一、喹诺酮类药物的合理应用及其相关分析（论文文献综述）
夏珂[1]（2020）在《多色荧光和拉曼光谱双模式传感技术在检测结核分枝杆菌耐药基因中的应用研究》文中研究说明研究背景:结核病是一种发病率较高、传染性较强的呼吸道传播类疾病,是由结核分枝杆菌感染人体各个器官引起的,当其侵入肺部时成为肺结核。耐药结核病是由耐药性结核分枝杆菌引起的疾病,这种结核杆菌感染机体后,对治疗结核类药物如异烟肼（Isoniazid,INH）、利福平（Rifampicin,RIF）、链霉素（Streptomycin,SM）、乙胺丁醇（Ethambutol,EMB）等产生耐药性。不规范、错误使用药物,或使用不正规的劣质药物都可能引起耐药菌的出现。研究发现,利福平、异烟肼、链霉素等药物作用位点的基因突变与结核分枝杆菌耐药性的产生密切相关,因此早期开展耐药基因检测对于指导临床个体化精准用药和提高治愈率至关重要。传统的耐药性结核病的检测需要涂片、培养、药敏鉴定等,耗时较长。近年来,恒温扩增技术如滚环扩增（Rolling Circle Amplification,RCA）、链置换扩增（Strand Displacement Amplification,SDA）等不断发展,该类方法操作简单、不需要特殊仪器、检测灵敏度高、多重分析能力强。其中,RCA是在恒温下对环状的DNA模板进行循环扩增得到长链核酸的过程,可避免传统扩增循环过程对实验设备要求。RCA扩增模板为锁式探针（Padlock Probes,PLPs）,其环化时所需的连接酶在恒温条件下反应时能较为敏感地识别单碱基突变。RCA在单条引物参与时的恒温条件下可短时间内扩增出大量与环状模板互补的串联重复核苷酸长链。而目标靶序列仅参与PLP环化模板的形成,可避免扩增反应带来的潜在污染。分子诊断的发展需要创新型工具来同时量化复杂介质中的多个生物靶点,因此,本研究提出了基于滚环扩增和多色荧光的传感技术用于结核分枝杆菌耐药基因多重检测的策略。通常情况下,核酸扩增产物采用凝胶电泳法检测,然而,这种技术耗时,也无法产生可量化的数据。目前,基于吸光度、表面增强拉曼光谱（Surface-enhanced Raman Spectroscopy,SERS）和荧光光谱等研究的光学生物传感平台受到了广泛地关注。所以,在RCA结束时引入相应的荧光探针,对扩增产物特异性地进行识别捕获后,通过对反应体系中相对荧光强度的实时监测和测量,即可实现对体系中的多种耐药突变基因的快速、简便、高灵敏及多重耐药检测。利用这种原理,我们构建了基于等温扩增的、灵敏的、具有选择性的多重检测平台,并将其运用于结核杆菌耐药相关基因突变位点的检测。由于荧光检测方法自身的技术缺陷,对较低浓度的目标物进行检测时,背景信号的吸收容易造成假阳性结果,且检测所需样本体积量大。所以,要实现更便捷和更高灵敏度的检测,需要寻找其他技术。目前,表面增强拉曼光谱（SERS）由于其灵敏度高、检查样品体积小和具有特异的信号等优点已被广泛运用于多种生物分子的检测。拉曼光谱检测范围在200 cm-1至4000 cm-1,可表征光子与分子相互作用产生的分子振动和转动能级差,不同物质拉曼位移不同。SERS技术将待测分子吸附于粗糙的纳米金属材料表面以增强待测物的拉曼散射强度。包括无标记检测和标记染料检测两种方法。将RCA技术与SERS检测方法相结合,可进一步增强拉曼信号。因此,本研究又联合了滚环扩增与表面增强拉曼光谱技术,构建了基于RCA的SERS检测方法,用于结核分枝杆菌耐药位点的精准定量分析。研究目的与意义:本研究旨在构建基于核酸等温扩增的简单快速、超灵敏的生物传感平台,并将其运用于结核杆菌耐药相关基因的多重检测。恒温型扩增方法改变了普通检测方法对PCR的依赖,为耐药结核的临床快速诊断提供了新方法,从而避免抗结核类抗生素早期的滥用。进一步使得基于RCA的荧光和SERS传感技术成为基因疾病早期诊断的有效方法,也为耐药基因突变位点的单管多重检测研究提供了全新的研究思路与发展前景。方法:1.对Genbank中检索到的结核分枝杆菌标准菌株全基因组（Mycobacterium Tuberculosis H37Rv,Gen Bank Accession No:NC＿000962）进行同源性比较和特异性分析,筛选高频突变的耐药位点及耐药决定区域序列。2.根据突变靶点的位置设计包含磷酸基团、引物结合区、酶切位点作用区的锁式探针PLP,引物和捕获探针。3.利用生物素和链霉亲和素的共价偶联作用,以磁珠作为扩增载体构建固相反应体系。分别探讨BSA浓度、d NTP浓度、DMSO浓度、Phi 29 DNA polymerase浓度、扩增温度、扩增时间和野生型模板与突变型模板浓度比（靶序列的突变率）对扩增体系的影响,确定最佳反应条件。