一、人参茎叶皂甙对大鼠心功能的作用研究（论文文献综述）
王申锋[1]（2020）在《“固元颗粒”免疫增强剂研制及其在鸡疫苗免疫中的应用》文中研究表明中药具有很好的增强免疫力的作用,成为当前替代饲料中抗生素添加的一个重要方向。“固元颗粒”原方出自《新药转正标准》,由黄芪和生晒参芦头配方而成,其功效是益气固本。如果直接将其应用于兽医临床,提高动物的免疫功能,成本偏高,很难在养殖业中推广。但是,人用中药加工过程中产生的一些附属提取物,以及在非贵重药材中提取到的一些有效成分,成本相对较低,具有开发兽医临床用药的潜力。为此,我们以黄芪多糖（Astragalus Polysaccharides,APS）和人参茎叶皂苷（Ginseng Stem-leaf Saponins,GSLS）代替“固元颗粒”配方中的黄芪和生晒参芦头,大幅降低成本,配伍组方,制成可溶性颗粒,称为兽用“固元颗粒”,用于增强动物抗病能力和疫苗免疫效果。本论文研究该制剂工艺、质量标准,并评估其对鸡的安全性、有效性和最适添加量。检测该制剂对免疫抑制条件下鸡和小鼠的免疫调节作用,初步揭示其对蛋鸡淋巴细胞TLR4信号通路的激活及相关细胞因子的分泌机制,并在蛋鸡鸡群进行应用试验,为预防禽病毒性疾病提供新方法。主要结果总结如下:1.优化并确定了“固元颗粒”的制剂工艺。通过制剂成型工艺预实验、辅料选择、润湿剂筛选和验证试验确定了最佳成型工艺。配方为:APS 110 g、GSLS100 g、蔗糖590 g和糊精200 g。制备工艺为:将上述原材料混合均匀,采用75%乙醇为润湿剂,制软材,制粒,60℃烘干,整粒。所得颗粒易成型,颗粒完整,细粉较少。3个试验批次所得颗粒质量一致,该工艺稳定可行。2.建立了“固元颗粒”中人参皂苷Rg1、Re、Rd含量的高效液相色谱测定方法。通过精密度试验、重复性试验、稳定性试验及回收率试验证实,RSD<2%,测定三批“固元颗粒”,每1 g颗粒中Rg1+Re+Rd总量均在30 mg以上。该方法操作简便,测量准确,可作为对该制剂质量控制的内容记入质量标准。3.“固元颗粒”具有良好的安全性和有效性。对鸡按推荐量的1、3、5、10倍（0.05、0.15、0.25和0.5 g/kg体重）剂量混饮,连续7 d,停药后继续饲养2周。记录鸡行为、体重的变化,检测血常规和血液生化指标以及脏器指数,结果均未见异常,表明该制剂对鸡临床用药具有较高的安全性。另外,不同剂量的“固元颗粒”均可有效提高蛋鸡的抗体效价水平、红细胞花环率和生产性能指标,其中50 mg/kg为最适应用剂量。“固元颗粒”对注射新城疫（ND）疫苗的鸡群具有免疫增强作用。使用50mg/kg该颗粒对鸡进行免疫调节试验,测定脏器指数、新城疫抗体效价和脾淋巴细胞转化指数,证实用药2-3周后其体内NDV抗体效价显着高于对照组（P<0.05）。“固元颗粒”对免疫抑制鸡具有免疫调理作用。对经环磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）导致的免疫抑制鸡使用“固元颗粒”后,可使其免疫抑制现象得到显着缓解（P<0.05）。另外,在疫苗免疫后7、14和21d,上述4个给药处理组的脾淋巴细胞经刀豆蛋白A（ConA）和LPS诱导,淋巴细胞刺激指数均显着高于CTX组（P<0.05）。“固元颗粒”对免疫抑制小鼠亦有免疫调节作用。“固元颗粒”中、高剂量组可显着提高免疫抑制小鼠的脾脏指数和胸腺指数（P<0.05）。给药15 d后,免疫抑制小鼠IL-2和IFN-γ含量接近正常小鼠水平,其中“固元颗粒”中剂量组（50 mg/kg）效果最为明显。另外,各剂量组的脾淋巴细胞转化率与CTX组相比较极显着提升（P<0.01）。4.“固元颗粒”促进蛋鸡淋巴细胞TLR4信号通路的激活及相关细胞因子的分泌。分离蛋鸡外周血淋巴细胞,与不同浓度的“固元颗粒”（终浓度200、100、50、25、0μg/mL,阳性对照为浓度100μg/mL的APS）分别培养16 h、24h、32 h、48 h,采用RT-PCR方法检测淋巴细胞中TLR4、MyD88、TRAF-6、TRIF、IRF3、IFN-βmRNA表达量。收集培养24 h的淋巴细胞上清液,用ELISA测定cGMP、cAMP、NO、iNOS和Ca2+的含量。结果显示,“固元颗粒”通过TLR4受体激活MyD88依赖性和TRIF依赖性两条信号通路,还可降低鸡外周淋巴细胞培养上清中cAMP的含量,提高cGMP、Ca2+、NO和iNOS的含量,从而调节蛋鸡的免疫功能。5.“固元颗粒”在鸡群中应用可促进疫苗免疫效果。随机选择2栋鸡舍,分为“固元颗粒”+疫苗免疫组和单独疫苗免疫组,各3100只鸡,按剂量50 mg/kg体重饮水进行临床应用试验。结果显示,与单独疫苗对照组相比,“固元颗粒”试验组的疫苗免疫抗体效价显着提高,发病率和死亡率分别下降0.7和0.8个百分点,表明“固元颗粒”在大群临床试验中,能够有效降低发病率和死亡率,增加养殖收益。综上所述,本研究确定了“固元颗粒”稳定的制备工艺并制定了其质量标准,证实制剂安全有效。初步证实该颗粒制剂可通过TLR4受体激活MyD88和TRIF通路,降低cAMP含量,提高cGMP、Ca2+、NO、iNOS含量,从而调节鸡的免疫应答。“固元颗粒”能够明显提高蛋鸡的疫苗免疫后特异性抗体的分泌水平,降低发病率和死亡率,具有较好的应用前景。
黄盼盼[2]（2019）在《绞股蓝药材与配方颗粒质量标准研究》文中提出目的 对绞股蓝药材进行基源考证,研究其化学成分;通过药材、标准汤剂和配方颗粒的研究,确定共有成分的定量分析方法;分别建立绞股蓝药材、标准汤剂和配方颗粒的指纹图谱方法和薄层色谱鉴别方法,并建立相关的质量标准。方法 1.对绞股蓝资源分布情况进行实地考察,收集样品。2.对不同产地绞股蓝药材进行比较,确定配方颗粒的原药材产地;用HPLC和HPLC-MS等对绞股蓝进行化学成分研究与确证。3.采用HPLC法建立绞股蓝药材的含量测定方法和指纹图谱测定方法,并进行方法学验证。通过相似度评价软件计算出34批药材的相似度。4.建立绞股蓝标准汤剂的含量测定方法和指纹图谱测定方法,并进行方法学验证,并通过相似度评价软件计算出标准汤剂的相似度;根据绞股蓝药材中指标成分的含量计算标准汤剂的转移率。5.考察绞股蓝配方颗粒不同的制备工艺,确定最佳的提取工艺方法。6.建立绞股蓝配方颗粒的含量测定方法和指纹图谱测定方法,并进行方法学验证,计算相似度和转移率。7.采用TLC分别建立药材、标准汤剂和配方颗粒与绞股蓝对照药材的薄层色谱方法,并进行方法学考察。8.建立相应的质量标准。结果 1.对绞股蓝的来源和名称等进行考证,对绞股蓝属植物进行了简单的归纳。收集了 34批绞股蓝药材,15批绞股蓝标准汤剂冻干粉和18批绞股蓝配方颗粒,确定了配方颗粒的生产工艺。2.通过对绞股蓝药材化学成分进行研究,确定了绞股蓝标准汤剂和配方颗粒的原药材产地:用HPLC和HPLC-MS鉴定出了6个化学成分,并对其中的两个化合物七叶胆苷XLVI（C48H82O19）和人参皂苷Rb3（C53H90O22）进行了确证。3.首次建立了同时测定绞股蓝药材七叶胆苷XLVI和人参皂苷Rb3含量的方法,通过比较不同溶剂和不同提取方法等内容确定了供试品溶液的提取方法;方法学考察均符合要求,经测定七叶胆苷XLVI的平均回收率为93.4%,RSD%为0.61%,人参皂苷Rb3的平均回收率为]00.3%,RSD%为2.32%。建立的绞股蓝药材指纹图谱中共有7个特征峰,其中有10批相似度在0.9以上。对比发现15批样品中7月采收的绞股蓝比10月、1 1月采收的绞股蓝指标成分含量低,说明在每年的10、11月份采收较7月份采收的皂苷含量较高。4.首次建立了绞股蓝标准汤剂的含量测定和指纹图谱测定方法,七叶胆苷XLVI和人参皂苷Rb3的平均回收率分别为92%和102%,RSD%分别为1.43%和0.79%。标准汤剂中七叶胆苷XLVI的平均转移率为76.5%,人参皂苷Rb3的平均转移率为60.5%。建立的绞股蓝标准汤剂指纹图谱中有7个特征峰,有1 1批样品的相似度在0.9以上，与药材测定结果相对应。5.考察了提取、浓缩、干燥和辅料等工艺参数,确定了绞股蓝配方颗粒的最佳制备工艺。首次建立了绞股蓝配方颗粒的含量测定和指纹图谱测定方法,方法学考察结果良好;配方颗粒中七叶胆苷XLVI的平均转移率为54.1%,人参皂苷Rb3的平均转移率为72.3%;建立的配方颗粒指纹图谱中的7个特征峰与药材和标准汤剂相对应,且相似度结果与标准汤剂保持了良好的一致性。6.首次建立了绞股蓝药材、标准汤剂和配方颗粒的薄层鉴别方法,对展开剂溶剂、展开剂比例、展开温度、薄层板等进行了考察,确定了较佳的展开条件,绞股蓝药材、标准汤剂和配方颗粒与绞股蓝对照药材在相应位置均可显相同颜色的斑点。结论明确了绞股蓝药材的产地,固定了绞股蓝标准汤剂和配方颗粒的药材产地为浙江武义。确证的两个成分七叶胆苷XLVI和人参皂苷Rb3为绞股蓝的皂苷类成分研究提供基础。建立的绞股蓝药材、标准汤剂和配方颗粒的含量测定、指纹图谱和薄层鉴别方法为绞股蓝的质量控制提供研究基础。建立的绞股蓝药材、标准汤剂和配方颗粒的指纹图谱可用于绞股蓝的成分研究及真伪鉴别;从源头出发,对药材、标准汤剂和配方颗粒进行多环节把控,分别制定了药材、标准汤剂和配方颗粒的质量标准,为绞股蓝的质量控制提供了可靠的方法,有利于成品在失去药材外观性状情况下的真伪鉴别。
