-RD;病理切片经抗酸染色与HE染色后均发现MAPxj-RD的存在,且引起了与副结核病相似的病理变化;经PCR检测发现每只小鼠脏器中均有MAPxj-RD,肠组织中检出率最高,为100%(6/6),肾脏最低,为16.67%(1/6)。结论:综上,副结核病在塔河流域的鹿场已普遍存在,自然环境与鹿场环境极利于副结核病的传播,该病已成为鹿场的重要传染病;分离到一株C型副结核分枝杆菌并命名为MAPxj-RD,查明了MAPxj-RD的生物学特性与分子特性;对细菌培养方法进行了优化,并证明该方法可提高分离成功率,缩短培养时间;动物试验证明MAPxj-RD具有较强的致病性,确为塔河马鹿发病的致病菌。
唐怡敏[8](2019)在《胸腔积液IGRA联合生物标记物优化结核性和恶性胸膜炎鉴别诊断》文中进行了进一步梳理背景:胸腔积液(PE)是一种非常常见的疾病,由于其病因多而复杂,发病机制各不相同,确诊常常需要侵入性手段。已有文献报道,结核性胸膜炎与恶性胸腔积液表现均以淋巴细胞为主,常规及生化结果常相似。鉴于结核性胸腔积液(TPE)和恶性胸腔积液(MPE)两种疾病的治疗方案及预后均存在非常大差异,早期鉴别诊断显得尤为重要。但使用现有的各种生化指标,如ADA指标水平、胸腔积液生化、肿瘤标志物等单用于结核性胸膜炎与恶性胸腔积液鉴别诊断效能是有限的。因此,本研究中,我们探索一种联合诊断方法仅通过仅收集胸腔积液而无需有创组织学检查就能够容易地区分这两种疾病的方法。目的:探讨评估结核分枝杆菌特异性蛋白γ干扰素释放试验(Interferon gamma Release Assay,IGRA)酶联免疫斑点(Enzyme-linked immunospot detection technology;ELISPOT)检测技术,胸腔积液常规实验室生物标志物、肿瘤标志物CEA在结核性胸膜炎和恶性胸腔积液诊断中的表现;评估IFN-γ-ELISPOT检测和常规实验室生物标志物中腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase,ADA)、癌胚抗原(carcinoma-embryonic antigen,CEA)在结核性胸膜炎(tuberculous pleurisy,TPE)和癌性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)鉴别诊断中的表现;多参数优化结核性胸腔积液与恶性胸腔积液之间的鉴别诊断能力。方法:对2010年1月至2016年12月深圳市第三人民医院住院的胸腔积液患者201例进行分析(确诊为结核性胸膜炎的患者共143例;确诊为恶性胸腔积液的患者58例)。检测患者的血及胸腔积液标本结核分枝杆菌特异性蛋白的Y干扰素水平,并与胸腔积液生化,ADA、CEA检测结果一起分别进行统计分析,最终进行统计学ROC分析以获得胸腔积液ADA、CEA检测结核性胸膜炎的最佳截断值。结果:(1)本次分析结果提示,恶性胸腔积液患者胸腔积液CEA值明显高于结核性胸膜炎CEA值,ROC曲线分析曲线下面积(AUC)为0.9713,用于诊断恶性胸腔积液准确性高;本研究统计数据分析以CEA cut-off值为2.025ng/L,CEA检测胸腔积液用于鉴别诊断恶性胸膜炎的敏感度和特异度最佳。(2)结核性胸腔积液组患者胸腔积液中ADA值明显高于检测到的恶性胸腔积液组ADA值,差异显着,有统计学意义;以ADA cut-off值为35U/L,用于胸腔积液鉴别诊断结核性胸膜炎的敏感度和特异度高;其中ROC分析AUC曲线下面积为0.9585,提示检测胸腔积液中的ADA是诊断结核性胸膜炎的一项敏感诊断指标。(3)结核性胸腔积液组患者胸腔积液中检测到的血及胸腔积液用ESAT-6蛋白和peptid-pool肽刺激的IFN-Y-ELispot值均明显高于恶性胸腔积液组;差异有统计学意义(P<0.0001)。用ESAT-6蛋白和peptid-pool肽刺激的PFMC中抗原特异性IFN-Y斑点形成细胞(SFC)的值约2-4倍于来自同一TPE患者的外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC);(ROC)分析证明胸腔积液单核细胞(Pleural effusion mononucleus,PFMC)ELISPOT测定法在曲线下的面积(AUC)高于PBMC ELISPOT测定法;均提示与PBMC ELISPOT测定相比,使用PFMC ELISPOT诊断结核性胸膜炎诊断效能更高。