4.筛选用于多重检测的荧光基团并将其修饰到检测探针上,将该类探针与RCA产物结合,使用对应的荧光激发和发射波长来检测杂交产物,观察信号响应结果。5.合成纳米材料,包括金银纳米核壳（Au NR@Ag）复合材料、金纳米颗粒（Au NPs）和银纳米颗粒（Ag NPs）。并对3种纳米材料及其与DNA结合前后的物质进行表征,包括紫外-可见光（UV-Vis）、透射电镜（TEM）、粒径分析。6.利用拉曼标签分子对3种SERS增强纳米材料进行综合评价,包括最适激发光波长、增强效果等,验证不同纳米材料检测DNA的SERS效应,筛选最适的增强纳米颗粒。7.构建基于RCA的SERS检测方法,并对其检测性能进行评价,包括特异性、灵敏度、稳定性等。研究结果:1.确定了3种临床常用的抗结核药物的耐药基因及其主要突变位点:对异烟肼耐药的Kat G315突变位点,对利福平耐药的rpo B531突变位点,对链霉素耐药的rps L43突变位点。通过对临床标本中分离的利福平、异烟肼、链霉素耐药的结核菌的耐药特征进行分析,提取DNA后进行PCR扩增,得到耐药相关基因rpo B基因、kat G基因和rps L基因的主要耐药决定区域,并通过T-A克隆构建了相关质粒。2.根据各突变位点设计RCA反应所需要的模板、锁式探针（PLP）、引物（Primer）。了解了PLP识别探针的设计原则、引物的设计位置和检测探针的设计方法。3.根据生物配体的共价偶联作用,完成了生物素引物与链霉亲和素修饰磁珠的交联,利用磁珠颗粒形成了固相反应体系。构建了在液相环境下合成环状PLP模板,在固相（磁珠）表面进行扩增反应的RCA体系,并对RCA体系的反应条件进行了优化。其最适反应条件为温度37℃、BSA 0.1μg/μL,DMSO 5%,Phi 29DNA聚合酶1 U/μL,d NTP 1 m M,反应时间15 min。4.建立了基于RCA的荧光检测方法,筛选Cy5、Cy3、ROX作为特征染料来修饰检测探针。扩增产物与检测探针混合后,带有荧光的探针可与RCA产物上每一个重复序列上的一小段检测序列杂交。因此,在相应激发波（643 nm、552 nm、585 nm）和发射波（667 nm、570 nm、605 nm）的激发作用下,产物会有对应的特征信号响应。例如,当3种靶序列同时存在时,Cy5、Cy3和ROX的荧光信号均可被扫描到。以此来鉴定扩增体系是否发生单碱基突变或发生了何种突变,继而进行耐药性分析。5.将构建的基于RCA的荧光检测平台运用于结核杆菌耐药相关基因,可对发生单碱基突变的结核杆菌单独检测,也可以直接在2-3 h内同时检测10-12M水平的3种耐药突变型结核分枝杆菌靶序列。6.成功将DNA与3种纳米粒子（Au NPs,Ag NPs,Au NR@Ag）偶联起来,并进行UV-Vis、TEM、和粒径分析的表征,完成了SERS纳米标签探针的构建。7.利用拉曼标签分子Cy5对3种SERS增强纳米材料进行评价。最终确定了Au NR@Ag为最合适的SERS增强纳米材料,最适检测激光为785 nm。并选取1408cm-1处的特征峰来做进一步的实验。8.成功构建了基于RCA的SERS检测平台,并对Kat G315基因进行了检测。发现该方法对单碱基突变具有检测特异性,并可以检测到浓度为10-14M的目标物。研究结论:1.本研究设计特殊的PLP探针来识别不同的结核分枝杆菌耐药突变位点,以成环后的该探针作为模板进行滚环扩增可得到许多相同序列串联在一起的长链核酸产物。2.构建的基于滚环扩增的恒温扩增体系结合光学传感技术,建立一种核酸检测方法,从基因层面更加深入地分析不同耐药突变型目标物,为在临床实际的检测工作提供研究基础。3.构建的基于RCA的荧光检测平台可在短时间内对3种临床常见的结核耐药突变基因进行特异性多重检测。4.构建的基于RCA的SERS传感检测平台可进一步提高检测的灵敏度。
王兵兵[2]（2020）在《熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌的分离鉴定及部分生物学特性研究》文中研究指明熊蜂（Bumblebee）属于最为常见的蜂类昆虫,因其具有摄取植物花蜜和花粉的特点,而被广泛应用于野生植物（濒危植物）和农作物传粉,特别是在温室里的果菜类（例如茄科、豆科等）授粉效果最佳。运用于温室授粉的商业化熊蜂比野生性熊蜂更加容易受到病原物的感染和致病,致病病原有细菌、病毒、外部寄生螨、原生动物（微孢子虫）等,其中凝固酶阴性葡萄球菌（Coagulase-negative Staphylococci,CNS）就属于熊蜂的细菌性病原之一。CNS属于人畜共患条件致病菌,可引起人类心内膜炎、败血症和血液感染等疾病;也会引起奶牛的乳腺炎等。