一、针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用（论文文献综述）
张继瑶[1]（2021）在《电针预处理调控肠道菌群与Th17/Treg免疫平衡降低大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制研究》文中研究说明实验一电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠肠道菌群结构的影响目的:观察电针预处理对脑缺血/再灌注大鼠神经功能和肠道菌群结构的影响。方法:将36只SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,即假手术组、模型组、电针预处理组,每组12只。电针预处理组给予2周的百会穴和足三里穴电针预处理,其余两组仅给予同等条件的抓取。制备大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,激光多普勒血流监测仪监测缺血侧脑血流变化,缺血2h后拔出鱼线恢复再灌注。再灌注12h、1d、3d、7d,采用改良神经功能缺损评分评价大鼠的神经功能、大小鼠抓力测定仪对大鼠的前肢抓握力量进行测定并统计和记录大鼠再灌注7 d内的存活率;再灌注7 d,采用TTC染色测定脑梗死体积,应用HE染色观察缺血侧皮层及结肠组织病理损伤程度,应用高通量16S rDNA V3-V4区测序分析肠道菌群多样性。结果:1.改良神经功能缺损评分:再灌注12 h、1d、3d、7 d,与假手术组比较,模型组大鼠改良神经功能缺损评分显着升高（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠改良神经功能缺损评分显着降低（P<0.05）。2.前肢抓握力量测试:再灌注12 h、1d、3d、7 d,与假手术组比较,模型组大鼠前肢抓握力量显着降低（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠前肢抓握力量显着升高（P<0.05）。3.存活率:再灌注7 d,与假手术组比较,模型组大鼠存活率（46.15%）显着降低（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠存活率（80.00%）显着升高（P<0.05）。4.TTC染色:再灌注7d,与假手术组比较,模型组大鼠脑梗死体积显着增大（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组脑梗死体积显着缩小（P<0.05）。5.HE染色:再灌注7 d,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧皮层及结肠组织的病理损伤程度明显加重;与模型组比较,电针预处理组大鼠缺血侧皮层及结肠组织的病理损伤程度明显减轻。6.16S rDNA V3-V4 区测序:从门水平上看,与假手术组比较,模型组大鼠盲肠内容物内变形菌门（Proteobacteria）,TM7和柔壁菌门（Tenericutes）的相对丰度显着升高（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠盲肠内容物内变形菌门（Proteobacteria）,TM7和柔壁菌门（Tenericutes）的相对丰度显着降低（P<0.05）。从科水平上看,与假手术组比较,模型组大鼠盲肠内容物内毛螺菌科（Lachnospiraceae）和双歧杆菌科（Bifidobaceartaceie）的相对丰度显着降低（P<0.05）,明串珠菌科（Leuconostocaceae）和肠杆菌科（Enterobacteriaceae）的相对丰度显着升高（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠盲肠内容物内明串珠菌科（Leuconostocaceae）和肠杆菌科（Enterobacteriaceae）的相对丰度显着降低（P<0.05）。从属水平上看,与假手术组比较,模型组大鼠盲肠内容物内乳酸杆菌（Lactobacillus）,粪球菌属（Coprococcus）,双歧杆菌属（Bifidobacterium）,布劳特氏菌属（Blautia）和普雷沃氏菌（Prevotella）的相对丰度显着降低（P<0.05）,ClostridaceaeClotridium和瘤胃球菌属[Ruminococcus]的相对丰度显着升高（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠盲肠内容物内乳酸杆菌（Lactobacillus）,布劳特氏菌属（Blautia）和普雷沃氏菌（Prevotella）的相对丰度显着升高（P<0.05）,ClostridiaceaeClostridium和瘤胃球菌属[Ruminococcus]的相对丰度显着降低（P<0.05）。肠道菌群与mNSS评分相关性分析显示,在门水平上,变形菌门（Proteobacteria）、TM7和柔壁菌门（Tenericutes）的相对丰度与mNSS评分呈正相关（P<0.05）;在科水平上,明串珠菌科（Leuconostocaceae）和肠杆菌科（Enterobacteriaceae）的相对丰度与mNSS评分呈正相关（P<0.05）;在属水平上,ClostridiaceaeClostridium和瘤胃球菌属Ruminococcus]的相对丰度与mNSS评分呈正相关（P<0.05）,乳酸杆菌（Lactobacillus）,布劳特氏菌属（Blautia）和普雷沃氏菌（Prevotella）的相对丰度与mNSS评分呈负相关（P<0.05）。结论:电针预处理可下调脑缺血/再灌注大鼠盲肠内容物内变形菌门（Proteobacteria）,TM7、柔壁菌门（Tenericutes）、明串珠菌科（Leuconostocaceae）、肠杆 菌科（Enter obacteriaceae）、Clostridiaceae Clostridium和瘤胃球菌属[Ruminococcus]的相对丰度,上调乳酸杆菌（Lactobacillus）、布劳特氏菌属（Blautia）和普雷沃氏菌（Prevotella）的相对丰度,减轻缺血侧皮层及结肠组织的病理损伤程度,缩小脑梗死体积,降低死亡率及神经功能缺损。实验二电针预处理对脑缺血/再灌注大鼠Th17/Treg免疫平衡的影响目的:观察电针预处理对脑缺血/再灌注大鼠Th17/Treg免疫平衡及相关炎症因子表达的影响。方法:将36只SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,即假手术组、模型组、电针预处理组,每组12只。电针预处理组给予2周的百会穴和足三里穴电针预处理,其余两组仅给予同等条件的抓取。制备大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,激光多普勒血流监测仪监测缺血侧脑血流变化,缺血2 h后拔出鱼线恢复再灌注。再灌注7 d,采用免疫组化检测缺血侧皮层、结肠组织IL-17A、IL-10蛋白的表达,采用Western blotting检测缺血侧皮层和结肠组织中IL-17A、IL-10蛋白的表达,及缺血侧皮层、脾脏和胸腺组织中RORγt、Foxp3蛋白的表达,应用Elisa测定大鼠腹主动脉血清IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-βl的含量,分析缺血侧皮层RORγt、Foxp3蛋白表达与mNSS评分的相关性。结果:1.免疫组化:再灌注7 d,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧皮层及结肠组织中IL-17A,IL-10蛋白的平均光密度值显着升高（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠缺血侧皮层及结肠组织中IL-17A蛋白的平均光密度值显着降低,IL-10蛋白的平均光密度值显着升高（P<0.05）。2.IL-17A、IL-10蛋白表达:再灌注7 d,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧皮层及结肠组织内IL-17A、IL-10蛋白表达量显着增加（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠缺血侧皮层及结肠组织内IL-17A蛋白表达量显着减少,IL-10蛋白表达量显着增加（P<0.05）。3.RORγt、Foxp3蛋白表达:再灌注7 d,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧皮层、脾脏和胸腺组织内RORγt、Foxp3蛋白表达量显着增加（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠缺血侧皮层、脾脏和胸腺组织内RORγt蛋白表达量显着减少,Foxp3蛋白表达量显着增加（P<0.05）。4.血清Elisa:再灌注7d,与假手术组比较,模型组大鼠腹主动脉血清内炎性因子IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1的含量均显着增加（P<0.05）;与模型组比较,电针预处理组大鼠腹主动脉血清内促炎因子IL-17A、IL-23含量显着减少,抗炎因子IL-10、TGF-β1的含量显着增加（P<0.05）。5.RORγt、Foxp3蛋白与mNSS评分相关性分析:再灌注7d,缺血侧皮层RORγt、Foxp3蛋白的表达与mNSS评分呈正相关（P<0.05）;电针干预下,缺血侧皮层RORγt蛋白的表达与mNSS评分呈正相关（P<0.05）,Foxp3蛋白的表达与mNSS评分呈负相关（P<0.05）。结论:1.电针预处理可下调缺血侧皮层及结肠组织内IL-17A表达,上调IL-10表达,降低外周IL-17A、IL-23含量,升高IL-10、TGF-β1含量,减轻脑缺血后肠道-中枢炎症损伤;2.电针预处理可下调缺血侧皮层、脾脏和胸腺组织内RORγt表达、上调Foxp3表达,调控Th17/Treg免疫平衡,发挥脑-肠保护作用。实验三电针预处理通过肠道菌群诱导脑缺血耐受的免疫机制研究目的:观察菌群剔除及菌群移植（电针预处理2周后菌群）对脑缺血/再灌注大鼠神经功能及相关炎症因子表达的影响。方法:将60只SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、ABX-Pre+模型+FMT组、ABX-Pre+模型+PBS组、ABX+模型组,每组12只。整个实验过程中,假手术组、模型组给予无菌饮水;ABX-Pre+模型+FMT组、ABX-Pre+模型+PBS组在造模前给予2周的抗生素饮水,模型制备后给予无菌饮水;ABX+模型组在造模前给予2周的抗生素饮水,模型制备后继续给予抗生素饮水。制备大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,激光多普勒血流监测仪监测缺血侧脑血流变化,缺血2 h后拔出鱼线恢复再灌注。再灌注12 h、1d、3d、7 d,采用改良神经功能缺损评分评价大鼠神经功能、大小鼠抓力测定仪对大鼠的前肢抓握力量进行测定;再灌注7 d,应用HE染色观察缺血侧皮层及结肠组织病理损伤程度,采用免疫组化检测缺血侧皮层IL-17A、IL-10蛋白的表达,应用Elisa测定大鼠腹主动脉血清 IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1 的含量。结果:1.