(4)联合ELISPOT试验与ADA诊断结核性胸膜炎特异性由28.1%明显增加了特异性至98.5%,并且PPV同时增加至98.3%,有明显升高,差异有统计学意义。同样,胸腔积液IFN-γ-ELispot联合CEA诊断MPE的特异性,PPV也优于非联合诊断,但敏感性稍低(87.1%比99.3%,差异无统计学意义),意味着结核性胸膜炎与恶性胸腔积液鉴别诊断时,使用IFN-γ-ELispot与ADA、CEA联合诊断,可明显提高诊断效能。(5)我们将结核性胸膜炎患者通过胸腔镜检查镜下所示,将患者进一步分组,分为胸膜黏连组31例与无黏连组16例,对比其胸腔积液中生化指标,发现胸膜黏连组患者ADA值及LHD值均高于胸膜无黏连组患者指标,差异有统计学意义。结论:(1)诊断结核性胸膜炎,使用胸腔积液IFN-γ-ELispot检查较外周血IFN-γ-ELispot有优势;(2)在结核性胸膜炎的诊断中,胸腔积液ADA、结核分枝杆菌特异性蛋白的IFN-γ-ELispot值的诊断效能高,具有高特异性、高敏感性;在恶性胸腔积液诊断中,胸腔积液CEA值具有特异性高的特点;(3)联合各生化指标用于结核性胸膜炎与恶性胸腔积液鉴别诊断可提高鉴别诊断阳性率;将胸腔积液IFN-γ-ELispot、ADA值联合起来用于不明原因胸腔积液诊断可明显提高结核性胸膜炎诊断阳性率;将胸腔积液IGRA、ADA、CEA值联合起来用于结核性胸膜炎与恶性胸腔积液鉴别诊断,其诊断敏感性、特异性高。(4)ADA值和LDH值在结核性胸膜炎胸膜增厚患者中明显异常升高,可用于判断结核性胸膜炎胸膜增厚严重程度;胸腔积液IFN-γ-ELispot结果稳定,不受胸膜黏连增厚程度影响。
梁愈[9](2019)在《支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测对肺结核临床诊断的价值分析》文中研究表明目的:探讨支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测在肺结核临床诊断中的价值及在利福平耐药检测中的准确性。方法:回顾性分析成都市公共卫生临床医疗中心结核四病区2017年6月至2018年5月疑似肺结核的初诊患者167例,所有患者同时送检支气管肺泡灌洗液和痰液的抗酸染色涂片、BACTEC MGIT960培养、Xpert MTB/RIF检测,结核培养阳性者采用微孔板Alarmar-Blue法进行药敏试验。1、以临床最终诊断为金标准,确定肺结核组和非结核病组,比较三种检测方法在肺结核诊断中的价值及两种标本之间的差异;在标本间及检测方法间进行联合试验,探索最佳的肺结核诊断方案。2、以BACTEC MGIT960培养为金标准,探讨Xpert MTB/RIF检测在肺结核诊断中的价值;比较Xpert MTB/RIF检测和BACTEC MGIT960培养之间的一致性。3、以微孔板Alarmar-Blue法药敏试验结果作为金标准,探讨Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的准确性。结果:一般资料:167例疑似肺结核的初诊患者,男90例,女77例,年龄10-74岁,平均年龄(34.44±16.98)岁,肺结核组130例,非结核病组37例。三种检测方法对肺结核的诊断效能分析:以临床最终诊断为金标准,支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为65.4%、100.0%、100.0%、45.1%,均高于抗酸染色涂片和BACTEC MGIT960培养。