CNS还能产生各种致病因子,如脂肪酶,脱氧核糖核酸酶和肠毒素等,对人和动物均会造成一定的损害,常用其保守基因hsp60、gap、sod A、tuf和rpo B等对CNS进行种属的鉴定。本研究从新疆某养蜂场病死熊蜂幼虫无菌采取病料,对其进行了细菌的分离、生化鉴定、16S r RNA鉴定、gap基因生物学分析、溶血性测定、小鼠致病性试验和药物敏感性测定。主要研究工作内容和结果如下:1.熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌的分离鉴定:为了分离导致熊蜂幼虫变黄、发黑、死亡的病原,从新疆石河子某养蜂场生病的熊蜂幼虫中无菌采集样本,对其进行细菌分离鉴定、生化鉴定、16s r RNA测序鉴定等研究。结果显示,分离获得1株革兰氏阳性球菌,经生化鉴定及16s r RNA测序初步确定了导致熊蜂幼蜂发病的病原为缓慢葡萄球菌,属于CNS。2.熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌gap基因的生物信息学分析:本研究以分离的缓慢葡萄球菌SHZXF1株为材料,对gap基因片段进行扩增、克隆、测序,分析其部分生物信息学特性。结果显示分离株gap基因序列933bp,共编码311个氨基酸;生物信息学分析显示,SHZXF1株与缓慢葡萄球菌（S.lentus）的核苷酸同源性为99.9%,且类聚同一分支;gap蛋白为亲水性蛋白,分子质量为33.59 k Da,理论等电点为4.77;该蛋白无跨膜区,无信号肽,属于非分泌型蛋白。25个潜在的磷酸化位点和1个糖基化位点,其二级结构是混合型,其中无规则卷曲所占比例最高,为37.62%。该结论为gap基因作为保守基因作为检测CNS的有力支撑。3.熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌部分生物学特性的研究:为了解新疆石河子某病死的熊蜂幼虫SHZXF1株的耐抗生素和致病性情况。本试验展开了药敏试验和致病性分析。结果显示SHZXF1株对庆大霉素、多西环素、青霉素、头孢唑啉、麦迪霉素、复方新诺明、诺氟沙星、多粘菌素B等21种抗生素均呈高度敏感性;小鼠感染SHZXF1株存活时间为平均4.125天,LD50为106.86CFU。
王文佳[3]（2019）在《大型复合生态湿地的尾水净化效应及其微生物群落特征研究》文中进行了进一步梳理人工湿地是一种广泛用作二级污水处理的工程系统,可用于深度处理水体中的污染物。尽管实验室小规模的简单人工湿地已被广泛研究,但大规模、应用型的复合生态湿地及其净化过程研究仍相对较少。本文依托处理尾水的复合生态湿地（已连续运行6年,日处理尾水6万吨）,重点研究各功能系统对抗生素和营养盐的去除效果及其与微生物的关系。本文通过HPLC-MS/MS在冬夏两季研究该高效复合生态湿地对尾水中抗生素和营养盐污染物的去除效果,并通过16S rRNA测序技术研究其中微生物的组成和多样性,揭示去除抗生素和营养盐的关键细菌。主要研究结果如下:（1）高效复合生态湿地对尾水中营养盐净化效果优良,对总氮、氨氮、总磷和 COD 的去除效率分别为 38.57%～42.79%、83.60～83.75%、56.67%～64.44%和34.77%～52.45%。出水口水质得到显着提升,达到地表V类水标准以上（除总氮指标）。在季节性对比中,夏季去除率高于冬季,这可能与夏季植物生长茂盛、微生物数量多、活性高,有助于吸收、降解污染物有关。（2）高效复合生态湿地对尾水中抗生素去除效果显着,冬夏两季喹诺酮类、磺胺类、大环内酯类抗生素的去除效率分别为80.42%和65.21%,60.42%和53.44%,88.82%和63.76%。除氧氟沙星和恩诺沙星外,冬季抗生素的去除率比夏季更高。具有玻璃大棚保护的高效复合生态湿地子系统比露天的子系统对抗生素的去除贡献更大,并且潜流湿地去除抗生素的效果优于表面流湿地。（3）细菌群落的多样性和特定细菌的丰度对去除抗生素和营养盐可能产生影响。Dechloromonas（脱氯单胞菌属）、Nitrospira（硝化螺旋菌属）、Gemmatimonadaceae（芽单胞菌科）、Myxococcales（粘球菌目）、Xanthomonadales（黄色单胞菌目）中的细菌可能是参与抗生素降解的关键类群。Proteobacteria（变形菌门）和Parcubacteria中的某些关键类群（如Acinetobacter、Acidovorax等）可能在人工湿地营养盐去除中发挥重要作用。本研究首次对复合生态湿地同时去除抗生素及营养盐进行了探究,并揭示了潜在的功能微生物,该结果有助于为人工湿地的设计和应用提供理论基础和实践指导。