改良神经功能缺损评分:再灌注12 h、1d、3d、7 d,与假手术组比较,模型组大鼠改良神经功能缺损评分显着升高（P<0.05）;与模型组比较,ABX-Pre+模型+FMT组大鼠改良神经功能缺损评分显着降低（P<0.05）,ABX-Pre+模型+PBS组大鼠改良神经功能缺损评分显着升高（P<0.05）;与ABX-Pre+模型+PBS组比较,ABX+模型组大鼠改良神经功能缺损评分显着升高（P<0.05）。2.前肢抓握力量测试:再灌注12 h、1d、3d、7 d,与假手术组比较,模型组大鼠前肢抓握力量显着降低（P<0.05）;与模型组比较,ABX-Pre+模型+FMT组大鼠前肢抓握力量显着升高（P<0.05）,ABX-Pre+模型+PBS组大鼠前肢抓握力量显着降低（P<0.05）;与ABX-Pre+模型+PBS组比较,ABX+模型组大鼠前肢抓握力量显着降低（P<0.05）。3.HE染色:再灌注7 d,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧皮层及结肠组织的病理损伤程度明显加重;与模型组比较,ABX-Pre+模型+FMT组大鼠缺血侧皮层及结肠组织的病理损伤程度明显减轻,ABX-Pre+模型+PBS组大鼠缺血侧皮层及结肠组织的病理损伤程度明显加重;与ABX-Pre+模型+PBS组比较,ABX+模型组大鼠缺血侧皮层及结肠组织的病理损伤程度明显加重。4.免疫组化:再灌注7 d,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧皮层IL-17A,IL-10蛋白的平均光密度值显着升高（P<0.05）;与模型组比较,ABX-Pre+模型+FMT组大鼠缺血侧皮层IL-17A蛋白的平均光密度值显着降低,IL-10蛋白的平均光密度值显着升高（P<0.05）,ABX-Pre+模型+PBS组大鼠缺血侧皮层IL-17A蛋白的平均光密度值显着升高,IL-10蛋白的平均光密度值显着降低（P<0.05）;与ABX-Pre+模型+PBS组比较,ABX+模型组大鼠缺血侧皮层IL-17A蛋白的平均光密度值显着升高,IL-10蛋白的平均光密度值显着降低（P<0.05）。5.血清Elisa:再灌注7d,与假手术组比较,模型组大鼠腹主动脉血清内炎性因子IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1的含量均显着增加（P<0.05）;与模型组比较,ABX-Pre+模型+FMT组大鼠腹主动脉血清内促炎因子IL-17A、IL-23的含量显着减少,抗炎因子IL-10、TGF-β1的含量显着增加（P<0.05）,ABX-Pre+模型+PBS组大鼠腹主动脉血清内促炎因子IL-17A、IL-23的含量显着增加,抗炎因子IL-10、TGF-β1的含量显着减少（P<0.05）;与ABX-Pre+模型+PBS组比较,ABX+模型组大鼠腹主动脉血清内促炎因子IL-17A、IL-23的含量显着增加,抗炎因子IL-10、TGF-β1的含量显着减少（P<0.05）。结论:电针预处理可通过肠道菌群减轻脑缺血/再灌注大鼠缺血侧皮层和结肠组织的病理损伤程度及肠道-中枢炎症损伤,改善神经行为学功能。
欧阳波[2]（2021）在《冰片配伍黄芪甲苷和三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤后神经血管单元保护作用的研究》文中研究表明目的:研究冰片配伍黄芪甲苷（Astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ）和三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对大鼠脑缺血/再灌注损伤（Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）后脑组织损伤、神经血管单元主要组分（神经元、星形胶质细胞和微血管）的结构、主要组分特异蛋白--胶质纤维酸性蛋白（Glialfibrillary acidic protein,GFAP）、神经元特异性核蛋白（Neuron specific nuclear,Neu N）、层黏连蛋白（Laminin,LN）、内皮屏障抗原蛋白（Endothelial barrier antigen,EBA）及相关功能蛋白--αII-血影蛋白（αII-Spectrin,αII-SP）、水通道蛋白4（Aquaporin 4,AQP-4）、基质金属蛋白酶9（Matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响,探讨其通过Notch信号通路对神经血管单元的保护机制。方法:成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为假手术组（Sham Operation Group,SOG）、模型组（Model Group,MG）、冰片组（Borneol Group,BG）、AST Ⅳ组（AST Ⅳ Group,AG）、PNS组（PNS Group,PG）、AST Ⅳ+PNS组（AST Ⅳ+PNS Group,APG）、冰片+AST Ⅳ+PNS低剂量组（Borneol+AST Ⅳ+PNS Low-dose Group,LDG）、冰片+AST Ⅳ+PNS高剂量组（Borneol+AST Ⅳ+PNS High-dose Group,HDG）、依达拉奉组（Edaravone Group,EG）。EG腹腔注射给药,其他组灌胃给药,2次/d。采用线栓法阻断右侧大脑中动脉（Middle cerebral artery,MCA）,建立大鼠CIRI模型。缺血2h,再灌注后22h,行神经功能缺损评分,TTC染色测定脑梗死体积,HE染色观察大脑缺血皮质区病理形态;免疫组化法检测大脑缺血皮质区GFAP、Neu N、LN、EBA的表达;免疫荧光三标法检测大脑缺血皮质区GFAP、神经丝蛋白200（neurofilament-200,NF-200）、LN的蛋白表达;Westrn blot检测大脑缺血皮质区αII SP、AQP-4、MMP-9、VEGF、Notch1、Notch胞内域（Intracellular domain of Notch,NICD）、Hes1、Delta-like ligand 4（DLL4）蛋白的表达。结果:缺血2h,再灌注22h后,MG出现神经功能缺损、右侧局灶性脑梗死、神经细胞损伤。各药物组神经功能缺损评分、脑梗死体积和神经细胞损伤率显着降低（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的效应强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。缺血2h,再灌注22h后,免疫组化结果显示,MG的Neu N、LN、EBA阳性细胞显着减少（P<0.01）,GFAP阳性细胞显着增加（P<0.01）;冰片、PNS、AST Ⅳ、AST Ⅳ+PNS与冰片+AST Ⅳ+PNS能显着增强Neu N、LN、EBA蛋白表达（P<0.05、0.01）,显着降低GFAP蛋白表达（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。免疫荧光三标结果显示,MG的NF-200、LN阳性细胞显着减少（P<0.01）,GFAP阳性细胞显着增加（P<0.01）;冰片、AST Ⅳ、PNS、AST Ⅳ+PNS与冰片+AST Ⅳ+PNS能显着降低GFAP蛋白表达（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。冰片、AST Ⅳ+PNS与冰片+AST Ⅳ+PNS能显着增强LN蛋白表达（P<0.05、0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。冰片+AST Ⅳ+PNS能显着增强NF-200蛋白表达（P<0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于AST Ⅳ+PNS（P<0.05）。Westrn blot结果显示,MG大鼠缺血皮质区AQP-4、MMP-9蛋白表达显着增加（P<0.05）,αII SP蛋白表达水平显着降低（P<0.05）,而VEGF、NICD、Notch1、Hes1、DLL4蛋白表达无显着变化（P>0.05）,冰片+AST Ⅳ+PNS能显着上调αII SP、VEGF、NICD、Notch1、Hes1、DLL4蛋白的表达（P<0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的效应强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。冰片+AST Ⅳ+PNS能显着下调AQP-4、MMP-9蛋白的表达（P<0.01）,且冰片+AST Ⅳ+PNS的效应强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS（P<0.05、0.01）。结论:1.冰片配伍AST Ⅳ和PNS对大鼠CIRI后具有脑保护作用,能改善神经功能缺损、降低神经细胞损伤率、减少脑梗死体积,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS。2.冰片配伍AST Ⅳ和PNS对大鼠CIRI后神经血管单元具有保护作用,可减轻神经元和微血管基底膜损伤、抑制星形胶质细胞过度活化、减轻脑水肿,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于各药物单用及AST Ⅳ+PNS。维持神经血管单元结构完整性,且冰片+AST Ⅳ+PNS的作用强于AST Ⅳ+PNS。3.冰片配伍AST Ⅳ和PNS对大鼠CIRI后的脑保护作用机制可能与激活Notch信号通路,上调NICD、Notch1、Hes1、VEGF、DLL4表达,从而发挥对缺血脑组织的保护作用有关。
侯慧敏[3]（2021）在《中风膏预适应对脑缺血再灌注损伤后CD34、VEGF、MMP-9的影响研究》文中进行了进一步梳理目的:基于中医治未病理论,观察研究中风膏预适应对脑缺血再灌注损伤后血管的保护作用及作用机制,为中医药治疗脑血管病提供新的思路和方法。方法:SPF级雄性SD大鼠64只,体重280±20g。随机分为假手术组（S）、脑缺血再灌注模型组（I/R）、脑缺血预适应模型组3天（BDP 3d）、5天（BDP 5d）、7天（BD P 7d）,中风膏预适应模型组3天（ZFG+I/R 3d）、5天（ZFG+I/R 5d）、7天（ZFG+I/R 7d）,每组各8只。S组仅暴露CCA、ECA及ICA,但不阻断MCA,灌服生理盐水;I/R组参照Longa等改进的大脑中动脉二次线栓法制备缺血再灌注损伤模型;BDP组制备脑缺血预适应模型;ZFG+I/R组予中风膏悬浊液预先灌胃,再建立缺血再灌注损伤模型。观察在麻醉清醒前后实验大鼠的一般情况、精神状况及神经功能缺损评分;将各组大鼠进行脑组织常规HE染色观察;采用免疫组化法检测组织中CD34蛋白表达;E LISA法进行脑组织血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白含量测定;RT-PCR技术检测缺血脑组织内VEGF、MMP-9基因表达情况。结果:（1）通过观察脑缺血大鼠的精神、饮食及体重等情况,说明中风膏能够促进脑缺血大鼠一般情况的恢复;（2）中风膏预适应与脑缺血预适应对脑缺血后大鼠神经功能缺损评分均降低,对神经功能缺损症状有改善作用,中风膏预适应的保护作用更显着。（3）通过免疫组化法检测实验大鼠脑组织切片发现脑缺血区CD34蛋白表达增加,说明中风膏对缺血区脑组织具有血管重塑作用;（4）通过ELISA法检测出缺血区脑组织VEGF的蛋白含量增高、MMP-9的蛋白含量降低,RT-PCR技术检测出缺血脑组织内VEGF基因表达增加、MMP-9基因表达减少,说明中风膏具有诱导缺血区脑组织血管再生的作用。结论:中风膏预适应能够诱导脑组织产生缺血耐受机制,而这种机制对脑组织具有延迟保护效应,能够减轻缺血再灌注造成的损伤;而这种保护效应可能是通过增加了缺血损伤区域CD34蛋白的表达,增加了VEGF的含量及基因表达、降低了MMP-9的含量及基因表达而实现的。