通过比较ROC曲线下面积,两种标本的BACTEC MGIT 960和Xpert MTB/RIF检测的诊断价值均优于抗酸染色涂片,差异有统计学意义(P<0.05);支气管肺泡灌洗液中,Xpert MTB/RIF检测诊断价值优于BACTEC MGIT 960,差异有统计学意义(P<0.05);在BACTEC MGIT960培养和Xpert MTB/RIF两种检测中,两种标本之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。联合试验在肺结核诊断中的效能分析:通过比较ROC曲线下面积,两种标本中,BACTEC MGIT960联合Xpert MTB/RIF检测的曲线下面积最高,分别与抗酸染色+BACTEC MGIT960和抗酸染色+Xpert MTB/RIF检测相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。支气管肺泡灌洗液检测中,BACTEC MGIT960+Xpert MTB/RIF联合检测曲线下面积大于单一检测,与BACTEC MGIT960比较,差异有统计学意义(P<0.001),而与Xpert MTB/RIF比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2联BACTEC MGIT960+Xpert MTB/RIF组合中,支气管肺泡灌洗液与痰液标本间差异无统计学意义(P>0.05),单一标本与联合标本间比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。Xpert MTB/MTB检测结核分枝杆菌载量的分析:结核培养阴性的支气管肺泡灌洗液标本中,Xpert MTB/RIF检测出结核分枝杆菌17份,其结核分枝杆菌载量以极少量和少量为主。Xpert MTB/RIF检测与结核培养的一致性分析:以BACTEC MGIT 960培养结果作为金标准,支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RTF检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为91.9%、69.6%、80.0%、86.7%。Xpert MTB/RTF检测与BACTEC MGIT 960具有中等一致性。Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌对利福平耐药的分析:以微孔板Alarmar-Blue法药敏试验结果作为金标准,两种标本的Xpert MTB/RTF与药敏试验检测利福平耐药性的一致性系数均大于0.75,显示Xpert MTB/RIF和微孔板Alarmar-Blue法药敏试验对利福平耐药的检测一致性较好。结论:1、支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测在肺结核的临床诊断中具有较高的应用价值,且对利福平耐药性检测的准确度高,可推荐用于疑似肺结核患者的初筛。2、Xpert MTB/RIF与BACTEC MGIT960培养的联合检测,以及标本联合送检,可进一步提高肺结核诊断的准确率。
秦英,梁胜根,陈忠羡,原向伟,谢清华,付朝华,蒋雄健[10](2019)在《PCR XpertMTB/RIF系统对脊柱结核诊断价值研究》文中指出目的:应用聚合酶链反应(PCR)XpertMTB/RIF系统对疑似脊柱结核患者进行检测,获得结核分枝杆菌检出率与利福平耐药基因rpoB突变率,探讨该方法对脊柱结核诊断的临床价值。方法:收集2015年1月至2018年1月中山大学附属江门医院收治的100例脊柱结核患者,应用PCR XpertMTB/RIF系统进行结核分枝杆菌与利福平耐药基因rpoB的突变检测、抗酸染色、罗氏培养基中培养并药敏实验,以结核杆菌培养与药敏试验为金标准判断是否结核杆菌感染及利福平是否耐药;从而判断Xpert MTB/RIF检出结核分枝杆菌的检出率以及Xpert MTB/RIF系统用于rpoB基因突变检测结果。结果:62例经系统检出结核杆菌基因检出率62.00%(62/100);涂片抗酸染色阳性22例,检出率22.00%(22/100),差异具有统计学意义(P <0.05)。43份培养出结核分枝杆菌;培养阳性组经系统检出结核杆菌的检出率(97.67%)(42/43)。假定结核药敏实验为金标准,采用Xpert MTB/RIF行利福平耐药性检测的检出率为95.24%(20/21)。结论:Xpert MTB/RIF系统用于诊断脊柱结核的具有可行性,有高效、快速的优点。
