一、海参生物活性物质的研究(论文文献综述)
银江林,李蜜,易湘茜,刘永宏,于清武,高程海[1](2021)在《广西涠洲岛3种海参共附生细菌多样性及其延缓衰老活性分析》文中研究说明【目的】明确广西涠洲岛海参共附生细菌多样性,筛选出具有延缓衰老活性的菌株,为挖掘延缓衰老活性的新化合物提供菌种资源。【方法】选用9种选择性培养基对来源于广西涠洲岛的3种海参[异色哈威参(Havelockia versicolor)、玉足海参(Holothuria leucospilota)和方柱翼手参(Colochirus quadrangularis)]共10份样品进行共附生细菌分离纯化,基于16S rRNA测序分析其多样性,并以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为模型评价共附生细菌发酵粗提物的延缓衰老活性。【结果】从广西涠洲岛3种海参中共分离获得63株共附生菌株,隶属于3门4纲14目25科35属,以放线菌纲(Actinobacteria)为优势菌群,共有31株(占49.21%);放线菌GXIMD LM0085和GXIMD LM0159有可能为潜在新种,与对应有效发表菌株Kocuria assamensis、K. salsicia的相似性分别为97.38%和97.00%。不同培养基分离获得的海参共附生细菌在属类水平上存在明显的数量差异,以M9培养基分离获得的菌属数量最多(19属28株),P7培养基分离获得的最少(仅6属6株);在筛选确定的35属细菌中,仅Cobetia和嗜盐单胞菌属(Halomonas)在9种培养基均有生长分布,多达13个属仅在单一的培养基中生长。不同海参分离获得的共附生细菌数量排序为1#异色哈威参>方柱翼手参>2#异色哈威参>玉足海参,除了玉足海参外,其他3只海参体内的共附生放线菌相对丰度明显高于体表共附生放线菌相对丰度。线虫寿命试验发现,有6株共附生细菌的发酵粗提物能显着延长秀丽隐杆线虫寿命(P<0.05),分别是GXIMD LM0037(寡养单胞菌属)、GXIMD LM0005(链霉菌属)、GXIMD LM0071(副球菌属)、GXIMD LM0114(寡养单胞菌属)、GXIMD LM0099(原小单孢菌属)和GXIMD LM0032(短状杆菌属)。【结论】广西涠洲岛海域海参蕴含着多样性丰富的共附生细菌资源,具有潜在的新物种,且部分菌株具有延缓衰老活性,在延缓衰老活性物质挖掘及新型抗衰老药物研发方面具有巨大潜力。
霍韵滢,叶加兰,吴若彤,张鑫清,郭雅欣,颜大昌,罗玮鹏,林小妍,张可琪,陈忻,许锋[2](2021)在《海参肽的应用研究进展》文中指出海参的营养与药用价值极高,海参不仅富含蛋白质,必需氨基酸,各种微量元素,维生素等,而且还包含许多生物活性物质。它具有抗氧化性、ACE抑制活性、免疫调节、抗疲劳、降血压、降血脂、抗肿瘤、延缓衰老等良好的作用。本文主要对海参肽的理化功能特性及应用研究进展进行综述,并介绍海参肽的分离提纯工艺进展,为海参肽进一步研究开发利用提供参考。
闫泽文[3](2021)在《不同菌种发酵对海参内脏酶解液风味的影响及抗肿瘤活性研究》文中提出为综合利用海参内脏,探究海参内脏的深加工发展前景,本文以海参内脏为主要材料,在将其酶解后,研究酵母菌或者复合乳酸菌进行发酵的工艺并优化,利用电子舌、电子鼻探讨不同发酵方式下海参内脏酶解液在发酵前后风味和滋味的变化,同时研究不同菌种发酵过程中产品的抗氧化活性及利用乳酸菌发酵后的产品是否具有体内抗肿瘤活性,主要研究内容及结论如下:(1)不同菌种发酵海参内脏酶解液的制备及工艺优化在实验室研究基础上,在55℃,料液比1:10,木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为2:1,总酶添加量为底物的3%的条件下,将海参内脏酶解120 min,得到海参内脏酶解液,添加合适的碳源后将其作为发酵基质使用。以发酵后溶液的SOD活力和酒精度作为评价指标,探究酵母菌发酵海参内脏酶解液的工艺并利用单因素实验和正交实验进行工艺优化,结果表明酵母菌发酵的最佳工艺条件为发酵液初始糖添加量为16%,酵母菌接种量为0.06%,发酵温度38℃,发酵时间为10 h。以上工艺条件下其感官评价为92分,发酵液酒精度为5.3%vol,SOD酶活力为46.26 U/m L。