高云云[4]（2021）在《电针调控miR-210-3p经AKT/mTOR信号通路对局灶性脑缺血大鼠血管新生的影响》文中研究说明目的:探讨电针对MCAO大鼠血管新生的调控作用,以miR-210-3p及AKT/mTOR信号通路为切入点,探讨3个时相（3 d、7 d、14 d）下电针对于miR-210-3p、AKT/mTOR通路因子相互作用的调控作用,以期进一步阐述电针调控脑缺血后血管新生的可能机制,为揭示miRNAs作为潜在作用途径的脑缺血防治提供新思路。方法:将160只清洁级雄性（Sprague Dawley,SD）大鼠随机取假手术组36只,余124只大鼠建立MCAO模型,将符合评分标准的108只大鼠随机分为3组:模型组、电针组、电针+抑制剂组（简称抑制剂组）分别36只,上述4组大鼠,再分为3 d、7 d、14 d三个时相组,每组12只。电针组选“百会”、“大椎”两穴,用0.30*25 mm毫针针刺,电针参数:疏密波,频率为5～100 Hz,电流1～2 m A,强度以引起穴位周围组织轻微颤抖为度,治疗时长为20 min。首次治疗于术后4 h开始,每日1次,分别连续治疗3 d、7 d、14 d。抑制剂组予以特异性抑制剂雷帕霉素腹腔注射,浓度为0.1 mg/ml,每次0.3 mg/kg,每日1次,再进行电针治疗（方法同电针组）。随后进行神经功能缺损评分（modified neurological severity scores,m NSS）评估四组大鼠的神经功能损伤;运用激光多普勒血流仪测定插线后5 min、3 d、7 d、14 d局部脑血流量;HE染色观察脑组织病理改变;Western Blot检测AKT/p-AKT/mTOR/p-mTOR蛋白表达;RT-q PCR检测miR-210-3p、Ephrin A3、AKT、mTOR m RNA表达;运用免疫组织化学法（immunohistochemistry,IHC）测定CD31+表达,Weidner法计数缺血侧皮质区微血管密度（Microvessel Density,MVD）。结果:1.改良大鼠神经功能缺损评分（mNSS）假手术组在术后四个时间段（4 h、3 d、7 d、14 d）神经功能缺损评分均为0分;模型组与电针组比较,电针组神经功能评分均低于模型组,干预7 d、14 d时较为显着（P<0.01）;模型组与抑制剂组相比,干预3 d、7 d、14 d神经功能缺损程度均无统计学意义;干预14 d后,电针组与抑制剂组相比,神经功能缺损评分显着降低（P<0.01）。2.局部脑血流量（rCBF）假手术组大鼠的局部脑血流量在四个时间段下（5 min、3 d、7 d、14 d）约稳定在130 Pu左右,与假手术组相比,模型组大鼠术后四个时间段血流量均明显低于假手术组（P<0.01）;与模型组相比较,电针组和抑制剂组在干预5 min、3 d时,无统计学意义（P>0.05）,干预7 d、14 d时,电针组与抑制剂组局部脑血流量均明显高于模型组,具有显着性差异（P<0.05）,其中7 d时具有具有极显着差异（P<0.01）;电针组与抑制剂组比较,干预7 d、14 d时脑血流量均增高,7 d时具有极显着性差异（P<0.01）,14 d时局部脑血流量持续增高,具有显着性差异（P<0.05）。3.脑组织病理学观察（HE染色）假手术组大鼠在3个时间段缺血侧皮质区脑组织结构完整,神经元排布有序,存在极少量空泡,细胞核清晰完整。模型组大鼠缺血侧皮质区脑组织可见大量空泡,间质水肿明显,神经元细胞排列不紧密,结构疏松呈网状,数量明显减少,大量神经元细胞凝聚。术后14 d,脑组织损伤程度较3 d、7 d进一步减轻。不同时间段下电针及抑制剂组大鼠缺血侧皮质区脑组织均有不同程度的改善。4.Western Blot检测AKT/p-AKT/mTOR/p-mTOR蛋白表达假手术组各个时间段,大鼠缺血侧皮质区有少量的AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR表达。与假手术组比较,模型组中p-AKT的表达在各个时间段持续增加（P<0.05）,在14 d达到高峰;AKT、mTOR的表达在3 d达到高峰（P<0.01）;p-mTOR的表达在7 d达到高峰（P<0.01）。与模型组比较,电针组3 d、7 d、14 d中AKT/p-AKT/mTOR/p-mTOR表达显着增高（P<0.01）,AKT和p-AKT的表达在14d达到高峰,mTOR和p-mTOR的表达在各个时间明显增加（P<0.01）,在7 d达到高峰;抑制剂组中各个时间Akt/p-AKT/mTOR/p-mTOR的表达降低（P<0.05）。5.RT-q PCR检测miR-210-3p/Ephrin A3及AKT/mTORm RNA表达假手术组大鼠缺血侧皮质区miR-210-3p/Ephrin A3/AKT/mTOR mRNA呈少量表达。模型组miR-210-3p/Ephrin A3/AKT/mTOR mRNA相对表达量在3 d、7 d、14d较假手术组均显着增高,且具有极显着性差异（P<0.01）。治疗3 d、7 d、14 d后,电针组miR-210-3p mRNA相对表达量较模型组均显着升高,具有极显着性差异（P<0.01）,Ephrin A3 mRNA相对表达量均降低,具有显着性差异（P<0.05或P<0.01）。抑制剂组与电针组不同时间比较,miR-210-3p mRNA相对表达量均降低（P<0.01）,Ephrin A3 mRNA相对表达量均升高（P<0.05）。与模型组比较,电针组、抑制剂组大鼠干预7 d、14 d后AKT/mTOR m RNA的相对表达量均显着高于模型组（P<0.05或P<0.01）,电针组与抑制剂组比较,AKT/mTOR mRNA的相对表达量均显着增高（P<0.01）。6.微血管密度（MVD）测定假手术组三个时间段下仅见少量CD31+阳性表达。与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧皮质区脑组织中的CD31+阳性细胞数量表达均显着增高（P<0.05或P<0.01）;电针组与模型组比较,CD31+阳性细胞数量表达显着增多（P<0.01）,在14 d时CD31+阳性细胞数量表达达到高峰;抑制剂组与假手术组比较,3 d时无统计学意义（P>0.05）,干预7 d、14 d电针组与抑制剂组CD31+阳性细胞数量表达具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.电针促进MCAO大鼠神经功能的重建、改善大脑局部脑血流量,改善MCAO大鼠缺血侧皮质区脑组织病理变化。2.电针可调节MCAO大鼠缺血侧皮质区脑组织miR-210-3p及其靶向信使Ephrin A3的表达;上调AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、CD31+相对表达,提示miR-210-3p可能特异性调节AKT/mTOR信号通路,在脑缺血恢复中促进血管新生,这可能是电针促进脑缺血后血管新生的相关机制之一。
贺琳[5]（2020）在《针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞凋亡的影响》文中指出目的本研究采用大脑中动脉线栓法（Middle Cerebral artery occlusion MACO）制备大鼠左侧急性局灶性缺血/再灌注模型,观察针刺对大鼠血清中Fas,Fasl和大脑皮质中凋亡细胞caspase-3与caspase-9表达的影响,从而探讨针刺减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法将100只清洁级SD大鼠,雄性,220g-300g,按随机数字表分为3组:假手术组,模型组,针刺组。假手术组只分离左侧颈总动脉,颈外动脉和颈内动脉,不结扎血管,不插入栓线。模型组和针刺组大鼠制备脑缺血再灌注模型。大鼠造模成功后,针刺组于6h,24h,48h,72h将大鼠捆缚后,分别针刺百会,大椎,双侧足三里,假手术组和模型组于相同时间段,实施捆缚但不实施针刺。各组大鼠麻醉清醒后2h,24h,48h,72h,用五分评分法和脑卒中指数评分法进行神经功能评分;TTC染色法观察脑梗死面积的变化;HE染色法检查大鼠脑细胞形态结构变化;ELISA法检测大鼠血清中Fas,fasl含量表达的变化;TUNEL检测细胞凋亡;免疫荧光检测caspase-3和caspase-9阳性表达。结果1.针刺对各组大鼠神经功能评分的影响大鼠麻醉清醒后2h,24h,48h,72h用五分评分法和脑卒中指数评分法进行神经功能评分。2h和24h时模型组,针刺组评分明显高于假手术组,差异有统计意义（p<0.05）,模型组和针刺组则区别不明显,差异无统计意义（p>0.05）;48h和72h时模型组,针刺组评分明显高于假手术组,差异有统计意义（p<0.05）,模型组评分明显高于针刺组,差异有统计意义（p<0.05）。因此可得,针刺干预48h后可改善脑缺血再灌注模型大鼠的神经功能评分。2.针刺对各组大鼠脑组织梗死面积变化的影响TTC染色后发现假手术组大鼠脑组织染色均为红色,未见白色梗死灶。模型组和针刺组大鼠脑组织染色后均可见右侧半脑为红色,左侧半脑则出现白色梗死灶,且针刺组梗死灶显着小于模型组梗死灶。3.针刺对各组大鼠脑形态学的影响肉眼观察大鼠脑组织大体形态可见,假手术组的鼠脑左右半球对称,颜色淡粉,分布均匀。模型组鼠脑左右半球不对称,梗死侧脑组织颜色苍白,大面积脑组织肿胀,正常侧呈淡粉色。针刺组鼠脑左右半球较为对称,梗死侧脑组织颜色苍白,脑组织肿胀较之模型组要轻,正常侧也呈淡粉色。HE染色后观察各组大鼠大脑皮质的病理变化。假手术组:脑组织神经细胞排列致密,整齐。模型组:梗死侧脑组织大量神经细胞变性坏死,萎缩,周围间隙扩大,胞浆嗜伊红着色,胞质呈空泡变性,疏松,胞核浓缩深染。针刺组:梗死侧脑神经元排列较为致密,整齐,周围间隙较小。4.针刺对各组大鼠血清中Fas,Fasl含量的影响模型组和针刺组大鼠血清中的Fas和Fasl含量与假手术组相比,明显增多,差异具有统计学意义（p<0.05）。针刺组大鼠血清中的Fas和Fasl含量与模型组相比较,针刺组明显少于模型组,差异具有统计学意义（p<0.05）。5.针刺对各组大鼠大脑皮质细胞凋亡影响假手术组大鼠大脑皮质中可见少量凋亡细胞,模型组和针刺组大鼠大脑皮质中均有较多的凋亡细胞,且均高于假手术组,差异具有统计学意义（p<0.05）。但与模型组相较,针刺组大鼠大脑皮质中凋亡细胞明显减少。差异具有统计学意义（p<0.05）。6.针刺对各组大鼠大脑皮质中caspase-9,caspase-3的表达影响假手术组大鼠大脑皮质中可见少量凋亡细胞caspase-9和caspase-3表达,模型组和针刺组大鼠大脑皮质中均有较多的凋亡细胞caspase-9和caspase-3表达,且高于假手术组,差异具有统计学意义（p<0.05）。但与模型组相较,针刺组大鼠大脑皮质的凋亡细胞caspase-9和caspase-3阳性细胞明显减少。差异具有统计学意义（p<0.05）。结论1,针刺能够有效改善脑缺血再灌注模型大鼠神经功能缺损。2,针刺能够减少脑缺血再灌注模型大鼠脑梗死面积和脑神经细胞的变性坏死。3,针刺治疗后大鼠血清中的Fas和Fasl含量减少,大鼠大脑皮质中凋亡细胞caspase-3和caspase-9表达减少,提示这些凋亡因子在大鼠脑缺血再灌注后的脑损伤中有着重要作用,针刺通过降低凋亡因子的表达,达到减轻神经功能损伤,减轻脑水肿,减少脑梗死面积,发挥脑保护的作用。