二、涂片查找抗酸杆菌的方法改进(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、涂片查找抗酸杆菌的方法改进(论文提纲范文)
(2)2型糖尿病并发肺结核患者血糖管理及营养状况与转归预后的关联研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第一章 血糖管理与2型糖尿病并发肺结核患者转归预后的关联研究 |
引言 |
研究对象与方法 |
1 研究对象 |
2 样本含量的计算 |
3 伦理学要求 |
4 诊断标准 |
5 研究内容及方法 |
6 主要变量定义 |
7 质量控制 |
8 统计学方法 |
结果 |
1 一般特征比较 |
2 糖尿病相关指征 |
3 血糖管理与基线结核相关症状及指征关联性分析 |
4 强化期转归 |
5 6个月转归 |
6 临床治疗结局 |
7 抗结核治疗2个月痰转阴失败危险因素的单因素分析 |
8 抗结核治疗2个月痰转阴失败危险因素的多因素分析 |
9 抗结核治疗后呈现不理想结局危险因素的单因素分析 |
10 抗结核治疗后呈现不理想结局危险因素的多因素分析 |
讨论 |
第二章 营养状况与2型糖尿病并发肺结核患者转归预后的关联研究 |
引言 |
研究对象与方法 |
1 研究对象 |
2 伦理学要求 |
3 诊断标准 |
4 研究内容及方法 |
5 主要变量定义 |
6 质量控制 |
7 统计学方法 |
结果 |
1 一般特征比较 |
2 糖尿病相关指征 |
3 营养状况与基线结核相关症状及指征关联性分析 |
4 强化期转归 |
5 6个月转归 |
6 临床治疗结局 |
7 抗结核治疗2个月后痰转阴失败危险因素的单因素分析 |
8 抗结核治疗2个月后痰转阴失败危险因素的多因素分析 |
9 抗结核治疗后呈现不理想治疗结局危险因素的单因素分析 |
10 抗结核治疗后呈现不理想治疗结局危险因素的多因素分析 |
讨论 |
结论与建议 |
1 结论 |
2 建议 |
参考文献 |
综述 |
综述参考文献 |
攻读学位期间的研究成果 |
在校期间参与项目 |
致谢 |
(3)RQ-PCR检测对肺结核临床诊断价值的研究(论文提纲范文)
缩略词表 |
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
文献回顾 |
1.1 病原学诊断方法 |
1.1.1 涂片与染色 |
1.1.2 培养与分离 |
1.2 免疫学诊断方法 |
1.2.1 结核菌素皮肤试验 |
1.2.2 γ-干扰素释放试验 |
1.3 噬菌体生物扩增法 |
1.4 生化指标诊断方法 |
1.4.1 腺苷脱氨酶 |
1.4.2 白细胞介素-27 |
1.5 分子生物学诊断方法 |
1.6 结语 |
1 材料 |
1.1 主要仪器 |
1.2 痰液或肺泡灌洗液或胸腔积液的采集和处理 |
1.3 测定痰液或肺泡灌洗液或胸腔积液中TB-DNA含量 |
2 方法 |
2.1 研究对象 |
2.2.1 肺结核组 |
2.2.2 非结核组 |
2.2 病例纳入及排除标准 |
2.3 临床资料收集 |
2.4 统计学分析 |
3 结果 |
3.1 入组患者的基本资料 |
3.2 入组患者结核分枝杆菌核酸(TB-DNA)检测结果 |
3.3 不同性质胸腔积液ADA检测结果 |
3.4 不同性质胸腔积液患者外周血T-SPOT检测结果 |
3.5 三种方法诊断结核性胸腔积液的真实性评价和收益性评价 |
3.6 三种诊断方法灵敏度、特异度比较 |
3.7 三种诊断方法联合的价值比较及分析 |
3.8 不同性质胸腔积液相关化验数值比较及分析 |
3.9 不同性质胸腔积液患者外周血相关化验数值比较及分析 |
4 讨论 |
结论 |
参考文献 |
综述 |
参考文献 |
附录 |
技术路线图 |
个人简历和研究成果 |
个人简历 |
攻读学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