纪瑞锋,袁媛,刘娟[3]（2017）在《人参叶与人参化学及药理活性差异分析》文中认为人参叶与人参为同一植物的不同部位入药,两者均具有悠久的使用历史。它们的性味功效、化学成分及药理活性既有相似又有区别。文章基于文献将人参叶与人参的差异进行总结和对比,为这两种中药的研究开发和临床应用提供参考和依据。
王云皓[4]（2014）在《人参茎叶皂甙制剂的安全性评价》文中进行了进一步梳理人参皂甙具有广泛的免疫调节作用。但从人参根中提取皂甙成本过于高昂，难以在畜牧业生产上推广。化学分析和药理试验表明，人参茎叶皂甙，即本文使用的益气扶正颗粒的主要成分，与人参根皂甙具有相似的药理作用。因此，开发利用人参地上部位来源的皂甙很有意义。为探究该药物在畜牧养殖业上使用的安全性，本文设计了3个试验，为进一步开发提供依据。目的：通过研究该药物经口给药的急性、亚慢性毒性以及对靶动物的影响，评价其安全性。方法：1)急性毒性试验：将体重约20g清洁级ICR小鼠40只均衡分为试验组和对照组，每4小时分别以最大溶解浓度（1.3g·mL-1）的药物或蒸馏水0.6mL灌胃，连续3次。给药后观察14天。记录给药前以及给药后第7、14天时小鼠的体重。观察心、肝、脾、肺、肾、脑等脏器的病理变化；2)亚慢性毒性试验：约200g清洁级SD大鼠80只，均衡分为4组，连续7天分别灌服0、0.1、4.875和9.75g·kg体重-1剂量药物。停药后，连续四周记录体重，然后进行血常规及血生化指标检测以及对试验动物的心、肝、脾、肺、肾等主要脏器进行病理学检查；3)靶动物安全性试验：约35g SPF级白羽蛋鸡120羽，均衡分为4组，连续7天分别以0、0.05、0.25和0.5g·kg体重-1剂量混饮给药。停药后，连续四周记录体重，然后每组鸡随机选取10羽，于第7、14、21天颈静脉采血进行白细胞分类计数以及血生化指标检测。观察心、肝、脾、肺、肾等脏器的病理变化。结果：1)急性毒性试验：试验期内，试验组小鼠无明显异常现象发生；给药14天内小鼠未出现死亡；试验组小鼠体重与对照组相比无显着差异。尸检心、肝、脾、肺、肾、脑均无明显组织学变化，病理组织学检查也未见明显异常；2)亚慢性毒性试验：试验期内，大鼠行为无明显异常。血液学和血液生化指标也未见异常。试验动物的心、肝、脾、肺、肾均无明显组织学变化；3)靶动物安全性试验：试验期内，动物全身状况、行为活动和排泄物等均无明显异常；白细胞分类计数和血生化指标亦无明显异常；试验动物的心、肝、脾、肺、肾均无明显组织学变化。结论：在养殖生产上使用益气扶正颗粒提高鸡的免疫力是安全可行的。
李凤林[5]（2013）在《人参茎叶皂苷药理作用的研究进展》文中认为人参的主要有效成分为人参皂苷,人参茎叶所含人参皂苷的药理作用与人参根皂苷基本相同,且总皂苷含量明显高于人参根。从人参茎叶皂苷对机体免疫功能、抗肿瘤抗衰老、抗菌抗病毒、护心护肝、抗脂质过氧化及高脂血症、促进细胞增殖、中枢神经系统、内分泌和呼吸系统等方面药理作用进行了综述。
王琛[6]（2012）在《西洋参茎叶总皂苷减轻心肌缺血/再灌注损伤的研究》文中研究说明尽早恢复组织血供,是目前防治心肌缺血损伤最有效的措施。但研究发现,缺血一定时间的心肌在重新恢复血液供应后,损伤反而加重,出现心肌顿抑、心功能低下、恶性心律失常等,即心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）损伤。随着急性心肌梗死（AMI）溶栓、经皮穿刺冠状动脉腔内血管成型术和冠状动脉旁路手术等再灌注疗法的广泛应用,心肌再灌注损伤成为心血管领域研究的热点之上世纪九十年代以来,我国对西洋参茎叶化学成分和药理学作用进行了大量研究,表明其化学成分包括皂苷类、氨基酸类、糖类、挥发油类、无机元素类和脂肪酸类等。西洋参茎叶总皂苷（panax quinquefolium saponins, PQS）是从西洋参茎叶中提取出的活性成分。研究显示,PQS具有抗I/R心肌细胞凋亡、维持细胞内Ca2+稳态等作用。内质网（endoplasmic reticulum, ER）为细胞中调控蛋白质折叠、Ca2+稳态的细胞器之一,对应激非常敏感,缺血缺氧、葡萄糖/营养物质匮乏、三磷酸腺苷（adenosine triphosphate, ATP）耗竭、大量自由基产生及Ca2+稳态破坏等均可引起内质网功能障碍,触发内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）。一定程度的ERS通过上调葡萄糖调节蛋白类（glucose-regulated proteins, GRPs）、钙网蛋白（calreticulin, CRT）、蛋白质折叠酶等促进内质网功能恢复,持续或严重的ERS则破坏细胞Ca2+稳态、上调促凋亡因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein, CHOP）及caspase12的表达和活化,诱导ERS相关细胞凋亡,加重I/R损伤。本研究采用大鼠心肌I/R模型及心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）模型,模拟在体心肌I/R损伤,研究西洋参茎叶总皂苷保护心肌I/R损伤的作用,并从内质网应激方面,探讨可能的分子机理。研究分为以下三个部分：研究一西洋参茎叶总皂苷对于心肌缺血/再灌注损伤的影响目的：观察西洋参茎叶总皂苷（PQS）对心肌I/R损伤的作用。方法：采用SD大鼠在体心脏I/R模型,检测血流动力学及血清心肌肌钙蛋白T（cardiac troponin T, cTnT）含量,以TTC和伊文思蓝双染法检测心梗面积,采用HE和TUNEL法分别评估心肌病理损伤和心肌细胞凋亡程度,采用Westernblot法检测心肌组织凋亡调节因子的表达。采用乳鼠心肌细胞缺氧／复氧（H/R）损伤模型,以台盼蓝排斥实验、乳酸脱氢酶活性以及流式细胞术检测细胞损伤及凋亡情况,以RT-PCR和Western blot方法,检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果：（1）动物实验结果：与Sham组比较,I/R组平均动脉压升高55.0%（P<0.05）,左室收缩与舒张功能（±dp/dtmax）分别降低42.0%和43.0%（P<0.05）,血清cTnT含量为Sham组的3.9倍（P<0.05）,梗死区心肌／缺血区面积（area of necrosis/area at risk, AN/AAR）百分比为（44.2±1.4）%,心肌细胞凋亡指数是Sham组的7.0倍（P<0.05）。病理观察表明,心肌纤维结构紊乱,局部呈断裂、坏死融合。抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低54.9%（P<0.05）,促凋亡蛋白Bax表达是Sham组的3.9倍（P<0.05）；与I/R组比较,PQS+I/R组平均动脉压降低32.0%（P<0.05）,左室±dp/dtmax分别升高64.0%和35.0%（P<0.05）,血清cTnT含量降低53.3%（P<0.05）, AN/AAR百分比降低65.5%（P<0.05）,心肌细胞凋亡率降低54.9%（P<0.05）；心肌组织病理损伤程度减轻；抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高110.0%（P<0.05）,促凋亡蛋白Bax表达降低47.8%（P<0.05）。（2）细胞实验结果：与对照组比较,H/R组心肌细胞凋亡率升高5.0%（P<0.05）,细胞存活率降低21.7%（P<0.05）,LDH活性较对照组高约6.0倍（P<0.05）。Bcl-2mRNA和蛋白表达分别降低44.5%和58.3%（P<0.05）, Bax mRNA和蛋白表达分别升高86.9%和167.0%（P<0.05）；和H/R组比较,PQS+H/R组细胞凋亡率降低4.2%（P<0.05）,存活率升高21.2%（P<0.05）, LDH活性降低66.6%（P<0.05）。 Bcl-2mRNA和蛋白的表达分别升高30.9%和48.0%（P<0.05）, Bax mRNA和蛋白的表达分别降低39.7%和48.4%（P<0.05）。结论：PQS可减轻心肌缺血／再灌注损伤,其机制与增加抗凋亡因子Bcl-2和降低促凋亡因子Bax的表达有关。研究二西洋参茎叶总皂苷减轻心肌缺血／再灌注损伤致严重内质网应激的研究目的：观察西洋参茎叶总皂苷（PQS）对心肌I/R损伤致严重ERS的影响。方法：采用SD大鼠在体心脏缺血／再灌注（I/R）模型和乳鼠心肌细胞缺氧/复氧（H/R）模型,以RT-PCR和Western blot方法,分别检测内质网应激相关因子的表达。结果：（1）动物实验结果：与Sham组比较,I/R组GRP78、CRT蛋白表达分别为Sham组的3.1倍和3.0倍（P<0.05）, CHOP蛋白表达为Sham组的3.4倍（P<0.05）,剪切后的caspase12的蛋白表达是Sham组的2.5倍（P<0.05）；与I/R组比较,PQS+I/R组CRT蛋白表达降低43.4%（P<0.05）, CHOP蛋白表达和剪切后的caspase-12蛋白表达分别降低38.6%和23.7%（P<0.05）。（2）细胞实验结果：与对照组比较,H/R组GRP78mRNA和蛋白的表达分别升高380.0%和142.0%（P<0.05）, CRT mRNA和蛋白的表达分别升高96.0%和312.0%（P<0.05）; CHOP mRNA和蛋白的表达分别升高311.0%和219.0%（P<0.05）；剪切后的caspase-12蛋白表达升高180.0%（P<0.05）；与H/R组比较,PQS+H/R组GRP78mRNA和蛋白的表达分别降低61.6%和37.7%（P<0.05）, CRT mRNA（?）口蛋白的表达分别降低35.7%和52.2%（P<0.05）; CHOP mRNA和蛋白的表达分别降低57.0%和51.7%（P<0.05）；剪切后的caspase-12蛋白表达降低34.9%（P<0.05）。结论：PQS可减轻心肌I/R诱导的严重ERS,表现为降低I/R后CRT的过表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路的激活,减少过度ERS介导的细胞凋亡。研究三西洋参茎叶总皂苷减轻心肌缺血/再灌注损伤致严重内质网应激的下游信号通路研究目的：探讨西洋参茎叶总皂苷（PQS）减轻大鼠心肌I/R损伤致严重ERS的机制。方法：采用SD大鼠在体心脏缺血/再灌注（I/R）模型,检测血流动力学及血清cTnT含量,以TTC和伊文思蓝双染法检测心梗面积,采用HE和TUNEL法分别评估心肌病理损伤和心肌细胞凋亡程度,按CaN测试盒步骤测定心肌CaN活性,采用Western blot法检测心肌组织CaN蛋白表达；采用乳鼠心肌细胞缺氧／复氧（H/R）损伤模型,转染pCDB-CaN质粒或CaN抑制剂FK506干扰CaN表达,以流式细胞术检测细胞凋亡,按CaN测试盒步骤测定心肌细胞CaN活性,以Western blot方法,检测心肌细胞CaN表达。结果：（1）动物实验结果：与PQS+I/R组比较,CaN抑制剂（PQS+CaN+I/R）组平均动脉压、左室收缩舒张功能（±dp/dtmax）血清cTnT含量、心梗面积、心肌细胞凋亡率、抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax表达、CaN活性及蛋白表达无显着差异（P>0.05）。（2）细胞实验结果：与PQS+H/R组比较,CaN抑制剂（FK506）组心肌细胞凋亡率、抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax表达、CaN活性及蛋白表达无显着差异（P>0.05）。结论：PQS减轻心肌I/R致严重ERS的下游信号通路可能与CaN途径无关。
李禹涛[7]（2012）在《人参茎叶皂甙提高口蹄疫和新城疫油佐剂疫苗免疫效果的研究》文中研究说明疫苗是畜牧生产中控制动物传染病的重要工具,但在临床实际中存在疫苗免疫失败和油佐剂疫苗注射困难等现象。我们前期的研究表明,GSLS和油佐剂有协同作用,能提高疫苗的免疫效果。本论文在此基础上,进一步研究GSLS和油佐剂协同作用增强疫苗免疫效果的合适比例,观察GSLS与油佐剂组合增强猪FMD疫苗和鸡ND疫苗的免疫效果,并对油佐剂疫苗添加GSLS后的黏滞度进行了观察。研究结果可为应用GSLS改进动物疫苗提供参考。1.FMD疫苗中添加不同剂量GSLS对小鼠免疫反应的影响目的：观察GSLS对小鼠注射FMD油佐剂疫苗免疫佐剂作用,筛选GSLS对FMD由乳剂疫苗免疫佐剂作用的合适浓度。方法：将56只雌性ICR小鼠随机分为7组,组1小鼠皮下注射0.1ml的FMDV抗原+0.1ml生理盐水,组2-7每组小鼠腹部皮下分别注射含不同浓度GSLS（0、2、4、6、8和10μg/0.2ml）的FMD由乳剂疫苗,小鼠免疫2次,间隔3周。二免后2周采血,用双抗夹心ELISA方法检测血清中FMDV特异性IgG水平。结果：疫苗中添加4、6、8和10μg的GSLS能显着提高小鼠血清中FMDV特异性IgG水平（P<0.05）,其中以4μg组的FMDV特异性IgG水平最高。结论：FMD油乳剂疫苗中添加GSLS可显着提高小鼠的FMDV特异性IgG水平,提高的幅度呈剂量依赖关系,以4μg组的幅度最高。2. GSLS对低剂量抗原FMD油乳剂疫苗免疫效果的影响目的：比较FMD全抗原剂量油乳剂疫苗和含GSLS的低剂量抗原油乳剂疫苗对小鼠的免疫效果。方法：将72只ICR小鼠随机分成9组,每组8只小鼠。各组动物皮下注射的实验疫苗组成如下：（1）100μl的FMDV抗原+100μl生理盐水；（2）100μl抗原+100μl油佐剂Oil#10；（3）100μl抗原+100μl油佐剂MC52；（4）～（6）100μl,50μl或25μl抗原+100μl油佐剂Oil#10+GSLS（4μg）;（7）～（9）100μl,50μl或25μl抗原+100μl油佐剂MC52+GSLS（4μg）。免疫2次,间隔3周,每次注射的体积为200μl。二免后2周采血,并取脾脏制备脾脏淋巴细胞悬液。用双抗夹心ELISA检测血清中FMDV特异性IgG水平,用MTT法检测经ConA、LPS和FMDV刺激后的淋巴细胞增殖指数,并用RT-PCR方法检测脾脏淋巴细胞经FMDV刺激后的IFN-y和IL-4以及转录因子T-bet和GATA-3中mRNA表达水平。结果：含GSLS的油佐剂疫苗诱导的特异性IgG效价显着高于不含GSLS的油佐剂疫苗（P<0.05）；含GSLS的半剂量抗原的油乳剂疫苗诱导的血清特异性IgG效价高于不含GSLS的全剂量抗原油乳剂疫苗,但无统计学差异显着（P>0.05）；含GSLS的四分之一剂量抗原的油乳剂疫苗诱导的血清特异性IgG效价低于不含GSLS的全剂量抗原油乳剂疫苗,但无统计学差异（P>0.05）。