向昱臻[6]（2020）在《清脑益元汤对局灶性脑缺血损伤大鼠NPY、CGRP表达水平的影响》文中研究表明目的:研究清脑益元汤对大鼠局灶性脑缺血损伤后神经肽NPY、CGRP表达的影响,探讨清脑益元汤防治局灶性脑缺血损伤的部分作用机制。方法:将240只SD大鼠按照体重大小分层,再分成A、B两大组,每大组120只大鼠,每大组用随机数字表法再将大鼠分为4组:空白组组、假手术组、模型组、清脑益元汤组。除空白组外,各组大鼠参照Longa线栓法,制作大鼠大脑中动脉栓塞模型。其中,假手术组在大鼠颈内动脉插入线栓8-10mm,此深度不足以阻断大脑中动脉血流,其余步骤与手术组相同。参考Longa的5分制法对大鼠进行神经功能缺损评分,并按照MCAO术后1d、3d、7d、14d、28d五个处死时间点分为5个亚组,每个亚组6只大鼠。空白组正常饲养,灌胃等体积蒸馏水。假手术组、模型组大鼠术后灌胃等体积蒸馏水、清脑益元汤组术后灌胃等体积清脑益元汤,持续至各个取材时间点。应用HE染色法检测大鼠神经细胞形态学变化;免疫组织化学法检测各组大鼠缺血侧脑组织切片NPY免疫阳性细胞的表达水平;Western blot法检测各组大鼠缺血侧脑组织CGRP蛋白含量,并用SPSS24.0统计软件包进行数据处理。结果:（1）神经功能缺损评分:（1）假手术组大鼠在各个时间点均无神经功能缺损表现。（2）与假手术组相比较,模型组及清脑益元组大鼠神经功能缺损评分显着增高,差异均有统计学意义（P<0.01）。（3）在相同取材时间点,清脑益元组大鼠神经功能缺损症状与模型组大鼠相比较,均有不同程度的改善,差异有统计学意义（P<0.01）。（2）HE染色:（1）空白组、假手术组:脑组织无水肿,细胞排列整齐,形态结构基本正常。（2）模型组:大鼠神经元皱缩变形,呈三角形松散排列,大范围散在坏死的红色神经元,大部分神经元变性、坏死,细胞周围间隙增大,细胞胞体变形缩小,细胞核固缩浓染,炎性细胞浸润、坏死,细胞溶解消失或见少量固核残留。（3）清脑益元汤组:给予药物后,脑组织梗死区可见少量神经元坏死、核固缩浓染等病理特征,较模型组有显着改善,皮质区域的神经元细胞排列紧密,呈类球形,细胞排列趋于正常,偶见部分细胞变形。表明清脑益元汤能够促使神经元细胞修复,或具有使神经细胞再生,修复神经损伤的作用。（3）免疫组化法检测NPY:（1）在各个取材时间点,空白组及假手术大鼠脑组织中观察到少量NPY免疫阳性细胞表达,同时间点两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。（2）在同一时间点,与假手术组比较,模型组和清脑益元汤组大鼠NPY阳性细胞数明显增多,差异具有统计学意义（P<0.01）。（3）在同一时间点,与模型组相比,清脑益元汤组NPY免疫阳性细胞数明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）。（4）Western blot法检测CGRP:（1）CGRP在空白组和假手术组的脑组织中均有少量表达,两者比较,差异无统计学意义（P>0.05）。（2）在同一时间点,与假手术组相比,模型组和清脑益元汤组CGRP蛋白表达均升高（P<0.01）,差异有统计学意义。（3）与模型组相比,清脑益元汤组大鼠脑组织内的CGRP蛋白相对表达量明显高于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论:清脑益元汤可改善大鼠脑缺血组织的损伤,其作用机制可能与其减少脑缺血损伤后NPY阳性细胞数、增加CGRP蛋白表达,进而调控脑血管的舒缩状态,改善缺血区域的脑血流有关。
高胤桐[7]（2020）在《头穴丛刺预处理对急性脑缺血大鼠神经功能及脑组织MAG表达的影响》文中研究指明目的观察头穴丛刺法预处理及头穴丛刺法对MCAO大鼠不同时间窗神经功能及MAG蛋白表达的影响,从行为学及蛋白角度分析头穴丛刺法及头穴丛刺预处理防治急性脑梗死的可能机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组（A组）、模型组（B组）、头穴丛刺法组（C组）、头穴丛刺预处理组（D组）,每组18只,各组再按取材时间窗分为24h、3d、7d三个亚组,每个亚组6只。其中B组、C组、D组采用改良线栓法对SD大鼠进行大脑中动脉梗阻模型制备,对A组SD大鼠进行假手术。C组在造模后至取材前采用头穴丛刺法进行干预,D组在造模前7天进行头穴丛刺法预处理干预,A组、B组不予手术外治疗性干预。各组大鼠分别于术后4h以及24h、3d、7d取材前,进行Zea-Longa神经功能评分;随后分别在24h、3d、7d三个时间窗对大鼠梗死半球海马组织进行取材并利用Western blot技术对取材部分MAG蛋白含量进行检测分析,从而观察头穴丛刺法预处理及头穴丛刺法对MCAO大鼠不同时间窗神经功能评分及海马组织中MAG蛋白表达的影响,探讨头穴丛刺法防治脑缺血可能的机制。结果1.神经功能评分组间比较:对各组大鼠在术后4h,进行第一次Zea-Longa神经功能评分:与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）、头穴丛刺法组（C组）、头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分均显着升高,差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组（B组）相比较,头穴丛刺法组（C组）神经功能评分无明显差异（P>0.05）;头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分显着降低,差异具有统计学意义（P<0.01）。与头穴丛刺法组（C组）相比较,头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分显着降低,差异具有统计学意义（P<0.01）。对各组大鼠在24h、3d、7d时间窗取材前,进行第二次Zea-Longa神经功能评分:（1）24h、3d、7d时间窗中:与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）、头穴丛刺法组（C组）、头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分均显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。（2）24h时间窗中:与模型组（B组）相比较,头穴丛刺法组（C组）神经功能评分无明显差异（P>0.05）;头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。与头穴丛刺法组（C组）相比较,头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分差异无统计学意义（P>0.05）。（3）3d时间窗中:与模型组（B组）相比较,头穴丛刺法组（C组）、头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分差异均无统计学意义（P>0.05）。与头穴丛刺法组（C组）相比较,头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分差异无统计学意义（P>0.05）。（4）7d时间窗中:与模型组（B组）相比较,头穴丛刺法组（C组）神经功能评分显着降低,差异具有统计学意义（P<0.01）;头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分差异无统计学意义（P>0.05）。与头穴丛刺法组（C组）相比较,头穴丛刺预处理组（D组）神经功能评分差异无统计学意义（P>0.05）。组内比较:头穴丛刺法组（C组）中:与24h时间窗相比较,3d、7d时间窗神经功能评分差异均无统计学意义（P>0.05）。头穴丛刺预处理组（D组）中:与24h时间窗相比较,3d、7d时间窗神经功能评分差异均无统计学意义（P>0.05）。2.MAG蛋白的表达组间比较:（1）在24h时间窗:与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）MAG蛋白表达水平上升,差异具有统计学意义（P<0.05）;头穴丛刺法组（C组）MAG蛋白表达水平显着上升,差异具有统计学意义（P<0.01）;头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平无明显差异（P>0.05）。与模型组（B组）相比较,头穴丛刺法组（C组）MAG蛋白表达水平无明显差异（P>0.05）;头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。与头穴丛刺法组（C组）相比较,头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平显着下降,差异具有统计学意义（P<0.01）。（2）在3d时间窗:与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）MAG蛋白表达水平上升,差异具有统计学意义（P<0.05）;头穴丛刺法组（C组）、头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平差异均无统计学意义（P>0.05）。与模型组（B组）相比较,头穴丛刺法组（C组）、头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平差异均无统计学意义（P>0.05）。与头穴丛刺法组（C组）相比较,头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平无明显差异（P>0.05）。（3）在7d时间窗:与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）MAG蛋白表达水平上升,差异具有统计学意义（P<0.05）;头穴丛刺法组（C组）、头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平差异均无统计学意义（P>0.05）。与模型组（B组）相比较,头穴丛刺法组（C组）MAG蛋白表达水平下降,差异具有统计学意义（P<0.05）;头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。与头穴丛刺法组（C组）相比较,头穴丛刺预处理组（D组）MAG蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。组内比较:头穴丛刺法组（C组）3d时间窗与24h时间窗相比较,MAG蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;7d时间窗与24h时间窗相比较,MAG蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;7d时间窗与3d时间窗相比较,MAG蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。其余各组MAG蛋白表达水平在各时间窗差异均无统计学意义（P>0.05）。结论1.头穴丛刺可显着降低MCAO大鼠神经功能评分,促进神经功能恢复,改善大鼠运动障碍。2.头穴丛刺预处理可抑制MCAO大鼠神经功能评分的升高,降低神经功能损伤,发挥预防保护作用。3.脑缺血后MAG蛋白表达明显上升,头穴丛刺干预可下调MAG蛋白的表达,从而促进轴突再生,促进神经功能的恢复。4.头穴丛刺预处理可下调脑缺血早期MAG蛋白的表达,提高缺血耐受能力,减轻神经损伤。