(4)抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖荧光抗体的制备(论文提纲范文)
缩略语 |
摘要 |
ABSTRACT |
前言 |
一、结核分枝杆菌LAM多克隆抗体的制备 |
1.1 材料与方法 |
1.1.1 实验动物 |
1.1.2 主要试剂及仪器 |
1.1.3 结核分枝杆菌LAM动物免疫 |
1.1.4 抗体效价测定 |
1.1.5 动物心脏采血 |
1.2 结果与分析 |
1.3 讨论 |
二、间接ELISA法检测抗体效价 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 主要试剂及仪器 |
2.1.2 酶联免疫吸附法检测血清抗LAM抗体 |
2.2 结果与分析 |
2.3 讨论 |
三、多克隆荧光抗体的制备 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 实验动物血清 |
3.1.2 主要试剂及仪器 |
3.1.3 多克隆抗体的纯化 |
3.1.4 抗体纯化后的SDS-PAGE验证 |
3.1.5 抗体的浓缩与BCA法浓度测定 |
3.1.6 抗体的FITC荧光标记 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 抗体的SDS-PAGE分析 |
3.2.2 抗体的浓缩与BCA法浓度测定 |
3.2.3 荧光抗体含量及F/P测定 |
3.3 讨论 |
小结与展望 |
参考文献 |
综述 结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖研究进展 |
综述参考文献 |
作者简历 |
致谢 |
(5)人型结核分枝杆菌新靶标mts90临床应用分析(论文提纲范文)
中英文缩略词对照表 |
中文摘要 |
英文摘要 |
1 前言 |
1.1 研究现状、成果 |
1.2 研究目的、方法 |
1.3 实验技术路线图 |
2 材料与方法 |
2.1 一般材料 |
2.2 标本采集与处理 |
2.3 主要仪器设备与试剂 |
2.4 结核分枝杆菌株 |
2.5 试验方法与步骤 |
2.6 统计学方法 |
3 结果 |
3.1 引物及探针筛选 |
3.2 RPA检测mts90 灵敏度 |
3.3 RPA法检测mts90 特异性 |
3.4 不同检测方法检测结果的对比分析 |
4 讨论 |
5 结论 |
6 参考文献 |
附录 |
致谢 |
综述 |
参考文献 |
(6)CA125、CA199、CEA在良恶性胸腔积液诊断中的应用(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
引言 |
第1章 实验研究 |
1.1 病例选择和分组 |
1.1.1 入选病例 |
1.1.2 知情同意书 |
1.2 实验方法与步骤 |
1.2.1 标本的采集和处理 |
1.2.2 观察指标 |
1.2.3 主要仪器和试剂 |
1.2.4 实验方法 |
1.3 统计学方法 |
1.4 结果 |
1.4.1 270例胸腔积液的临床一般资料 |
1.4.2 四组胸腔积液中CA125、CA199和CEA含量的比较 |
1.4.3 四组患者血清和对照组血清中CA125、CA199和CEA含量的比较 |
1.4.4 结核性胸腔积液和血清中CA125、CA199和CEA含量的比较 |
1.4.5 恶性胸腔积液和血清中CA125、CA199和CEA含量的比较 |
1.4.6 经过4周、12周、24周、48周治疗后结核性胸腔积液和血清中CA125、CA199、CEA的含量的变化 |
1.4.7 CA125、CA199和CEA的含量对胸腔积液性质的诊断价值 |
1.4.8 恶性胸腔积液患者ROC曲线 |
1.5 讨论 |
1.5.1 胸腔积液的一般资料分析 |
1.5.2 胸腔积液和血清中CA125、CA199和CEA的含量分析 |
1.5.3 治疗后结核性胸腔积液和血清中CA125、CA199、CEA的含量的变化分析 |
1.5.4 CA125、CA199和CEA的联合检测优于单一检测 |