此外,油乳剂疫苗中添加GSLS后,增强了小鼠脾脏淋巴细胞受Con A、 LPS和FMDV刺激产生增殖能力（P<0.05）,提高脾脏淋巴细胞受FMDV刺激后IFN-γ、IL-4、T-bet和GATA-3的（?）nRNA表达水平（P<0.05）。结论：油佐剂疫苗中添加GSLS能显着增强小鼠的体液和细胞免疫应答,使仅含一半抗原剂量疫苗诱导的IgG水平到含全剂量抗原诱导的IgG水平。3.FMD油佐剂疫苗中添加不同剂量GSLS对猪的免疫效果目的：观察FMD油佐剂疫苗添加GSLS寸猪的免疫效果。方法：试验一：将48只猪随机分成6组,每头猪颈部分别皮下注射含GSLS为0μg、10μg、20μg、40μg、80μg和160μg的FMD疫苗,免疫2次,间隔3周,每次注射疫苗剂量2ml。在免疫前,免疫后第3、6周前腔静脉采血,用正向间接血凝法检测血清中IHA水平,并分离淋巴细胞,用MTT法检测淋巴细胞增殖。试验二：将24头猪随机分成4组,每头猪颈部皮下分别注射含不同佐剂FMD疫苗（Oil#10,MC52, Oil#10+40μg GSLS, MC52+40μg GSLS）,免疫1次,注射体积为2ml。于免疫前,免疫后第3、6周前腔静脉采血,检测血清中IHA效价,IgG和IgG亚类水平。结果：试验一：免疫后3、6周,每个剂量的FMD疫苗中添加40μg GSLS能显着提高猪特异性IHA效价（P<0.05）,外周血淋巴细胞受FMDV刺激后产生的增殖能力显着升高（P<0.05）,而受Con A刺激后产生的淋巴细胞增殖能力高于对照组,但无统计学差异（P>0.05）。试验二：与不添加GSLS的对照组相比,添加GSLS的油佐剂疫苗组在免疫后3周,IHA效价升高不显着（P>0.05）,IgG、IgG1和IgG2水平显着升高（P<0.05）；免疫后6周,血清中IHA效价显着升高（P<0.05）,IgG、IgG1和IgG2水平均显着上升（P<0.05）。结论：每个剂量FMD油佐剂疫苗中添加40μg GSLS能显着增强猪的体液免疫和细胞免疫。4.不同剂量GSLS对鸡新城疫油佐剂疫苗免疫的影响目的：观察鸡ND疫苗中添加GSLS对鸡免疫反应的影响。方法：将60只1日龄梅岭土鸡分成5组,每组12只,12日龄时,在每只鸡的胸大肌内分别注射含不同剂量的GSLS （0、2、4、6和8μg）鸡ND油佐剂疫苗,免疫为0.2ml。于免疫前,免疫后1、2和3周经心脏采血收集血样,用血凝抑制试验测定血清HI效价,3周后摘取鸡脾脏,制备脾脏淋巴细胞悬液,采用MTT法检测脾脏淋巴细胞增殖。结果：每剂量疫苗中添加6μg的GSLS,血清HI效价在免疫后1周升高不显着,在免疫后第2周和第3周,显着升高（P<0.05）；免疫后3周,脾脏淋巴细胞对LPS和NDV刺激的增殖反应显着高于对照组（P<0.05）,各组脾脏淋巴细胞对ConA刺激的增殖反应之间没有明显差异（P>0.05）；ND疫苗中添加GSLS对鸡的体重不产生显着差异（P>0.05）；各组鸡的疫苗注射部位没有发现明显的局部副作用。结论：ND疫苗中添加GSLS能显着增强鸡的体液免疫和细胞免疫应答水平,并对免疫鸡不产生可见的副作用。5.油佐剂疫苗中添加GSLS对疫苗黏滞性的影响目的：观察油佐剂疫苗中添加GSLS对疫苗黏滞性的影响。方法：将GSLS（30g）溶解在60ml二甲基亚砜中,制备361mg/ml的GSLS储存液（83m1）,根据用量将GSLS储存液添加在MC52白油中并搅拌均匀,然后与FMDV抗原混合,采用均质乳化机制备分别制备油相/水相比为1比1（或2比1）,吐温浓度分别为0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%和3.0%的油包水型FMD油乳剂疫苗,采用玻璃粘度计测定各组疫苗的黏滞性。结果：当吐温浓度为1.0%和1.5%时,添加4μg/剂量GSLS油佐剂疫苗（1比1）流动时间显着短于对照组（P<0.05）；当吐温浓度为为1.5%和2.0%时,添加4μg/剂量GSLS能显着降低油佐剂疫苗（2比1）流动时间（P<0.05）。结论：油乳剂疫苗中添加GSLS能降低疫苗的黏滞性。综上所述,FMD油乳剂疫苗中添加GSLS可显着提高小鼠血清特异性IgG水平,提高的幅度呈剂量依赖关系,以4μg组的幅度最高；FMD油佐剂疫苗中添加GSLS（?）显着增强小鼠血清FMDV特异性IgG水平和淋巴细胞增殖转化指数,增强使仅含一半抗原剂量疫苗诱导的IgG水平到含全剂量抗原诱导的IgG水平,说明GSLS增强小鼠对低剂量抗原疫苗的免疫应答；FMD疫苗中添加40μg的GSLS能显着增强猪血清IHA,IgG和IgG亚类水平,增强淋巴细胞增殖指数,表明GSLS对猪FMD疫苗具有较好的免疫佐剂作用；ND疫苗中添加6μgGSLS能显着增强鸡血清HI效价和淋巴细胞增殖转化指数,并且没有对免疫鸡产生明显可见的副作用,说明GSLS能通过增强鸡的体液免疫应答和细胞免疫应答来发挥免疫佐剂作用；当吐温浓度为1.0%和1.5%时,添加4gg/剂量GSLS由佐剂疫苗（油/水=1：1）流动时间显着短于对照组（P<0.05）；当吐温浓度为为1.5%和2.0%时,添加4Pg/剂量GSLS能显着降低油佐剂疫苗（油/水=2：1）流动时间（P<0.05）,说明油乳剂疫苗中添加GSLS能降低疫苗的黏滞性。
王琛,史大卓[8]（2011）在《西洋参茎叶总皂甙的心血管效应及其机制探讨》文中进行了进一步梳理西洋参,又名美国人参,是名贵滋补药品,因其主要活性成分人参皂甙具有广泛的生物学效应,因此对于西洋参总皂甙的研究具有重要的临床及科研价值。现对其基本组成、生物学活性,以及它的心血管效应与作用机制作一探讨。
梁飞[9]（2011）在《植物病原真菌对人参茎叶皂甙的生物转化》文中研究指明人参是我国传统中药,具有多种药理学作用,如抗肿瘤、延缓衰老及增强机体免疫力等。研究表明,人参中含有人参皂甙、糖类、蛋白质、多肽、氨基酸、维生素等物质。其中,人参皂甙是人参的主要活性成分,在干燥根中的含量约为3%-4%,在人参茎叶中的含量约为5%-7%。目前,已经从人参中分离出40多种人参单体皂甙,这些单体皂甙在人参中的含量不同,有些稀有人参皂甙在人参中含量很低甚至不存在,而这些稀有人参皂甙如Rd、Rg3、CK、Rh2等却具有重要的生物活性。直接从人参中大量提取稀有人参皂甙不符合实际,而利用生物转化的方法将人参中含量高的皂甙转化为稀有人参皂甙是一种切实可行的途径。由于人参茎叶中皂甙的含量高于人参根,因此,为了更加充分的利用人参资源,本文利用植物病原真菌转化人参茎叶皂甙来获得稀有人参皂甙。本文的主要研究内容和研究结果如下:（1）人参茎叶皂甙的分离纯化和分级:①利用大孔吸附树脂法从500.00 g干燥的人参茎叶中,分离出28.55 g人参茎叶总皂甙,得率为5.71%。②取10.00 g人参茎叶总皂甙,用硅胶柱层析法分离得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和IV四种级分。其中,级分-Ⅰ3.22 g,得率为32.2%;级分-Ⅱ4.02 g,得率为40.2%;级分-Ⅲ1.53 g,得率为15.3%;级分-Ⅳ0.28 g,得率为2.8%。③TLC和HPLC检测,级分-Ⅰ主要含有人参皂甙Rg1和Rh1,是人参三醇型皂甙的混合级分;级分-Ⅱ主要含有Rd和Re,是二醇型皂甙和三醇型皂甙的混合级分;级分-Ⅲ主要含有人参皂甙Rb2和Rc及少量的Rb1;级分-Ⅳ主要含有人参皂甙Rb1。（2）筛选能够转化人参皂甙的植物病原真菌:①从10种植物病原真菌中筛选出一种能转化级分-Ⅲ,且转化产物中含有稀有人参皂甙Rd、F2和CK的菌种—3.26号实验菌种。提取3.26号菌种的孢子液,并用孢子液转化级分-Ⅲ,结果表明,孢子液也能转化Rb1、Rb2和Rc,产生稀有人参皂甙Rd、F2和CK。②结合形态学和分子生物学技术,对3.26号真菌进行鉴定,结果表明,3.26号真菌与Epicoccum sp. SP3 18S rRNA的相似度为99%,属于附球霉属（Epicoccum LK.ex Wallr.）。（3）糖苷酶的酶学性质分析:用DEAE-纤维素柱层析法分离纯化3.26号菌种分泌的糖苷酶,得到初步纯化的级分—E-Ⅰ。E-Ⅰ具有广泛的pH稳定性和温度稳定性,最适pH为5.0,最适温度为40℃。用E-Ⅰ分别转化人参茎叶皂甙级分-Ⅰ、级分-Ⅲ和级分-Ⅳ,结果表明,E-Ⅰ不能转化人参三醇型皂甙,但能快速转化人参二醇型皂甙Rb1、Rb2和Rc,产生稀有人参皂甙Rd,若延长转化时间则能产生稀有人参皂甙F2和CK,且底物皂甙完全转化。由此可见,糖苷酶E-Ⅰ能同时转化Rb1、Rb2和Rc,产物均为Rd、F2和CK,控制转化反应的时间,能选择性制备Rd、F2和CK。