张昆[4]（2019）在《基于代谢组学对褐煤黄腐酸钠改善家蚕营养不良作用物质研究》文中研究表明云南省常年气候温和,享有“桑蚕养殖天堂”之誉,但随着季节的变化,桑叶质量锐减:秋蚕期,桑里白粉病发病率达50%以上,晚秋蚕期更是高达100%。桑叶质量降低,导致蚕存活率由80%–90%下降到50%,甚至更低,蚕茧量下降,改善蚕营养不良的状况迫在眉睫。在前期的实验中,进行了FANa添食病桑叶饲养家蚕试验,FANa对病蚕体中9种细菌的抑菌试验、黄腐酸钠（FANa）对于家蚕的抗饥饿耐高温存活试验,在此基础上,推测褐煤黄腐酸钠可能会有改善桑蚕因桑叶质量差而导致的营养不良,提高产茧量的作用。本论文需要进一步确证其效果,并研究其机制。为确认以上结果,并研究其作用机制,本文首先分析了云南省曲靖市陆良县舟东村6-7月和10-11月（白粉病桑叶）两个批次的桑叶加上家蚕饲料,总计三个样本,分别测量桑叶的水分、蛋白质、多糖和脂肪含量,来分析找到在夏蚕和晚秋不同时期桑叶的营养含量变化。结果表明水分含量和蛋白质含量没有明显的区别,在脂肪和多糖含量对比中,6月份桑叶质量比11月份桑叶分别提高28.2%和82.6%,为后续的实验打下了个坚定的基础,为减桑实验模型提供了技术支撑。紧接着我们建立了桑蚕营养不良模型,对黄腐酸钠是否增强家蚕营养吸收进行研究,结果表明添食FANa与模型组对比降低了死亡率,并且在减桑模型中添食FANa可以显着提高家蚕万头产茧量2-3kg（*P<0.05）,死亡率与对照组相比降低了2.5%-5%。初步说明云南褐煤黄腐酸钠可以通过调节家蚕基础新陈代谢,增强抗营养不良能力。从家蚕的整体表观来看,可以确证黄腐酸钠可以改善家蚕营养不良状况。我们进一步采用代谢组学思路和技术,利用GC-MS技术对黄腐酸钠改善家蚕营养不良作用进行研究,通过构建“标志物小分子-生物效应”的相关关系,研究黄腐酸钠对家蚕体内代谢组学影响,找到关键代谢通路,揭示黄腐酸对蚕营养不良改善作用的药理机制。分析正常组（a组）、FANa组（b组）、减桑20%+FANa组（c组）和减桑20%组（d组）的蚕血淋巴的差异代谢物,寻找可能的分子机制,采用GC-MS检测,XCMS-online对数据进行处理,利用SIMPCA.14对数据进行PCA和OPLS-DA分析,对a、b、c、d四组实现了完全分组,且四组具有显着性差异（P<0.05）,说明减桑可以影响家蚕的基础代谢,黄腐酸钠改善了家蚕的营养代谢通路,采用S-plot挑选,VIP>1的代谢物,得到了a、b、c、d四组之间差异明显的59个代谢物,在NIST14数据库中进行对比鉴定得到了14个化合物,分别为:Methyltris（trimethylsiloxy）silane,Dodecamethyl pentasiloxane,Decamethyl cyclopentasiloxane,Octamethyl trisiloxane,Tetradecamethyl hexasiloxane,Dodecamethyl cyclohexasiloxane,Octamethyl cyclotetrasiloxane,3-Acetoxy-3-hydroxypropionic acid,1-（3,6,6-Trimethyl-1,6,7,7a-tetrah ydrocyclopenta[c]pyran-1-yl）ethenone Methyl 20-methyl-heneicosanoate Octadecanoic acid,11-methyl-hyl ester,Dodecamethyl pentasiloxane,9,12-Octadecadienoic acid（Z,Z）-,methyl ester,Tetradecamethyl cycloheptasiloxane和Decamethyl tetrasiloxane通过MBRole网站进行KEGG代谢通路分析,最终得到了Biosynthesis of type II polyketide products（II型聚酮化合物的生物合成）、Lysine biosynthesis（赖氨酸生物合成）和Limonene and pinene degradation（柠檬烯和松烯降解）三个代谢通路。这些通路对家蚕吐丝和生长密切相关,通路的调控与减桑实验减少营养成分与病桑叶脂质、多糖含量减少的结果一致。综上所述,黄腐酸钠对家蚕营养不良有明显的改善作用,其调控的机制可能为通过调节II型聚酮化合物的生物合成、赖氨酸生物合成和柠檬烯和松烯降解通路,影响丝蛋白的合成,减少因病桑叶多糖、脂质含量减少而带来的不良影响。除此之外,本论文还对不同产地的黄腐酸钠进行了促血管新生及促进小麦种子萌发的研究来对其生物质量进行了初步评价。