1.6 小结 |
参考文献 |
第2章 综述 结核性胸膜炎实验室诊断进展 |
2.1 影像学检查 |
2.2 胸水常规生化 |
2.2.1 胸水常规生化检查 |
2.2.2 癌性胸腔积液检查 |
2.3 结核菌素试验 |
2.4 病原学检查胸腔积液抗酸染色、胸腔积液结核菌培养 |
2.5 分子生物学 |
2.5.2 XpertMTB/RIF |
2.6 胸膜活检 |
2.6.1 经皮穿刺胸膜活检术 |
2.6.2 内科胸腔镜下胸膜活检术 |
2.6.3 支气管镜代替内科胸腔镜 |
2.7 其他标志物 |
2.7.1 抗结核抗体检测 |
2.7.2 血清CA125 |
2.7.3 血清CA199 |
2.7.4 血清CEA |
2.8 其他多项指标综合或评分系统 |
2.9 小结 |
参考文献 |
结论 |
附录 |
致谢 |
导师简介 |
作者简介 |
学位论文数据集 |
(7)塔河马鹿源副结核分枝杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩略词表 |
第一章 绪论 |
引言 |
文献综述 |
1 副结核病介绍 |
2 副结核分枝杆菌 |
3 副结核病致病机理 |
4 副结核病流行病学 |
5 副结核病临床症状与剖检 |
6 副结核病诊断方法进展 |
6.1 细菌学诊断 |
6.2 分子生物学检测 |
6.3 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
7 副结核分枝杆菌分型方法 |
7.1 随机扩增多态性DNA(RAPD) |
7.2 扩增片段长度多态性(AFLP) |
7.3 脉冲场凝胶电泳(PFGE) |
7.4 IS900 限制性内切酶片段长度多态性(IS900-RFLP) |
7.5 重复序列 |
7.6 单核苷酸多态性(SNPs) |
7.7 全基因组测序(WGS) |
8 保护性抗原 |
8.1 烷基过氧化物还原酶(Ahp) |
8.2 超氧化物歧化酶(Sod) |
8.3 抗原85 复合物(Ag85) |
8.4 糖基转移酶与果糖-1,6-二磷酸醛缩酶 |
8.5 22ku脂蛋白(P22) |
8.6 假定蛋白MAP0862 |
第二章 试验研究 |
试验一 马鹿副结核病的现场和血清流行病学调查 |
1 材料 |
1.1 病料 |
1.2 主要试剂及耗材 |
1.3 主要仪器及设备 |
2 方法 |
2.1 现场流行病学调查 |
2.2 血清流行病学调查 |
3 结果 |
3.1 现场流行病学调查结果 |
3.2 血清流行病学调查结果 |
4 讨论 |
5 小结 |
试验二 副结核分枝杆菌的分离鉴定及培养条件优化 |
1 材料 |
1.1 病料 |
1.2 主要试剂及耗材 |
1.3 主要仪器及设备 |
2 方法 |
2.1 临床检查 |
2.2 培养基制作 |
2.3 涂片镜检 |
2.4 接种物处理 |
2.5 培养物接种与分枝杆菌素依赖性检测 |
2.6 部分培养与生化特性检测 |
2.7 副结核分枝杆菌DNA提取 |
2.8 副结核分枝杆菌分子鉴定 |
2.9 副结核分枝杆菌培养方法的优化 |
3 结果 |
3.1 临床与剖检结果 |
3.2 抗酸染色结果 |
3.3 细菌分离培养与分枝杆菌素依赖性检测结果 |
3.4 部分培养与生化特性检测结果 |
3.5 16S rRNA基因序列测定及IS900 分子鉴定 |
3.6 MAPxj-RD亚型鉴定结果 |
3.7 MAPxj-RD保护性抗原基因检测结果 |
3.8 MAPxj-RD培养方法优化结果 |
4 讨论 |
5 小结 |
试验三 副结核分枝杆菌MAPxj-RD的动物试验 |
1 材料 |
1.1 主要试剂及耗材 |
1.2 主要仪器及设备 |
2 方法 |
2.1 细菌培养与菌量测定 |
2.2 动物感染 |
2.3 粪样采集与体重测定 |
2.4 感染动物剖检及病料采集 |
2.5 MAPxj-RD分离培养 |
2.6 病理切片制作 |
2.7 组织基因组提取与IS900 基因检测 |
3 结果 |
3.1 体重测定结果 |
3.2 MAPxj-RD分离培养结果 |