高莹[10]（2011）在《骨髓间充质干细胞联合独参汤对大鼠急性心肌梗死及细胞凋亡的影响》文中指出急性心肌梗死后,因大量心肌细胞坏死不能再生,可引发左室重构及扩大,最终导致心力衰竭,严重危害人民生命。目前冠脉再通治疗（包括急诊溶栓和介入）,虽能挽救缺血心肌,但仍不能挽救坏死心肌。心肌梗死后,局部心肌组织缺血、缺氧,导致心肌细胞大量坏死和凋亡,坏死心肌被纤维组织代替,引起心室重构、变薄,左室舒张末压力增高,心室扩大,最终因心功能恶化发展为心力衰竭而告终。干细胞是一类未分化,能无限或较长期增殖、自我更新,并且在适当条件下能分化为多种功能细胞或组织器官的原始细胞。研究表明:将干细胞植入损伤心肌后,能增加心肌细胞的数量,增加心肌血管供给,改善受损心肌的收缩功能。可分化为心肌和血管内皮细胞,是心血管再生医学的理想新细胞,且证实了MSCs治疗AMI的有效性和可行性。目前认为MSCs移植治疗心肌梗塞的机制主要有以下几个方面:（1）分化为具有收缩功能的心肌样细胞,表达心肌特异性收缩蛋白,与正常心肌细胞形成闰盘连接,参与宿主心肌同步收缩,缩小瘢痕面积。（2）分化为血管内皮细胞或通过旁分泌机制分泌各种细胞因子。细胞因子主要有两类:即促血管生成因子和炎症因子。（3）增加心脏粘蛋白的表达和神经的生长以及心房交感神经的过度分布。（4）通过调节细胞外基质,缓解梗死壁变薄和左室腔扩大,提高局部室壁运动,改善心室重塑。研究表明:独参汤可保护内皮功能,缩小AMI冠脉再通后无复流面积,改善心肌组织再灌注,改善心脏功能,抗凋亡,促进血管新生等效用。中药联合MSCs能提高MSCs在梗死后心肌中的存活和分化,并显着改善心功能和减少灌注缺损面积,可能是中药独参汤改良“土壤”（损伤的心肌为环境）,有利于“种子”（移植干细胞）的存在、分化和发挥效用。改善心功能、修复受损的心肌细胞,减轻心室重塑。目的:1骨髓间充质干细胞的体外分离、扩增、培养。2采用结扎大鼠冠状动脉前降支（LAD）方法,建立大鼠急性心肌梗死模型。3明确骨髓间充质干细胞（MSCs）联合独参汤经心肌直接注射法移植可改善心功能,预防和治疗心室重构。4观察MSCs联合独参汤对大鼠急性心肌梗死后细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3表达的影响。方法:1骨髓间充质干细胞的体外分离、扩增、培养;取Wistar雄性大鼠,采用贴壁筛选法与密度梯度离心相结合的方法分离纯化。每次取Wistar雄性大鼠1只,断颈处死,浸于体积分数为75%乙醇10min,无菌条件下取出股骨和胫骨,以无菌PBS平衡盐缓冲液反复冲洗骨髓腔。收集骨髓液于预先加入DMEM培养基的50mL无菌离心管,以2000r/min转速离心20min,吸取单个细胞层（低密度细胞,位于两层液体的分层处）。DMEM培养基漂洗细胞两次,1000r/min转速离心5min,弃上清,取细胞沉淀。细胞沉淀中加入含体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养基,调整细胞密度约1×106/mL,接种于25cm2细胞培养瓶。48h后更换培养基,去除未贴壁细胞,以后每3d换液1次。原代细胞80%左右融合时予以传代,弃除旧培养基,以无菌PBS平衡盐缓冲液漂洗3次, 1000r/min转速离心10min。弃上清,取细胞沉淀,加入含体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养基,按1:2比例传代。体外扩增MSCs,传代至第5代,以PBS平衡盐缓冲液制备单细胞悬液,予流式细胞学检测细胞表面标志。2采用Olivette方法结扎左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型。动物麻醉:大鼠称重后,用10%水合氯醛行腹腔内注射麻醉（35mg/kg）,待动物充分麻醉后行气管插管,连接小动物呼吸机,行正压辅助呼吸。消毒后切开皮肤,钝性分离胸大肌,开胸,充分暴露心脏,用眼科缝合线距左心耳下缘约1-2cm处,选择前降支成功结扎后,心梗区心肌颜色变暗,心电图可见相应导联ST- T段抬高或压低,逐层关胸,术后做好实验动物的保温,常规应用青霉素20万U每天,连续应用至少三天,在术区完全愈合前,单独饲养。3动物分组:将Wistar大鼠40只随机分为4组:I组急性心肌梗死对照组（AMI, n=10）:大鼠心肌梗死后注射等量培养基;II组急性心肌梗死+干细胞移植组（AMI+ BMSCs, n=10）:急性心肌梗死大鼠接受同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗（2×106 BMSCs /100 u1,分4点注入）;III组急性心肌梗死+独参汤组（AMI+独参汤, n=10）:大鼠急性心肌梗死后2小时开始灌服独参汤,每日二次,共用一周;IV组急性心肌梗死+干细胞移植组+独参汤组（AMI+BMSCs+独参汤, n=10）:大鼠急性心肌梗死后接受同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗（2×106BMSCs /100 u1,分4点注入）,2小时后开始灌服独参汤,每日二次,共用一周。4心功能检测:在骨髓间充质干细胞移植后4周,进行大鼠心脏超声检查。测量左心室舒张末内径（LVDd）,左心室收缩末内径（LVDs）并计算心输出量（CO）和缩短分数（FS）。5心脏标本处理:在骨髓间充质干细胞移植后4周后,行心脏超声检查后,断颈处死大鼠,将心脏标本切成厚度约3mm切片,行石蜡包埋,行心脏HE染色。6心肌细胞凋亡的检测:采用TUNEL法原位标记凋亡细胞。细胞凋亡中,染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量粘性3’-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’-OH末端,从而进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（Terminal deoxyribonucleic transferase mediated d-UTP nick end labeling,TUNEL）。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3’-OH形成,很少能够染色。具体方法按说明书操作。7 Caspase- 3活性检测:caspase-3的前体被激活后表现出其活性,DEVD-pNA可以作为底物被caspase-3酶解,生成可吸收400-405nm波长的产物,根据产物吸光度的高低可推断其相对活性。结果:1骨髓间充质干细胞培养结果:①原代细胞接种2d后多数细胞贴壁,传代后细胞贴壁速度和增殖更快,第5代基本纯化为骨髓间充质干细胞,细胞呈放射状或漩涡状排列。②第5代骨髓间充质干细胞CD44阳性细胞占92.4%,CD90阳性细胞占88.9%,CD34阴性细胞占96.6%,CD45阴性细胞占95.6%。2心脏超声:四组术后各项参数（CO, FS）与术前相比均有显着差异（P<0.05 ）,心输出量（cardiac output,CO）和缩短分数（fractional shortening,FS）均有明显降低,而术前各项参数组间比较无显着差异。II、III、IV组术后各项参数较I组比较均有提高;其中II组和IV组各项参数明显高于I组,且具有显着性差异（P<0.05 ）,而又以IV组对心肌梗死后的心脏泵血功能改善为最佳。