杨少蕾[5]（2013）在《基于金属有机骨架材料的固相萃取在样品前处理中的应用》文中进行了进一步梳理金属有机骨架化合物（metal-organic frameworks, MOFs）是一类由金属离子与有机配体配位形成的晶体多孔材料，具有丰富的组成和结构、巨大的比表面积、良好的热稳定性和化学稳定性等特点。固相萃取是分离科学中最具活力的样品预处理方法之一，广泛应用于环境、食品、临床、药物和化工等领域。目前固相萃取技术不断深化发展，并期望通过新型的化学吸附剂的发现和使用，实现从复杂环境样品中预富集和分离被分析物的目的。本论文旨在探索金属有机骨架材料作为固相萃取的吸附剂在样品前处理中的发展潜力，主要内容与创新点概括如下:1.室温下合成粒径均一的金属有机骨架化合物MOF-5晶体，并通过傅里叶变换红外光谱、单晶衍射和扫描电镜等进行表征。通过与高效液相色谱联用，把它作为固相萃取的吸附剂首次用于富集环境水样中的多环芳烃。尽管MOF-5对水较为敏感，在萃取过程中晶体也发生了一定的变化，但金属骨架化合物的电子云与多环芳烃上的苯环产生的π-π共轭效应以及MOF中心金属离子与多环芳烃的π电子之间的络合作用仍然使得MOF-5对多环芳烃表现出来较强的吸附能力。优化后的实验方法对5种多环芳烃的检出限为0.4-4ng L-1，回收率为80.2-120.2%，相对标准偏差低于11.7%。2.水相中快速合成沸石咪唑酯骨架材料并用作固相萃取的吸附剂，与高效液相色谱质谱联用技术相结合，应用于环境水样中痕量全氟化合物的萃取。该材料的合成方法简单方便，以水代替有机溶剂，具有绿色环保等优点。合成的材料比表面积大、疏水性强、化学稳定性好且对水特别稳定，适合用于环境水样中持续性有机污染物的吸附。本实验详细考察了水样体积、离子强度、洗脱溶剂及体积等因素对萃取效果的影响。结果表明，该方法用于测定水样中全氟己酸、全氟辛酸和全氟辛烷磺酸钾的含量，具有检出限低、灵敏度高和重复性好等优点，是一个可靠的检测方法。3.在壳聚糖水凝胶中成功制备了沸石咪唑酯骨架化合物和壳聚糖的复合材料，建立了一种以该材料作为吸附剂，来分析环境样品中拟除虫菊酯农药残留的前处理方法。该种糅合了壳聚糖的复合材料，以其独有的结构特点和壳聚糖的吸附性，使得其从水样中萃取农残分析物的过程快速有效。我们对萃取速率、分散剂、改性剂等因素进行了考察。在最佳优化条件下，得到了较好的线性，且检测限达到0.01-0.15ng L-1。对实际水样中的农药残留进行了分析，得到了79.20-116.28%的回收率。
毕勇[6]（2011）在《86例小儿支原体肺炎临床分析》文中指出目的分析小儿支原体肺炎的临床特点,提高对小儿支原体肺炎的认识。方法回顾总结86例小儿支原体肺炎临床资料。结果本组86例支原体肺炎患儿,其中治愈（CR）52例,有效（PR）28例,无效6例,总有效率（CR+PR）达到93.0%。所有患儿临床治疗时间为821d,平均（12.3±1.8）d。结论小儿支原体肺炎应早期诊断、早期干预治疗,以达到进一步缩短病程、减少并发症发生的效果。
吴杰[7]（2002）在《喹诺酮类药物的合理应用及其相关分析》文中认为
二、喹诺酮类药物的合理应用及其相关分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、喹诺酮类药物的合理应用及其相关分析（论文提纲范文）
（1）多色荧光和拉曼光谱双模式传感技术在检测结核分枝杆菌耐药基因中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 文献综述 等温扩增用于 DNA 和 RNA 检测的研究进展 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 本文拟开展的工作 |
| 第2章 滚环扩增系统的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 基于滚环扩增的荧光检测技术用于耐药结核分枝杆菌的多重检测 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第4章 基于固相RCA和金属纳米探针的超灵敏SERS检测技术及在耐药基因检测中的应用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的科研产出情况 |
| 致谢 |
（2）熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌的分离鉴定及部分生物学特性研究（论文提纲范文）
| 全文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 熊蜂及凝固酶阴性葡萄球菌研究进展 |