3.3 病理切片结果 |
3.4 粪便镜检与PCR检测结果 |
3.5 组织IS900 基因检测结果 |
4 讨论 |
5 小结 |
第三章 全文总结 |
第四章 创新点 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 |
(8)胸腔积液IGRA联合生物标记物优化结核性和恶性胸膜炎鉴别诊断(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
主要英文缩略语索引 |
第1章 前言 |
第2章 对象与方法 |
2.1 研究对象 |
2.2 分组、采集资料 |
2.3 实验材料与仪器、检测方法 |
2.3.1 材料和仪器 |
2.3.2 实验方法 |
2.3.2.1 PFMC-Elispot 和 PBMC-Elispot 实验方法 |
2.3.2.2 胸腔积液中 ADA 的检测方法 |
2.3.2.3 胸腔积液中 CEA 的检测方法 |
2.3.2.4 胸腔积液标本抗酸染色实验 |
2.3.2.5 胸腔积液标本结核菌培养 |
2.3.2.6 其他生化指标检测方法 |
2.4 技术路线 |
2.5 伦理学 |
2.6 统计学方法 |
第3章 结果 |
第4章 讨论 |
第5章 结论 |
参考文献 |
文献综述 艾滋病并发菌阴肺结核诊治中支气管肺泡灌洗液检测的应用进展 |
参考文献 |
攻读学位期间发表的学术论文 |
致谢 |
(9)支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测对肺结核临床诊断的价值分析(论文提纲范文)
中英文缩略词表 |
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
结论 |
参考文献 |
综述 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(10)PCR XpertMTB/RIF系统对脊柱结核诊断价值研究(论文提纲范文)
1 资料与方法 |
1.1 一般资料 |
1.2 方法 |
1.3 观察指标 |
1.4 统计学方法 |
2 结果 |
2.1 不同检测方法结核杆菌基因诊断的检出率的比较 |
2.2 不同检测方法结核杆菌基因诊断的检出率变化 |
3 讨论 |
四、涂片查找抗酸杆菌的方法改进(论文参考文献)
- [1]支气管冲洗液涂片与培养在肺结核诊断中的价值分析[J]. 曹翌明,刘欣,黄业伦,黄艳君,罗春明,关平,刘志辉,刘健雄,刘文. 国际医药卫生导报, 2020(12)
- [2]2型糖尿病并发肺结核患者血糖管理及营养状况与转归预后的关联研究[D]. 牟宇泽. 青岛大学, 2020(01)
- [3]RQ-PCR检测对肺结核临床诊断价值的研究[D]. 张倩. 西安医学院, 2020(08)
- [4]抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖荧光抗体的制备[D]. 柏极. 海南医学院, 2020(01)
- [5]人型结核分枝杆菌新靶标mts90临床应用分析[D]. 常中宝. 安徽医科大学, 2019(08)
- [6]CA125、CA199、CEA在良恶性胸腔积液诊断中的应用[D]. 曹鹏遥. 华北理工大学, 2019(01)
- [7]塔河马鹿源副结核分枝杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究[D]. 高建鹏. 石河子大学, 2019(01)
- [8]胸腔积液IGRA联合生物标记物优化结核性和恶性胸膜炎鉴别诊断[D]. 唐怡敏. 南华大学, 2019(01)
- [9]支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测对肺结核临床诊断的价值分析[D]. 梁愈. 遵义医科大学, 2019(08)
- [10]PCR XpertMTB/RIF系统对脊柱结核诊断价值研究[J]. 秦英,梁胜根,陈忠羡,原向伟,谢清华,付朝华,蒋雄健. 深圳中西医结合杂志, 2019(07)