3组织病理学结果:术后4周的大鼠心脏标本HE染色可见广泛心肌纤维化,心肌组织排列紊乱,伴有邻近心肌纤维萎缩（或）肥大,心肌组织之间夹杂有大量疤痕组织,并可见轻度的淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,脂肪样改变;细胞移植组心脏标本HE染色示心肌组织间也有结缔组织增生,没有发现血管瘤,小血管数量较为丰富。4 TUNEL检测结果:凋亡细胞表现为细胞核呈棕黄色着染,正常非凋亡细胞心肌细胞未见或偶见TUNEL阳性细胞,被苏木素复染呈蓝色,核相对较大,形态大小较为一致。心肌梗死对照I组,凋亡指数最高,明显高于II、III、IV组,差异具有显着性（P<0.01）;组IV凋亡指数最低且与组II、III比差异具有显着性（P<0.01）;组II组III,组间比较差异无显着性（P>0.05）。5 Caspase-3活性结果:各组间caspase-3活性变化caspase-3活性测定显示,组IV心肌细胞caspase-3活性水平低,组I活性最高（P<0.01）,组II、III、IV经处理后可明显抑制其活性增高,组IV抑制效果优于组II、III。结论:1采用结扎大鼠冠状动脉前降支（LAD）方法,建立大鼠急性心肌梗死模型,造模成功率较高,重复性好,有较强的实用性。2骨髓间充质干细胞心肌注射联合独参汤可改善大鼠急性心肌梗死后心功能。3骨髓间充质干细胞能改善梗死区的供血、供氧,抑制caspase-3蛋白分子在心肌细胞的表达,从而减轻心肌细胞的凋亡,改善心功能;骨髓间充质干细胞心肌注射联合独参汤效果更加明显,表明中药独参汤可能促进骨髓间充质干细胞分化、增殖。
二、人参茎叶皂甙对大鼠心功能的作用研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人参茎叶皂甙对大鼠心功能的作用研究（论文提纲范文）
（1）“固元颗粒”免疫增强剂研制及其在鸡疫苗免疫中的应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 中药免疫增强剂的研究进展 |
| 1.1 免疫增强剂的分类 |
| 1.2 中药免疫增强剂概述 |
| 1.3 中药免疫增强剂的有效成分 |
| 1.4 中药免疫增强剂的作用机理 |
| 1.5 人参、黄芪免疫增强作用研究进展 |
| 1.6 中药免疫增强剂在养禽业中的应用 |
| 第二章 中药对TOLL样受体和信号传导的研究进展 |
| 2.1 先天性免疫 |
| 2.2 ToLL样受体 |
| 2.3 中药对TLRs信号传导途径的研究 |
| 2.4 中药对信号转导的影响 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第一章 “固元颗粒”制剂工艺研究 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第二章 “固元颗粒”质量标准研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 “固元颗粒”的安全性和有效性研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 “固元颗粒”对蛋鸡TLR4 信号通路及胞内分子的调节 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 “固元颗粒”在蛋鸡疫苗免疫中的应用 |
| 5.1 材料 |
| 5.2 方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（2）绞股蓝药材与配方颗粒质量标准研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 绞股蓝考证 |
| 一、绞股蓝来源考证 |
| 二、绞股蓝命名考证 |
| 三、绞股蓝属植物分类系统 |
| 四、绞股蓝标准收载情况 |
| 第二部分 绞股蓝药材质量标准研究 |
| 一、收集样品 |
| 二、性状 |
| 三、鉴别 |
| (一) 显微鉴别 |
| (二) 薄层鉴别 |
| 四、绞股蓝化学成分研究 |
| (一) 绞股蓝化学成分研究现状 |
| (二) 绞股蓝化学成分研究 |
| 五、含量测定 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 方法与结果 |
| 六、绞股蓝药材指纹图谱方法建立 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 方法与结果 |
| 七、检查 |
| (一) 水分 |
| (二) 灰分 |
| (三) 浸出物 |
| 八、绞股蓝药材质量标准建立 |
| 九、分析与讨论 |
| 第三部分 绞股蓝标准汤剂质量标准研究 |
| 一、制法 |
| 二、性状 |
| 三、鉴别 |
| (一) 样品的制备 |
| (二) 样品测定 |
| 四、含量测定 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 方法与结果 |
| 五、绞股蓝标准汤剂指纹图谱研究 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 方法与结果 |
| 六、检查 |
| 七、绞股蓝标准汤剂质量标准建立 |
| 八、分析与讨论 |
| 第四部分 绞股蓝配方颗粒质量标准研究 |
| 一、制法 |
| (一) 绞股蓝配方颗粒提取工艺研究 |
| (二) 绞股蓝配方颗粒浓缩与干燥制粒工艺研究 |
| 二、性状 |
| 三、鉴别 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 试验方法与结果 |
| 四、含量测定 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 方法与结果 |
| 五、配方颗粒指纹图谱研究 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 方法与结果 |
| 六、检查 |
| (一) 粒度 |
| (二) 装量差异 |
| (三) 溶化性 |
| (四) 水分、浸出物检查 |
| 七、绞股蓝配方颗粒质量标准建立 |
| 八、分析与讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
（3）人参叶与人参化学及药理活性差异分析（论文提纲范文）
| 人参叶与人参化学成分差异分析 |
| 人参叶与人参药理活性差异分析 |
| 讨论 |
（4）人参茎叶皂甙制剂的安全性评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 人参茎叶皂甙 |
| 1.1.1 人参茎叶皂甙的化学成分 |
| 1.1.2 人参茎叶皂甙对免疫系统的作用 |
| 1.1.3 人参茎叶皂甙对几个主要脏器的作用 |
| 1.1.4 小结 |
| 1.2 中草药的口服给药途径 |
| 1.3 中药新药的安全性评价 |
| 1.3.1 急性毒性试验 |
| 1.3.2 亚慢性毒性试验 |
| 1.3.3 靶动物安全性试验 |
| 1.3.4 小结 |
| 1.4 本研究的目的和内容 |
| 1.4.1 研究目的 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 第二章 急性毒性试验 |
| 2.1 研究目的和意义 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 受试动物 |
| 2.2.2 受试药物 |
| 2.2.3 主要试剂、器材和仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 益气扶正颗粒半数致死量测定 |
| 2.3.2 益气扶正颗粒半数最大耐受量测定 |
| 2.3.3 石蜡切片制作 |
| 2.3.4 病理组织切片的 H.E.染色检查 |