李苗苗[8]（2020）在《头穴丛刺法对急性局灶性脑缺血大鼠海马组织中MBP表达的影响》文中研究说明目的观察头穴丛刺法对急性局灶性脑缺血大鼠不同时间窗（24h、3d、7d）神经功能评分及髓鞘碱性蛋白（MBP）表达的影响,拟从蛋白水平探讨头穴丛刺法对保护急性脑缺血大鼠神经功能的可能作用机制。方法将72只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组（A组）、模型组（B组）、针刺组（C组）、针刺预处理组（D组）,每组各18只。每个组又根据不同时间窗分为24h组、3d组、7d组3个亚组,每个亚组6只。B组、C组、D组采用改良线栓法对大鼠进行大脑中动脉闭塞（MCAO）模型制备,A组进行假手术模型制备。C组大鼠在MCAO术后用头穴丛刺法按照24h、3d、7d不同时间窗进行干预。D组大鼠在MCAO术前用头穴丛刺法连续干预7天。A组、B组不进行治疗干预。在大鼠醒后4h及24h、3d、7d各个不同时间窗采用Bederson神经功能评分法对各组大鼠进行术后评分。在大鼠海马组织取材后,采用Western-blot法检测各组大鼠海马组织中髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达情况。结果1.神经功能评分组间比较:大鼠造模后4h各组神经功能评分比较,显示模型组（B组）、针刺组（C组）、针刺预处理组（D组）与假手术组（A组）相比较,差异有统计学意义（P<0.05）;针刺组（C组）与模型组（B组）相比较,差异无统计学意义（P>0.05）;针刺预处理组（D组）与模型组（B组）相比较,神经功能评分降低,差异有统计学意义（P<0.05）。术后24h取材前,与模型组（B组）相比较,针刺组（C组）神经功能评分无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）,针刺预处理组（D组）神经功能评分下降,差异有统计学意义（P<0.05）;术后3d取材前,与模型组（B组）相比较,针刺组（C组）、针刺预处理组（D组）神经功能评分无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;术后7d取材前,与模型组（B组）相比较,针刺组（C组）神经功能评分下降,差异有统计学意义（P<0.05）,针刺预处理组（D组）神经功能评分无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）。模型组（B组）、针刺组（C组）、针刺预处理组（D组）与假手术组（A组）相比较,在24h、3d、7d各时间窗差异均有统计学意义（P<0.05）。组内比较:观察24h、3d、7d三个时间窗,发现针刺组（C组）随着治疗时间的增长神经功能评分有下降趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）;模型组（B组）,24h、3d、7d各时间窗神经功能评分无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;针刺预处理组（D组）,24h、3d、7d各时间窗神经功能评分无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）。2.髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达组间比较:在MCAO术后24h,与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）、针刺组（C组）MBP表达含量升高,差异有统计学意义（P<0.05）,针刺预处理组（D组）MBP表达含量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;与模型组（B组）相比较,针刺组（C组）MBP表达含量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）,针刺预处理组（D组）MBP表达含量降低,差异有统计学意义（P<0.05）。在MCAO术后3d,与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）、针刺组（C组）MBP表达含量升高,差异有统计学意义（P<0.05）,针刺预处理组（D组）MBP表达含量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;与模型组（B组）相比较,针刺组（C组）、针刺预处理组（D组）MBP表达含量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）。在MCAO术后7d,与假手术组（A组）相比较,模型组（B组）MBP表达含量升高,差异有统计学意义（P<0.05）,针刺组（C组）、针刺预处理组（D组）MBP表达含量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;与模型组（B组）相比较,针刺组（C组）MBP表达含量降低,差异有统计学意义（P<0.05）,针刺预处理组（D组）MBP表达含量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）。组内比较:观察24h、3d、7d三个时间窗,发现针刺组（C组）随着治疗时间的增长MBP表达含量有下降趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）;假手术组（A组）、模型组（B组）及针刺预处理组（D组）在24h、3d、7d三个时间窗表达含量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）。结论1.头穴丛刺法能够降低神经功能评分,对促进MCAO大鼠神经功能的恢复有积极作用,且在大鼠造模前进行头穴丛刺预处理能够在早期对神经功能起到明显的改善作用,随着时间的推移治疗作用逐渐减弱,在造模后进行头穴丛刺干预其效应随着时间的增长而逐渐加强。2.大鼠在MCAO造模术后MBP表达明显增多,经过头穴丛刺法干预能够下调MBP的表达,提示头穴丛刺法可能通过下调MBP的表达稳定髓鞘的结构,从而对脑组织起到保护的作用,且在造模前对大鼠进行头穴丛刺预处理能够在早期起到治疗作用,在造模后对大鼠进行头穴丛刺干预其针刺效应需要一定时间的积累而发挥治疗作用。
袁丽君[9]（2020）在《基于PI3K/AKt/mTOR信号通路探讨土家族麝针疗法治疗缺血性脑中风大鼠的作用机制》文中进行了进一步梳理目的:探讨PI3K/AKt/mTOR信号通路的上下游相关细胞因子、蛋白在土家族麝针疗法干预缺血性脑中风SD大鼠前后的释放量及表达水平的变化,初步揭示土家族麝针疗法治疗缺血性脑中风的作用机制,尤其是与运动功能及认知功能相关的作用环节和靶点。方法:采用改良线栓法复制缺血性脑中风SD大鼠模型,将Zea-longa评分13分的模型大鼠随机分为模型对照组、土家族麝针组和针刺对照组,另取正常SD大鼠参照改良线栓法同法手术但不行栓塞处理,作为假手术组,每组30只。土家族麝针组以自制麝针以捻针法刺激大鼠对侧头皮运动区肌层,以200r/min以上的速度快速捻针,至针刺区微微有发热感,捻针5min后留针5min,反复捻针留针3次后起针,每日1次,5天为一疗程,每疗程间休息两天,持续治疗3个疗程;针刺对照组同法同位置以普通毫针刺激,模型对照组和假手术组不给予任何处理。分别于治疗前及治疗1、2、3疗程结束后每组随机取6只大鼠,采用平衡木实验测试各组大鼠的运动功能;于2疗程治疗后每组随机选取6只大鼠,进行Morris水迷宫行为学测试检测其记忆功能;于3疗程结束后取各组大鼠脑组织做HE染色病理切片,观察脑组织病理改变情况。取治疗前及治疗3疗程后各组大鼠血浆,用ELISA法检测其中IL-6、IL-1β的含量;取治疗3疗程后的大鼠脑组织固定、切片后,利用双光子激光共聚焦显微成像系统采集皮层区小胶质细胞突起的图像、采用Image J进行小胶质细胞突起进行骨架化分析,采集小胶质细胞总突起数目、突起总长度。在治疗3疗程后,取各组大鼠血浆和脑组织,采用ELISA法检测血浆中VEGF、HIF-1α的含量,Western-Blot法检测脑组织中PI3K、AKt、mTOR蛋白表达。结果:平衡木测试结果显示,治疗前,与假手术组比较,其他各造模组平衡木测试评分显着降低（P<0.05）,且造模组之间无显着性差异（P>0.05）;随着疗程增加,各造模大鼠平衡木测试评分显着增加,且在第3疗程评分土家族麝针组>针刺对照组>模型对照组（P<0.05）。水迷宫测试结果显示,治疗后,与模型对照组比较,各治疗组记忆功能具有明显差异（P<0.05）,其中土家族麝针组记忆功能更接近于假手术组。镜下观察大鼠海马区神经元结果显示,缺血性脑中风后的大鼠脑组织神经元细胞排列紊乱,数量明显减少,且结构不完整,出现大量神经元细胞坏死以及空泡现象;经过土家族麝针治疗后,脑组织神经元细胞排列基本整齐,胞膜结构完整,形态基本接近于假手术组。小胶质细胞突起结果显示,治疗后,与假手术组相比,模型对照组大鼠小胶质细胞的突起总数目和总长度均显着下降（aP<0.05）;给予土家族麝针疗法治疗后其突起总数目和突起总长度均显着增加（bP<0.05）,而针刺疗法能显着增加突起总长度（bP<0.05）,对突起总数目无显着的影响（bP>0.05）。血浆中IL-6、IL-1β含量测定结果显示,治疗前,与假手术组相比,各造模组大鼠血浆中IL-6、IL-1β的含量显着升高（aP<0.05）且无明显差异（bP>0.05,cP>0.05）。经过3个疗程治疗后,与假手术组比较,各组大鼠血浆中IL-1β、IL-6的含量均有显着降低（aP<0.05,△P<0.05）;与模型对照组比较,土家族麝针组血浆中IL-6、IL-1β的含量显着降低（P<0.05）,针刺对照组血浆中IL-6显着降低（bP<0.05）,而IL-1β的含量无显着性差异（bP>0.05）。血浆中HIF-1α、VEGF含量测定结果显示,治疗前,与假手术组相比,各造模组大鼠血浆中HIF-1α、VEGF的含量显着升高（aP<0.05）。经过3个疗程治疗后,模型对照组大鼠血浆中HIF-1α、VEGF的含量升高（△P<0.05）;与模型对照组比较,土家族麝针组以及针刺对照组血浆中HIF-1α、VEGF的含量均显着升高（△P<0.05,b P<0.05）。脑组织中PI3K、AKt、mTOR蛋白表达结果显示,治疗前,与假手术组比较,其余各组海马组织中PI3K蛋白表达显着降低（aP<0.05）,AKt蛋白表达显着降低（aP<0.05）,mTOR蛋白表达显着升高（aP<0.05）;随着疗程的增加,与模型对照组比较,土家族麝针组大鼠海马组织中PI3K蛋白表达呈逐渐升高趋势（bP<0.05,▲P<0.05,△P<0.05,●P<0.05）,AKt蛋白表达呈逐渐升高趋势（bP<0.05,▲P<0.05,△P<0.05,●P<0.05）,mTOR蛋白表达在治疗1、2疗程后变化不明显（bP<0.05,▲P>0.05,△P>0.05）,但在治疗3疗程后有下降的趋势（●P<0.05）。结论:缺血性中风发生后,大鼠出现明显的运动功能降低、记忆认知能力显着下降的现象,其发生可能与缺血缺氧导致血浆中IL-6、IL-1β、VEGF、HIF-1α的含量增加,海马组织中PI3K、AKt蛋白的表达降低,mTOR蛋白表达增加引起的脑组织神经元坏死有关。土家族麝针疗法对缺血性脑中风大鼠的运动功能和记忆认知能力具有显着的改善作用,其“活血化瘀生新”的作用机制可能与降低促炎细胞因子IL-6、IL-1β的含量;并激活PI3K/AKt/mTOR信号通路,增加血浆中VEGF、HIF-1α的含量,促进新生血管形成;调节MCAO大鼠细胞内分子开关,减少小胶质细胞向M1型转化,进而降低神经毒性,改善脑组织炎症反应,从而促进缺血性脑中风的恢复有关。