| 1 熊蜂概述 |
| 1.1 熊蜂的生物学 |
| 1.2 熊蜂的分类 |
| 1.3 熊蜂的地理分布 |
| 1.4 熊蜂在农业应用中的重要性 |
| 2 熊蜂毒虫害的研究进展 |
| 2.1 原生动物 |
| 2.2 线虫 |
| 2.3 寄生螨 |
| 2.4 病毒 |
| 2.5 螺原体 |
| 2.6 细菌 |
| 2.7 真菌 |
| 2.8 寄虫蝇 |
| 3 凝固酶阴性葡萄球菌的研究进展 |
| 3.1 流行病学 |
| 3.2 致病性和致病因子 |
| 3.3 耐药性和耐药机制 |
| 3.4 检测和鉴定方法 |
| 3.5 预防与治疗 |
| 第二章 试验研究 |
| 试验一 熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌的分离鉴定 |
| 1 材料 |
| 1.1 病料及菌株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 病料的采集 |
| 2.2 细菌分离 |
| 2.3 生化鉴定 |
| 2.4 16SrRNA鉴定 |
| 3 结果 |
| 3.1 细菌的分离与染色镜检 |
| 3.2 生化鉴定 |
| 3.3 16SrRNA鉴定结果 |
| 4 讨论 |
| 试验二 熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌gap基因的生物信息学分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 菌株和质粒 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 分离株的培养及基因组DNA的提取 |
| 2.2 PCR引物设计 |
| 2.3 PCR反应体系 |
| 2.4 gap基因片段的回收 |
| 2.5 DNA回收产物与pMD19-T载体连接 |
| 2.6 质粒制备及测序 |
| 2.7 序列分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 PCR扩增及分析 |
| 3.2 序列同源性比对 |
| 3.3 系统进化树 |
| 3.4 结构和功能预测 |
| 4 讨论 |
| 试验三 熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌部分生物学特性的研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 菌株和试验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 药敏纸片 |
| 2 方法 |
| 2.1 溶血试验 |
| 2.2 生长曲线测定 |
| 2.3 药敏试验 |
| 2.4 致病性实验 |
| 3 结果 |
| 3.1 溶血试验 |
| 3.2 生长曲线测定 |
| 3.3 药敏实验结果 |
| 3.4 致病性实验结果 |
| 4 讨论 |
| 全文结论 |
| 主要创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 |
（3）大型复合生态湿地的尾水净化效应及其微生物群落特征研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 人工湿地概述 |
| 1.1.1 人工湿地的概念 |
| 1.1.2 人工湿地的分类 |
| 1.2 人工湿地污染物去除机理与研究进展 |
| 1.2.1 营养盐去除机理与研究进展 |
| 1.2.2 抗生素去除机理与研究进展 |
| 1.3 人工湿地微生物群落及其作用机理 |
| 1.3.1 人工湿地的微生物群落研究现状 |
| 1.3.2 人工湿地微生物的作用机理 |
| 1.4 研究目的、内容与技术路线 |
| 1.4.1 研究目的与意义 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 1.4.3 技术路线 |
| 第二章 复合生态湿地对尾水的净化效果 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 样品采集 |
| 2.2.2 常规污染指标检测 |
| 2.2.3 抗生素测定 |
| 2.2.4 数据分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 湿地溶解氧与水温变化 |
| 2.3.2 湿地脱氮能力对比 |
| 2.3.3 湿地去除磷和COD的效果 |