| 2.3.5 组织形态学观察和分析 |
| 2.3.6 数据统计与分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 半数致死量测定结果 |
| 2.4.2 最大耐受量测定结果 |
| 2.4.3 试验期的表现状况 |
| 2.4.4 体重变化 |
| 2.4.5 系统尸检和病理组织学检查结果 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 亚慢性毒性试验 |
| 3.1 研究目的和意义 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 受试动物 |
| 3.2.2 受试药物 |
| 3.2.3 主要试剂、器材和仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 益气扶正颗粒亚慢性毒性测试 |
| 3.3.2 血液学血常规检查 |
| 3.3.3 血液生化学检查 |
| 3.3.4 病理组织切片制作 |
| 3.3.5 组织形态学观察和分析 |
| 3.3.6 数据统计与分析 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 试验期的表现状况 |
| 3.4.2 体重变化 |
| 3.4.3 血液学血常规检查结果 |
| 3.4.4 血液生化学检查结果 |
| 3.4.5 系统尸检和病理组织学检查结果 |
| 3.5 讨论 |
| 第四章 靶动物安全性试验 |
| 4.1 研究目的和意义 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 受试动物 |
| 4.2.2 受试药物 |
| 4.2.3 主要试剂、器材和仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 益气扶正颗粒靶动物安全性测试 |
| 4.3.2 血涂片制作 |
| 4.3.3 白细胞分类计数 |
| 4.3.4 血液生化学检查 |
| 4.3.5 组织形态学观察和分析 |
| 4.3.6 数据统计与分析 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 试验期的表现状况 |
| 4.4.2 体重变化 |
| 4.4.3 白细胞分类计数结果 |
| 4.4.4 血液生化学检查结果 |
| 4.4.5 系统尸检和病理组织学检查结果 |
| 4.5 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 常用试剂配方 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）人参茎叶皂苷药理作用的研究进展（论文提纲范文）
| 1 对机体免疫功能的影响 |
| 2 抗肿瘤抗衰老作用 |
| 2.1 抗肿瘤 |
| 2.2 抗衰老 |
| 3 抗菌抗病毒及护心护肝作用 |
| 3.1 抗菌抗病毒 |
| 3.2 护心护肝 |
| 4 抗脂质过氧化及高脂血症作用 |
| 5 促进细胞增殖及对中枢神经系统的作用 |
| 5.1 促进细胞增殖 |
| 5.2 对中枢神经系统的作用 |
| 6 对内分泌及呼吸系统的影响 |
| 6.1 内分泌 |
| 6.2 呼吸系统 |
| 7 讨论 |
（6）西洋参茎叶总皂苷减轻心肌缺血/再灌注损伤的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文文摘 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一部分 西洋参茎叶总皂苷的心血管效应及机制 |
| 参考文献 |
| 第二部分 内质网应激与心血管疾病 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 西洋参茎叶总皂苷对于心肌缺血/再灌注损伤的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 西洋参茎叶总皂苷减轻心肌缺血/再灌注致严重内质网应激的研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 西洋参茎叶总皂苷减轻心肌缺血/再灌注致严重内质网应激的下游信号通路研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 创新点及不足 |
| 攻读学位期间第一作者发表文章 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）人参茎叶皂甙提高口蹄疫和新城疫油佐剂疫苗免疫效果的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 图表目录 |
| 英文缩写与注释 |
| 第一部分 文献综述 |
| 第一章 疫苗免疫 |
| 1 免疫应答 |
| 1.1 天然免疫 |
| 1.2 特异性免疫 |
| 2 疫苗 |
| 2.1 疫苗的定义 |
| 2.2 疫苗的分类 |
| 3 本章小结 |
| 第二章 疫苗佐剂 |
| 1 疫苗佐剂的作用机制 |
| 1.1 抗原贮库作用 |
| 1.2 免疫调节作用 |
| 1.3 抗原提呈作用 |
| 1.4 靶向作用 |
| 2 常见免疫佐剂 |
| 2.1 铝盐佐剂 |
| 2.2 油佐剂 |
| 2.3 单磷酰脂质A |
| 2.4 皂甙(Quil-A) |
| 2.5 中药类免疫佐剂 |
| 2.6 复合免疫佐剂 |
| 3 免疫佐剂的组合 |
| 4 展望 |
| 第三章 人参茎叶皂甙的药理作用 |
| 1 人参茎叶皂甙的来源、制备和组成 |
| 2 人参茎叶皂甙药理作用 |
| 2.1 对中枢神经-内分泌系统的作用 |
| 2.2 对心血管系统的作用 |
| 2.3 对免疫系统的作用 |
| 2.4 抗肿瘤作用 |
| 3 本章小结 |
| 本研究的依据、内容和意义 |
| 第二部分 试验研究 |
| 第四章 人参茎叶皂甙提高小鼠对口蹄疫油佐剂疫苗免疫反应的研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 抗原和佐剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 疫苗制备 |
| 2.2 动物分组 |
| 2.3 血清特异性IgG检测 |
| 2.4 数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 不同浓度GSLS对小鼠血清FMDV特异性IgG水平的影响 |
| 4 小结 |
| 第五章 人参茎叶皂甙增强小鼠对低剂量抗原疫苗免疫反应的研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 抗原和佐剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 疫苗制备 |
| 2.2 动物分组 |
| 2.3 血清特异性IgG检测 |
| 2.4 淋巴细胞增殖测定 |
| 2.5 淋巴细胞表达细胞因子mRNA的测定 |
| 2.6 注射部位皮肤厚度的测量 |
| 2.7 数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 血清IgG水平 |
| 3.2 淋巴细胞增殖反应 |
| 3.3 细胞因子mRNA表达 |
| 3.4 注射部位皮肤厚度 |
| 4 小结 |
| 第六章 人参茎叶皂甙提高猪对口蹄疫油佐剂疫苗免疫反应的研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 抗原和佐剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 疫苗制备 |