陈浩[10]（2020）在《针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血脑组织内PRG5、RhoA表达的影响》文中研究指明目的:本论文通过制备大脑中动脉阻塞再灌注损伤模型（MCAO）大鼠,采用电针针刺其百会穴、印堂穴、双侧足三里穴,明确电针具有促进PRG5蛋白表达,抑制Rho A蛋白表达,从而减轻神经功能的损伤,并对神经功能有修复作用,为临床运用电针治疗脑缺血提供新的基础理论依据。材料与方法:健康雄性SD大鼠30只,10-12周龄,体重300±40g,适应性喂养一周后,开始实验。随机数字表法分为假手术组和模型复制组,其中假手术组6只,模型复制组24只。参照Zea Longa线栓法,并加以改良,进行模型复制,制备大脑中动脉栓塞再灌注损伤模型大鼠,其中假手术组只剥离动脉,不进行栓塞。造模后按照Longa评分标准对大鼠进行神经功缺损能评分（剔除死亡及0分、4分大鼠）,把造模成功的模型复制组大鼠随机分为对照组和电针组。电针组大鼠选取百会穴、印堂穴、双侧足三里穴进行电针干预,对照组以及假手术组只作同等时间的捆绑束缚,不电针。每次10min,每24h一次,连续2周。干预结束后,再一次对大鼠进行神经功能评分,评分结束后,进行胶粘剂去除实验。最后,将所有大鼠处死,取出脑组织,采用免疫印迹法、免疫组化法、免疫荧光法对大鼠缺血脑组织中的PRG5及Rho A蛋白表达情况进行检测。采用SPSS19.0软件进行统计学分析。结果:1.神经功能评分:造模之后,假手术组神经功能评分为0分,没有出现神经功能损伤;模型复制组神经功能评分明显高于假手术组,有统计学意义（P<0.01）,出现神经功能损伤,造模成功。经过2周干预之后,与假手术组相比,电针组神经功能评分显着高于假手术组,有统计学意义（P<0.01）;与对照相比,电针组神经功能评分显着低于对照组,有统计学意义（P<0.01）。2.胶粘剂去除实验:在进行电针干预2周之后,胶粘剂去除实验结果显示,与假手术组相比,电针组所花费时间显着长于假手术组,有统计学意义（P<0.01）;与对照组相比,电针组所花费时间显着低于对照组,有统计学意义（P<0.01）。3.Western blot检测:与假手术组比较,电针组大鼠缺血脑组织内PRG5蛋白表达水平显着下降,Rho A蛋白表达水平显着上调（P<0.01）;与对照组比较,电针组大鼠缺血脑组织内PRG5蛋白表达水平上调,Rho A蛋白表达水平下降（P<0.01）。4.免疫组化检测:与假手术组比较,电针组大鼠缺血脑组织内PRG5阳性细胞数显着下降,Rho A阳性细胞数显着上调（P<0.01）;与对照组比较,电针组大鼠缺血脑组织内PRG5阳性细胞数显着上调,Rho A阳性细胞数显着下降（P<0.01）。5.免疫荧光检测:与假手术组比较,电针组大鼠缺血脑组织内PRG5平均光密度值显着下降,Rho A平均光密度值显着上调（P<0.01）;与对照组比较,电针组大鼠缺血脑组织内PRG5平均光密度值显着上调,Rho A平均光密度值显着下降（P<0.01）。结论:1.电针百会、印堂、足三里穴,对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损情况有明显改善,对脑缺血组织有保护作用。2.电针百会、印堂、足三里穴,可提高脑缺血再灌注大鼠的运动功能。3.电针百会、印堂、足三里穴,能提高缺血脑组织内PRG5蛋白表达,降低Rho A蛋白表达,可减轻脑中风后神经功能的损伤,并能促进神经功能的修复。
二、针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用（论文提纲范文）
（1）电针预处理调控肠道菌群与Th17/Treg免疫平衡降低大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1. 中医对缺血性中风的认识 |
| 1.1 历史沿革 |
| 1.2 病因病机 |
| 1.3 治法方药 |
| 1.3.1 清热解毒法 |
| 1.3.2 通腑化痰法 |
| 1.3.3 化瘀通络法 |
| 1.3.4 补气活血法 |
| 1.3.5 补肾扶正法 |
| 1.4 中医“治未病”思想与缺血性中风 |
| 2. 现代医学对缺血性脑卒中的认识 |
| 2.1 流行病学 |
| 2.2 病理生理机制 |
| 2.3 Th17/Treg免疫平衡与缺血性脑卒中 |
| 2.3.1 免疫炎症反应与缺血性脑卒中 |
| 2.3.2 免疫系统的细胞类型 |
| 2.3.3 Th17细胞 |
| 2.3.4 Treg细胞 |
| 2.3.5 Th17/Treg免疫平衡 |
| 2.4 肠道菌群与缺血性脑卒中 |
| 2.4.1 肠道菌群的分类及功能 |
| 2.4.2 肠道菌群与缺血性脑卒中 |
| 3. 电针预处理与缺血性脑卒中 |
| 3.1 针灸与缺血性脑卒中 |
| 3.2 预处理与缺血性脑卒中 |
| 3.3 电针预处理与脑缺血耐受 |
| 3.4 电针预处理的脑保护机制 |
| 3.4.1 调节内源性大麻素系统 |
| 3.4.2 调节自噬 |
| 3.4.3 保护血脑屏障 |
| 3.4.4 抑制氧化应激 |
| 3.4.5 抑制内质网应激 |
| 3.4.6 抑制兴奋毒性 |
| 3.4.7 抑制炎症反应 |
| 3.4.8 抑制细胞凋亡 |
| 3.5 针灸通过调控“肠道菌群-免疫反应”治疗IS的可行性 |
| 4. 脑-肠轴与IS发病的中医探讨 |
| 实验部分 |
| 实验一 电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠肠道菌群结构的影响 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 主要试剂配置方法 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 动物模型的制备与评价 |
| 2.2.1 大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型制备 |
| 2.2.2 纳入标准 |
| 2.3 干预方法 |
| 2.4 电针预处理方案 |
| 2.5 指标检测及方法 |
| 2.5.1 mNSS评估神经功能缺损程度 |
| 2.5.2 大鼠再灌注各时间点存活率 |
| 2.5.3 大鼠前肢抓握力量测试 |
| 2.5.4 TTC染色测定脑梗死体积 |
| 2.5.5 HE染色观察缺血侧皮层及结肠组织病理损伤程度 |
| 2.5.6 大鼠盲肠内容物16S rDNA V3-V4区测序 |
| 2.6 统计学处理 |
| 3. 结果 |
| 3.1 激光多普勒血流监测仪监测MCAO/R大鼠缺血侧皮层的脑血流变化 |
| 3.2 各组大鼠再灌注各时间点改良神经功能缺损评分 |
| 3.3 各组大鼠再灌注各时间点前肢抓握力量 |
| 3.4 各组大鼠再灌注各时间点存活率 |
| 3.5 各组大鼠脑梗死体积 |
| 3.6 各组大鼠缺血侧皮层及结肠组织病理损伤形态 |
| 3.7 各组大鼠盲肠内容物测序数据结果 |
| 3.7.1 序列长度分布 |
| 3.7.2 物种分类学注释 |
| 3.7.3 分类单元数统计 |
| 3.7.4 物种组成分析 |
| 3.7.5 肠道菌群与mNSS评分相关性分析 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 脑缺血再灌注损伤动物模型的制备 |
| 4.2 电针预处理方案的选择 |
| 4.3 电针预处理对脑缺血/再灌注大鼠行为学的影响 |
| 4.4 电针预处理对脑缺血/再灌注大鼠脑和结肠组织病理形态的影响 |
| 4.5 电针预处理对脑缺血/再灌注大鼠肠道菌群结构的影响 |
| 实验二 电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠Th17/Treg免疫平衡的影响 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 主要试剂配置方法 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 动物模型的制备与评价 |
| 2.2.1 大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型制备 |
| 2.2.2 纳入标准 |
| 2.3 干预方法 |
| 2.4 电针预处理方案 |
| 2.5 指标检测及方法 |
| 2.5.1 免疫组化观察缺血侧皮层、结肠组织IL-17A、IL-10的表达 |
| 2.5.2 Western blotting检测脑和结肠组织中IL-17A、IL-10蛋白的表达 |
| 2.5.3 Western blotting检测脑、脾及胸腺组织RORγt、Foxp3蛋白的表达 |
| 2.5.4 Elisa测定大鼠血清IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1的含量 |
| 2.6 统计学处理 |
| 3. 结果 |
| 3.1 免疫组化检测各组大鼠缺血侧皮层、结肠组织IL-17A、IL-10蛋白表达 |
| 3.2 各组大鼠脑和结肠组织中IL-17A、IL-10蛋白表达 |
| 3.3 各组大鼠脑、脾及胸腺组织RORγt、Foxp3蛋白表达 |
| 3.4 各组大鼠血清IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1的含量 |
| 3.5 RORγt、Foxp3蛋白与mNSS评分相关性分析 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 电针预处理对MCAO/R大鼠脑和结肠组织IL-17A、IL-10蛋白表达的影响 |
| 4.2 电针预处理对MCAO/R大鼠脑、脾、胸腺组织中RORγt、Foxp蛋白表达的影响 |
| 4.3 电针预处理对MCAO/R大鼠血清IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1含量的影响 |
| 实验三 电针预处理通过肠道菌群诱导脑缺血耐受的免疫机制研究 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 主要试剂配置方法 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 动物模型的制备与评价 |
| 2.2.1 大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型制备 |
| 2.2.2 纳入标准 |
| 2.3 干预方法 |
| 2.4 菌群剔除 |
| 2.5 粪便微生物移植 |
| 2.6 指标检测及方法 |
| 2.6.1 mNSS评估大鼠神经功能缺损程度 |
| 2.6.2 大鼠前肢抓握力量测试 |
| 2.6.3 HE染色观察缺血侧皮层及结肠组织病理损伤程度 |
| 2.6.4 免疫组化观察缺血侧皮层IL-17A、IL-10的表达 |
| 2.6.5 Elisa测定大鼠血清IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1的含量 |
| 2.7 统计学处理 |
| 3. 结果 |
| 3.1 各组大鼠再灌注各时间点改良神经功能缺损评分 |
| 3.2 各组大鼠再灌注各时间点前肢抓握力量 |
| 3.3 免疫组化观察缺血侧皮层IL-17A、IL-10的表达 |