| 2.3.4 冬夏两季抗生素净化效果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 复合生态湿地对营养盐的净化效果 |
| 2.4.2 复合生态湿地对抗生素的净化效果 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 复合生态湿地微生物群落特征及其作用机理 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 采样与预处理方法 |
| 3.2.2 DNA提取,细菌16S扩增和MiSeq测序 |
| 3.2.3 16S测序数据分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 复合生态湿地微生物群落α多样性 |
| 3.3.2 微生物群落结构及与水体环境因子相关性 |
| 3.3.3 各群集特异细菌种类 |
| 3.3.4 关键细菌类群与抗生素及水质指标相关性 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 复合生态湿地微生物多样性和群落结构 |
| 3.4.2 特异微生物与水质指标的相关性 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 结论与展望 |
| 4.1 研究结论 |
| 4.2 研究创新点 |
| 4.3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 硕士期间研究成果 |
（4）基于代谢组学对褐煤黄腐酸钠改善家蚕营养不良作用物质研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 家蚕以及蚕业简介 |
| 1.1.1 家蚕简介 |
| 1.1.2 桑蚕业简介 |
| 1.1.3 桑蚕业市场面临的问题 |
| 1.2. 腐殖酸及黄腐酸简介 |
| 1.2.1. 黄腐酸钠的活血止血作用研究 |
| 1.2.2. 黄腐酸钠的抗病毒作用研究 |
| 1.2.3. 黄腐酸钠的抗炎作用研究 |
| 1.2.4. 黄腐酸钠的抗溃疡研究 |
| 1.2.5. 黄腐酸钠的抗菌作用研究 |
| 1.2.6. 本章小结 |
| 1.3. 代谢组学 |
| 1.3.1. 代谢组学简介 |
| 1.3.2. 代谢组学的应用 |
| 1.4 课题的立题依据和研究内容 |
| 1.4.1 课题的立题依据 |
| 1.4.2 课题研究内容 |
| 1.5 课题的创新点 |
| 第二章 不同产地黄腐酸钠的生物活性质量研究 |
| 2.1. 不同产地黄腐酸钠对体内血管增生CAM模型影响 |
| 2.1.1 主要仪器及实验材料 |
| 2.1.2. 实验方法 |
| 2.1.3. 结果与分析 |
| 2.1.4. 讨论 |
| 2.2. 不同产地黄腐酸钠对小麦种子萌发的影响 |
| 2.2.1. 主要仪器及实验材料 |
| 2.2.2. 实验方法 |
| 2.2.3. 结果与分析 |
| 2.3 本章小结 |
| 第三章 病桑叶营养质量研究 |
| 3.1. 主要仪器和实验材料 |
| 3.1.1. 主要仪器 |
| 3.1.2. 实验材料 |
| 3.2. 实验方法 |
| 3.3. 结果与分析 |
| 3.4. 本章小结 |
| 第四章 黄腐酸钠增强家蚕抗营养不良作用研究 |
| 4.1. 主要仪器及试剂材料 |
| 4.1.1. 主要仪器 |
| 4.1.2. 主要试剂及材料 |
| 4.2. 实验方法 |
| 4.2.1. 黄腐酸钠对于减桑致家蚕营养不良的影响 |
| 4.3. 结果 |
| 4.3.1. 黄腐酸钠对于减桑的影响 |
| 4.3.2.5 龄期第 7d家蚕体重 |
| 4.4. 分析讨论 |
| 第五章 基于代谢组学对褐煤黄腐酸钠改善家蚕营养不良作用物质研究 |
| 5.1. 主要仪器及实验材料 |
| 5.1.1. 主要仪器 |
| 5.1.2. 主要实验材料 |
| 5.2. 实验方法 |
| 5.2.1. 待测样品准备 |
| 5.2.2. GC-MS检测 |
| 5.2.3. 质控样本检测 |
| 5.2.4. 数据列表获得 |
| 5.2.5. 差异数据分析 |
| 5.2.6. 代谢物的鉴定 |
| 5.2.7. 代谢通路分析 |
| 5.3. 结果与分析 |
| 5.3.1. 质控样本分析 |
| 5.3.2. GC-MS谱图 |
| 5.3.3. 数据列表的获得 |
| 5.3.4. 数据分析 |
| 5.3.5. 差异代谢物的筛选 |