| 2.2 动物分组 |
| 2.3 猪血清特异性IgG和IgG亚类检测 |
| 2.4 猪外周血淋巴细胞增殖的检测 |
| 2.5 猪血清间接血凝(IHA)效价的检测 |
| 2.6 数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 猪血清IHA效价 |
| 3.2 猪血清IgG及其亚类 |
| 3.3 猪外周血淋巴细胞增殖 |
| 4 小结 |
| 第七章 人参茎叶皂甙提高鸡对新城疫油佐剂疫苗免疫反应的研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 抗原和佐剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 疫苗制备 |
| 2.2 动物分组 |
| 2.3 鸡血清HI效价测定 |
| 2.4 脾脏淋巴细胞增殖测定 |
| 2.5 体重称量和局部病理变化观察 |
| 2.6 数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 鸡血清HI效价 |
| 3.2 鸡脾脏淋巴细胞增殖 |
| 3.3 鸡体重和注射局部病理变化 |
| 4 小结 |
| 第八章 人参茎叶皂甙对油佐剂疫苗的黏滞性影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 仪器设备 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 抗原和佐剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 疫苗制备 |
| 2.2 疫苗黏滞性检测 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 GSLS对油相/水相比例为1：1的油佐剂疫苗黏滞性的影响 |
| 3.2 GSLS对油相/水相比例为2：1的油佐剂疫苗黏滞性的影响 |
| 4 小结 |
| 第九章 综合讨论 |
| 1. FMD疫苗中添加不同剂量GSLS对小鼠免疫反应的影响 |
| 2. GSLS对低剂量抗原FMD油佐剂疫苗免疫效果的影响 |
| 3. FMD油佐剂疫苗中添加不同剂量GSLS对猪的免疫效果 |
| 4. 不同剂量GSLS对鸡ND油佐剂疫苗免疫效果的影响 |
| 5. GSLS化学结构与免疫佐剂作用之间的关系 |
| 6. GSLS降低FMD油佐剂疫苗对局部反应性作用 |
| 7. 油佐剂疫苗中添加GSLS对疫苗黏滞性的影响 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 常用试剂配方 |
| 致谢 |
| 攻读博士研究生期间发表的文章 |
（9）植物病原真菌对人参茎叶皂甙的生物转化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要中英文缩写词表 |
| 第一章 前言 |
| 1 人参茎叶皂甙的研究进展 |
| 1.1 人参皂甙的结构及分类 |
| 1.2 人参茎叶皂甙的提取与检测 |
| 1.3 人参茎叶皂甙的药理作用 |
| 1.4 应用前景 |
| 2 人参皂甙的生物转化 |
| 2.1 生物转化人参皂甙的研究进展 |
| 2.2 生物转化的应用前景 |
| 3 立题依据和研究内容 |
| 3.1 立题依据 |
| 3.2 研究内容和意义 |
| 第二章 人参茎叶皂甙的提取分离 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 仪器与试剂 |
| 2.3 人参茎叶总皂甙的提取及纯化 |
| 2.4 硅胶柱层析法分离人参茎叶皂甙 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 人参茎叶总皂甙的提取 |
| 3.2 人参茎叶总皂甙的分离 |
| 3.3 小结与讨论 |
| 第三章 植物病原真菌转化人参茎叶皂甙 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验器材 |
| 2.2 筛选转化人参皂甙的菌种 |
| 2.3 真菌孢子转化人参茎叶皂甙的级分-Ⅲ |
| 2.4 糖苷酶的制备 |
| 2.5 E-Ⅰ 转化人参茎叶皂甙 |
| 2.6 转化产物的TLC 和HPLC 检测 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 植物病原真菌的筛选 |
| 3.2 孢子液转化人参皂甙 |
| 3.3 DEAE-纤维素柱层析法分离纯化糖苷酶 |
| 3.4 E-Ⅰ 的酶活性质 |
| 3.5 E-Ⅰ 对人参茎叶皂甙的转化 |
| 3.6 小结与讨论 |
| 第四章 菌种的鉴定 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验器材 |
| 2.2 形态鉴定 |
| 2.3 基因组DNA 的提取 |
| 2.4 基因组DNA 的纯化及ITS 的基因克隆 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 菌落形态及显微观察 |
| 3.2 分子生物学鉴定 |
| 3.3 小结与讨论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）骨髓间充质干细胞联合独参汤对大鼠急性心肌梗死及细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 中英文及缩写对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的研究进展 |
| 人参对急性心梗的治疗作用研究进展 |
| 心肌梗死和细胞凋亡 |
| 中药与骨髓间充质细胞 |
| 第一部分 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 第二部分 MSCs 联合独参汤对大鼠急性心肌 梗死及细胞凋亡的影响 |
| 1 主要实验仪器和材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 检测指标 |
| 4 结果 |
| 分析讨论 |
| 1 骨髓间充质干细胞移植对心梗后心功能及细胞凋亡的影响 |
| 2 独参汤对心梗后心功能及细胞凋亡的影响 |
| 3 中药促进骨髓间充质细胞向心肌细胞分化 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、人参茎叶皂甙对大鼠心功能的作用研究（论文参考文献）
- [1]“固元颗粒”免疫增强剂研制及其在鸡疫苗免疫中的应用[D]. 王申锋. 吉林大学, 2020(08)
- [2]绞股蓝药材与配方颗粒质量标准研究[D]. 黄盼盼. 浙江中医药大学, 2019(08)
- [3]人参叶与人参化学及药理活性差异分析[J]. 纪瑞锋,袁媛,刘娟. 中华中医药杂志, 2017(05)
- [4]人参茎叶皂甙制剂的安全性评价[D]. 王云皓. 浙江农林大学, 2014(03)
- [5]人参茎叶皂苷药理作用的研究进展[J]. 李凤林. 贵州农业科学, 2013(02)
- [6]西洋参茎叶总皂苷减轻心肌缺血/再灌注损伤的研究[D]. 王琛. 中国中医科学院, 2012(01)
- [7]人参茎叶皂甙提高口蹄疫和新城疫油佐剂疫苗免疫效果的研究[D]. 李禹涛. 浙江大学, 2012(08)
- [8]西洋参茎叶总皂甙的心血管效应及其机制探讨[J]. 王琛,史大卓. 中国中西医结合杂志, 2011(06)
- [9]植物病原真菌对人参茎叶皂甙的生物转化[D]. 梁飞. 东北师范大学, 2011(06)
- [10]骨髓间充质干细胞联合独参汤对大鼠急性心肌梗死及细胞凋亡的影响[D]. 高莹. 辽宁中医药大学, 2011(12)