| 3.4 各组大鼠血清IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1的含量 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 菌群移植技术 |
| 4.2 菌群剔除与菌群移植对MCAO/R大鼠行为学的影响 |
| 4.3 菌群剔除与菌群移植对MCAO/R大鼠脑和结肠组织病理形态的影响 |
| 4.4 菌群剔除与菌群移植对MCAO/R大鼠脑组织IL-17A、IL-10蛋白表达的影响 |
| 4.5 菌群剔除与菌群移植对MCAO/R大鼠血清IL-17A、IL-23、IL-10、TGF-β1含量的影响 |
| 本研究的不足与展望 |
| 结论 |
| 创新点说明 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间所发表的论文 |
| 个人简历 |
（2）冰片配伍黄芪甲苷和三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤后神经血管单元保护作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文索引 |
| 前言 |
| 第一部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠行为学及病理形态学的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量确定及药物配制 |
| 1.3 试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 MCAO模型的评价 |
| 2.2 Bederson神经功能评分比较 |
| 2.3 Garcia JH神经功能评分比较 |
| 2.4 脑梗死体积的比较 |
| 2.5 脑组织病理形态的比较 |
| 3 讨论 |
| 3.1 实验模型及动物的选择 |
| 3.2 中医对缺血性脑卒中的认识及中药治疗 |
| 4 小结 |
| 第二部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经血管单元特异性结构蛋白及其结构完整性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量及浓度 |
| 1.3 实验器材、耗材、试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NeuN表达的影响 |
| 2.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Laminin表达的影响 |
| 2.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区GFAP表达的影响 |
| 2.4 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后 脑缺血皮质区EBA表 达的影响 |
| 2.5 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NVU的主要组分结构关系的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 指标选择依据 |
| 3.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Neu N、 EBA和Laminin及 GFAP表达的影响 |
| 3.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NVU主要组分的结构关系的影响 |
| 4 小结 |
| 第三部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经血管单元主要组分相关功能蛋白的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量及浓度 |
| 1.3 实验器材、耗材、试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区αII-Spectrin表达的影响 |
| 2.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区AQP-4表达的影响 |
| 2.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区VEGF表达的影响 |
| 2.4 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区MMP-9 表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 指标选择依据 |
| 3.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区αII-Spectrin、AQP-4、MMP-9及VEGF表达的影响 |
| 4 小结 |
| 第四部分 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对脑缺血/再灌注损伤大鼠损伤局部Notch信号通路的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 受试药物、剂量及浓度 |
| 1.3 实验器材、耗材、试剂及仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Notch1表达的影响 |
| 2.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区NICD表达的影响 |
| 2.3 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Hes1 表达的影响 |
| 2.4 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区DLL4 表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 指标选择依据 |
| 3.2 冰片配伍AST Ⅳ和 PNS对 CIRI后脑缺血皮质区Notchl、NICD、Hesl及 DLL4 表达的影响 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录A 个人简历 |
| 文献综述 |
| 文献综述一 基于神经血管单元的缺血性脑卒中相关信号通路研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 黄芪、三七及冰片抗脑缺血的研究进展 |
| 参考文献 |
（3）中风膏预适应对脑缺血再灌注损伤后CD34、VEGF、MMP-9的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 实验药物 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 各实验组大鼠生活状态观察 |
| 3.2 中风膏对大鼠神经功能评分的影响 |
| 3.3 中风膏对各组大鼠脑组织形态学的影响 |
| 3.4 中风膏对大鼠脑组织中CD34 蛋白浓度的影响 |
| 3.5 中风膏对大鼠脑组织中VEGF浓度的影响 |
| 3.6 中风膏对大鼠脑组织中MMP-9 浓度的影响 |
| 3.7 中风膏对大鼠脑组织中VEGFm RNA表达的影响 |
| 3.8 中风膏对大鼠脑组织中MMP-9m RNA表达的影响 |
| 4.讨论 |
| 4.1 缺血预适应保护机制研究 |
| 4.2 中药预适应现代研究 |
| 4.3 中风膏主要组成治疗中风研究 |
| 4.4 中风膏在ICVD中的应用研究 |
| 4.5 中风膏预适应对实验大鼠一般情况的影响 |
| 4.6 中风膏预适应对神经功能评分的影响 |
| 4.7 中风膏对各组大鼠脑组织形态学影响 |
| 4.8 中风膏预适应对大鼠脑组织中CD34 蛋白、VEGF?MMP-9 含量及基因表达的影响 |
| 4.8.1 中风膏对CD34 蛋白的影响 |
| 4.8.2 中风膏对血管内皮生长因子的影响 |
| 4.8.3 中风膏对基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响 |
| 5.结语 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 体会与不足 |
| 参考文献 |
| 文献综述 短暂性脑缺血发作中西医治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在校期间主要研究成果 |
| 附录1 医学实验动物合格证书 |
| 附录2 实验动物设施使用证明 |
| 附件 |
（4）电针调控miR-210-3p经AKT/mTOR信号通路对局灶性脑缺血大鼠血管新生的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要仪器设备 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 局灶性MCAO模型制备 |
| 1.2.2 模型成功标准 |
| 1.2.3 模型剔除标准 |
| 1.2.4 动物分组 |
| 1.2.5 干预方法 |
| 1.2.6 实验观察指标与方法 |
| 1.3 统计学分析方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 各组大鼠神经功能缺损体征评分 |
| 2.2 各组大鼠局部脑血流量(rCBF)变化 |
| 2.3 脑组织病理学观察(HE染色) |
| 2.4 Western Blot检测AKT/p-AKT/mTOR/p-mTOR蛋白表达 |
| 2.5 RT-qPCR检测miR-210-3p/Ephrin A3及AKT/mTORmRNA表达 |
| 2.5.1 miR-210-3p的表达 |
| 2.5.2 Ephrin A3 的表达 |
| 2.5.3 AKT mRNA的表达 |
| 2.5.4 mTORmRNA的表达 |
| 2.6 微血管密度(MVD)测定 |
| 2.7 miR-210-3p与 MVD的相关性 |
| 3 讨论 |
| 3.1 实验模型建立方法及动物选择 |
| 3.2 中医学对中风的认识 |
| 3.2.1 中风的病因病机 |
| 3.2.2 针刺治则治法与选穴 |
| 3.3 血管新生与缺血性脑卒中 |
| 3.3.1 神经血管单元与缺血性脑卒中 |
| 3.3.2 AKT/mTOR信号通路与缺血性脑卒中后血管新生 |
| 3.3.3 microRNA与血管新生 |
| 3.3.4 血管新生的标志物 |
| 3.4 电针刺激对血管新生干预作用的分析 |
| 3.4.1 对实验结果的进一步分析 |
| 3.4.2 血管新生在缺血性脑卒中恢复中的意义 |
| 3.5 问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 电针对 MCAO 大鼠脑保护作用机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 现代医学对脑卒中的认识 |
| 2 祖国医学对脑卒中的认识 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1.实验材料和方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 针刺对各组大鼠自主行动的影响 |