| 5.3.6. 代谢通路分析 |
| 第六章 总结与展望 |
| 6.1. 总结 |
| 6.2. 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录A 研究生期间发表的论文目录 |
| 附录B 图例及附件 |
（5）基于金属有机骨架材料的固相萃取在样品前处理中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 金属有机骨架材料 |
| 1.1.1 金属有机骨架材料的分类 |
| 1.1.2 金属有机骨架材料的特点 |
| 1.1.3 金属有机骨架材料的应用 |
| 1.2 固相萃取技术 |
| 1.2.1 固相萃取的基本原理和步骤 |
| 1.2.2 固相萃取的装置 |
| 1.2.3 固相萃取的应用 |
| 1.3 新材料在固相萃取中的应用 |
| 1.3.1 碳纳米管在固相萃取中的应用 |
| 1.3.2 分子印迹聚合物在固相萃取中的应用 |
| 1.3.3 纳米粒子在固相萃取中的应用 |
| 1.4 持续性有机污染物分析 |
| 1.5 本文立题思想 |
| 第2章 金属有机骨架材料作为固相萃取剂富集环境水样中的多环芳烃 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验试剂 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 实验过程 |
| 2.2.4 HPLC-FLD 条件 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 纳米级 MOF-5 晶体的表征 |
| 2.3.2 MOF-5 的结构稳定性及对萃取的影响 |
| 2.3.3 固相萃取条件的优化 |
| 2.4 分析方法验证 |
| 2.5 实际水样分析 |
| 2.6 本章小结 |
| 第3章 基于沸石咪唑酯骨架材料的固相萃取结合 HPLC-MS 联用技术用于水样中全氟化合物的测定 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 试剂与药品 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 实验过程 |
| 3.2.4 HPLC-ESI/MS 分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 ZIF-8 晶体的表征 |
| 3.3.2 ZIF-8 良好的化学热稳定性 |
| 3.3.3 固相萃取条件的优化 |
| 3.4 实际水样中全氟化合物的分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 第4章 壳聚糖-沸石咪唑酯骨架复合材料联合气相色谱在拟除虫菊酯农药残留中的应用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 试剂与药品 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 实验过程 |
| 4.2.4 GC-ECD 分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 ZIF-8/壳聚糖复合材料的表征 |
| 4.3.2 ZIF-8 和 ZIF-8/壳聚糖复合材料对拟除虫菊酯富集能力的对比 |
| 4.3.3 固相萃取条件优化 |
| 4.4 实际水样中拟除虫菊酯的分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
四、喹诺酮类药物的合理应用及其相关分析（论文参考文献）
- [1]多色荧光和拉曼光谱双模式传感技术在检测结核分枝杆菌耐药基因中的应用研究[D]. 夏珂. 西南大学, 2020(05)
- [2]熊蜂幼虫缓慢葡萄球菌的分离鉴定及部分生物学特性研究[D]. 王兵兵. 石河子大学, 2020(01)
- [3]大型复合生态湿地的尾水净化效应及其微生物群落特征研究[D]. 王文佳. 浙江大学, 2019(07)
- [4]基于代谢组学对褐煤黄腐酸钠改善家蚕营养不良作用物质研究[D]. 张昆. 昆明理工大学, 2019(04)
- [5]基于金属有机骨架材料的固相萃取在样品前处理中的应用[D]. 杨少蕾. 湖南大学, 2013(05)
- [6]86例小儿支原体肺炎临床分析[J]. 毕勇. 中国医药指南, 2011(35)
- [7]喹诺酮类药物的合理应用及其相关分析[J]. 吴杰. 西藏医药杂志, 2002(01)