| 2.2 针刺对各组大鼠神经功能评分的影响 |
| 2.3 针刺对各组大鼠脑梗死面积的影响 |
| 2.4 针刺对各组大鼠脑组织形态的影响 |
| 2.5 针刺对各组大鼠血清中FAS,FASL含量的影响 |
| 2.6 针刺对各组大鼠大脑皮质凋亡细胞的影响 |
| 2.7 针刺对各组大鼠大脑皮质中caspase-9,caspase-3 的表达影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 实验动物和造模方法的选择 |
| 3.2 脑缺血再灌注模型制备成功的评价 |
| 3.3 改良制备脑缺血再灌注模型大鼠的方法和经验 |
| 3.4 干预方法和穴位的选择 |
| 3.5 针刺对脑缺血再灌注模型大鼠细胞凋亡的影响 |
| 4.结论 |
| 参考文献 |
| 综述 针刺治疗脑卒中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介 |
（6）清脑益元汤对局灶性脑缺血损伤大鼠NPY、CGRP表达水平的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物及饲养条件 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 实验动物饲养条件 |
| 1.2 实验动物药物及给药方法 |
| 1.3 实验主要试剂、仪器及器材 |
| 1.3.1 主要试剂 |
| 1.3.2 主要液体及配制方法 |
| 1.3.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验动物分组及处理 |
| 2.2 实验模型建立 |
| 2.2.1 麻醉固定 |
| 2.2.2 分离血管 |
| 2.2.3 线栓的制备 |
| 2.2.4 插线与结扎 |
| 2.2.5 缝合与消毒 |
| 2.3 实验模型成功评定标准 |
| 2.4 实验动物取材 |
| 2.5 指标检测 |
| 2.5.1 制备脑组织石蜡切片 |
| 2.5.2 HE染色法检测神经细胞形态学变化 |
| 2.5.3 免疫组化法检测脑组织NPY蛋白含量 |
| 2.5.4 Western blot检测脑组织的CGRP蛋白含量 |
| 2.5.5 统计处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 实验动物脑缺血损伤后的表现 |
| 3.2 神经功能缺损评分结果 |
| 3.3 HE染色评估脑组织形态学改变 |
| 3.4 免疫组化法测脑组织NPY蛋白阳性细胞表达 |
| 3.5 Western blot法测脑组织的CGRP蛋白含量 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中医学对中风的认识 |
| 4.1.1 中风病名之源流 |
| 4.1.2 中风病因病机之探究 |
| 4.2 现代医学对缺血性脑卒中的阐释概要 |
| 4.2.1 缺血性脑卒中的发病机制 |
| 4.2.2 缺血性脑卒中的治疗进展 |
| 4.3 清脑益元汤防治缺血性脑卒中的机理及策略 |
| 4.3.1 探究痰瘀交阻,热毒内生,肾虚髓亏病机理论 |
| 4.3.2 谨守病机,清补兼施 |
| 4.3.3 清脑益元汤组方析义 |
| 4.4 局灶性脑缺血大鼠脑组织中NPY、CGRP肽类的表达 |
| 4.4.1 NPY与局灶性脑缺血的关系 |
| 4.4.2 CGRP与局灶性脑缺血的关联 |
| 4.4.3 NPY与 CGRP间的相互联系 |
| 4.5 清脑益元汤对NPY、CGRP肽类的影响 |
| 4.5.1 清脑益元汤对NPY表达的影响 |
| 4.5.2 清脑益元汤对CGRP蛋白表达的影响 |
| 4.5.3 清脑益元汤对NPY和 CGRP的综合调节效应 |
| 4.6 实验方法分析 |
| 4.6.1 动物的选择 |
| 4.6.2 造模方案的选择 |
| 5 存在的问题和展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 主要缩略词表 |
| 综述 基于内质网应激-自噬途径探究脑缺血再灌注损伤及中医药防治进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（7）头穴丛刺预处理对急性脑缺血大鼠神经功能及脑组织MAG表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 缺血性卒中针灸预处理研究现状 |
| 1. 脑缺血性疾病针灸预处理的理论基础 |
| 2. 针刺预处理对脑缺血性疾病的保护机制 |
| 3. 针刺预处理时间的设定与穴位的选择 |
| 4. 针刺预处理的研究价值 |
| 综述二 髓磷脂相关糖蛋白的功能机制及其在脑缺血疾病中的表达规律 |
| 1. 轴突再生抑制蛋白 |
| 2. MAG蛋白的生理结构及在中枢神经系统疾病中的功能机制 |
| 3. MAG蛋白在脑缺血性疾病中的表达规律 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1. 实验材料及方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 头穴丛刺法对MCAO术后大鼠神经功能评分的影响 |
| 2.2 头穴丛刺法对MCAO大鼠脑组织MAG蛋白表达的影响 |
| 3. 讨论部分 |
| 3.1 中医对缺血性中风的认识 |
| 3.2 实验针刺方法——于氏头穴丛刺法 |
| 3.3 头穴丛刺法预处理及头穴丛刺法对MCAO大鼠神经功能评分影响 |
| 3.4 头穴丛刺法预处理及头穴丛刺法对MCAO大鼠脑组织MAG蛋白表达的影响 |
| 3.5 头穴丛刺预处理临床可行研究方案探讨 |
| 4. 本实验的创新 |
| 5. 本实验的不足与展望 |
| 6. 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
| 附录一: 蛋白样品制备及Western blot检测 |
| 附录二: Western blot附图 |
（8）头穴丛刺法对急性局灶性脑缺血大鼠海马组织中MBP表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 头穴丛刺法的历史溯源及研究进展 |
| 1. 头针的经络腧穴理论依据 |
| 2. 头穴丛刺法(于氏头针)的提出及简介 |
| 3. 头穴丛刺法(于氏头针)的临床研究进展 |
| 4. 头穴丛刺法(于氏头针)治疗缺血性脑卒中的现代作用机制 |
| 综述二 缺血性脑卒中的研究现状 |
| 1. 缺血性脑卒中的概述 |
| 2. 缺血性脑卒中与髓鞘碱性蛋白 |
| 3. 缺血性脑卒中发生的危险因素 |
| 4. 缺血性脑卒中的西医治疗现状 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1. 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 头穴丛刺法对MCAO术后大鼠神经功能评分的影响 |
| 2.2 头穴丛刺法对MCAO术后大鼠MBP表达的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 干预手段——头穴丛刺法 |
| 3.2 针刺时机——预处理 |
| 3.3 行为学评价——Bederson神经功能评分 |
| 3.4 目标蛋白——髓鞘碱性蛋白(MBP) |
| 3.5 MCAO模型制备的选择 |
| 3.6 MCAO模型制备注意事项 |
| 3.7 创新与不足 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 主要研究成果 |
| 个人简历 |
（9）基于PI3K/AKt/mTOR信号通路探讨土家族麝针疗法治疗缺血性脑中风大鼠的作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 主要研究内容 |
| 第一节 土家族麝针疗法干预MCAO大鼠的疗效研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第二节 土家族麝针疗法对MCAO大鼠小胶质细胞及其胞内分子开关的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第三节 土家族麝针疗法对MCAO大鼠血浆中HIF-1α、VEGF和脑组织中PI3K/AKt/mTOR蛋白表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 土家族麝针疗法“活血化瘀生新”治疗缺血性脑中风的研究进展 |
| 1 中医对缺血性脑中风的认识 |
| 2 西医对缺血性脑中风的研究 |
| 3 PI3K/AKt/mTOR信号通路与缺血性脑中风 |
| 4 土家族麝针疗法的研究现状 |
| 5 总结 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果、参加学术会议及获奖 |
| 致谢 |
（10）针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血脑组织内PRG5、RhoA表达的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 针灸治疗缺血性脑血管病及其作用机制的研究 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在校期间科研成绩 |
| 致谢 |
四、针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用（论文参考文献）
- [1]电针预处理调控肠道菌群与Th17/Treg免疫平衡降低大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制研究[D]. 张继瑶. 黑龙江中医药大学, 2021(01)
- [2]冰片配伍黄芪甲苷和三七总皂苷对脑缺血/再灌注损伤后神经血管单元保护作用的研究[D]. 欧阳波. 湖南中医药大学, 2021(02)
- [3]中风膏预适应对脑缺血再灌注损伤后CD34、VEGF、MMP-9的影响研究[D]. 侯慧敏. 甘肃中医药大学, 2021(01)
- [4]电针调控miR-210-3p经AKT/mTOR信号通路对局灶性脑缺血大鼠血管新生的影响[D]. 高云云. 安徽中医药大学, 2021(01)
- [5]针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞凋亡的影响[D]. 贺琳. 江西中医药大学, 2020
- [6]清脑益元汤对局灶性脑缺血损伤大鼠NPY、CGRP表达水平的影响[D]. 向昱臻. 广西中医药大学, 2020(02)
- [7]头穴丛刺预处理对急性脑缺血大鼠神经功能及脑组织MAG表达的影响[D]. 高胤桐. 北京中医药大学, 2020(04)
- [8]头穴丛刺法对急性局灶性脑缺血大鼠海马组织中MBP表达的影响[D]. 李苗苗. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]基于PI3K/AKt/mTOR信号通路探讨土家族麝针疗法治疗缺血性脑中风大鼠的作用机制[D]. 袁丽君. 湖北民族大学, 2020(12)
- [10]针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血脑组织内PRG5、RhoA表达的影响[D]. 陈浩. 辽宁中医药大学, 2020(02)