同样将海参内脏酶解液作为发酵基质,以发酵终点的p H和发酵液中DPPH自由基的清除率作为评价指标,对乳酸菌发酵海参内脏酶解液的工艺进行优化,研究结果显示复合乳酸菌添加量为0.5%,复配比例为1:1(嗜热链球菌:保加利亚乳杆菌=1:1),乳糖添加量为4%,发酵时间为7 h时为乳酸菌发酵的最佳工艺条件,此时发酵液的p H为3.71,DPPH自由基清除率为71.63%,最优条件下其感官评分为94分。(2)基于电子鼻、电子舌技术研究不同菌种发酵对海参内脏酶解液风味的影响利用电子舌、电子鼻对发酵前后的样品进行风味、滋味的评定,数据图显示,利用电子鼻可以很明确的区分出三种样品的挥发性物质差异,其中酵母菌发酵后的样品与其他的样品相比风味变化最大,主要因为酵母菌发酵产生的酒香。利用电子舌对三种样品的滋味进行了检测,实验证明酸味和苦味是海参内脏酶解液和酵母菌发酵后样品里最主要的滋味,而乳酸菌发酵则可以大幅降低样品的苦味,说明乳酸菌发酵可以降低海参内脏因为酶解而产生的苦味肽含量,比起酵母菌更适合用于海参内脏酶解液的发酵。(3)乳酸菌发酵海参内脏酶解液体内抗肿瘤试验通过在C57/BL小鼠背部肩胛处皮下接种MC38的方式创建荷瘤小鼠模型。模型建立成功后选取符合条件的小鼠进行试验,灌胃剂量均为0.1 m L/g。小鼠每24 h灌胃一次,每48 h在灌胃之后,记录小鼠体重和肿瘤体积。灌胃时间持续12天,在最后一次灌胃后采用脱颈法处死小鼠并剥取其皮下移植瘤标本称重,通过公式计算实验组各组荷瘤小鼠的抑瘤率。结果显示,与对照组作对比,低浓度实验组小鼠的抑瘤率为8.92%,中浓度组为16.3%,高浓度组为29.5%,说明高浓度组具有一定的体内抑瘤作用(P<0.05),并且实验结束时小鼠只是体重略有减少,除此之外均无不良反应。
程敏君[4](2021)在《海参酶解物促SD大鼠皮肤创面愈合的研究》文中研究说明海参是一种富含蛋白质的优质海产品,具有极高的营养和药用价值,已证实其在抗氧化、抗疲劳、抗凝血等方面起有效调节作用。但是针对海参富含营养且胶原含量高的这个特性,相关的应用于医疗、保健或功能食品中的功效研究较少。皮肤创伤是最常见的机体损伤之一,愈合过程中需要营养补给供能,同时胶原也是皮肤组成中必不可少的。因此,本课题在海参富含营养和胶原的基础上,验证海参酶解物(Sea cucumber hydrolysate,SCH)在促创面愈合方向的潜在功效,同时对其促创面愈合通路和吸收机理进行探究,以期为海参资源的高值化利用提供新的方向,为企业对海参资源的深度开发提供医学营养方向的理论基础和实验参考。本文首先对海参的营养组成进行测定,接着通过酶解技术获取SCH作为动物实验原料,然后进行三次动物实验考察SCH促创面愈合的功效。酶解结果显示:酶配比为水产蛋白酶﹕风味蛋白酶=6﹕4、酶添加总量10000 U/(g prot)时酶解效率较好,酶解1h的产物的分子质量<500 Da占70.73%。第一批次动物实验借助大鼠皮层切除创伤模型确认了SCH具备促创面愈合的效果,考察的动物实验组包括:模型Vehicle组、高剂量H-SCH组、中剂量M-SCH组、低剂量L-SCH组和阳性YNBY组。大鼠伤口愈合率的结果显示:SCH不影响大鼠的正常生长,且促进大鼠创面愈合;其中M-SCH组(灌胃蛋白浓度0.50 g/kg)在造模后第8天就显示愈合率显着高于Vehicle组(P<0.05),愈合率为88.15%。苏木精伊红(Hematoxylin-eosin,H&E)和马森三色(Masson’s trichrome method,Masson)染色、炎症指标、Hyp及生长因子含量结果皆表明,SCH可以减少炎性细胞浸润现象,同时促进创面处血管新生、成纤维细胞增殖、胶原沉积和再上皮化,其调节过程可能与Hyp、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,b FGF)和表皮细胞生长因子(Epidermal growth factor,EGF)的显着上调有关(P<0.05)。此外,M-SCH组在愈合后期表现出最优的形态特征,新生胶原排列有序紧密,瘢痕表皮最薄。确定了SCH具备促创面愈合的功效后,进一步地对酶解时间进行调整,获取高、中、低3组分子量的SCH并分析其组成差异。第二批次动物实验借助大鼠皮层切除创伤模型探究SCH的分子量对其促创面愈合功效的影响,同时测定创伤大鼠机体炎症和氧化应激,结合相关通路因子表达结果共同阐明SCH促创面愈合的作用通路。考察的动物实验组包括:空白Blank组、模型Vehicle组、高分子量H-Mw组、中分子量M-Mw组、低分子量L-Mw组和阳性YNBY组。高、中、低分子量SCH的氨基酸和矿物质组成揭示它们的主要差异在于Pro、Hyp和分子质量<500 Da的肽的含量上。大鼠创面愈合率的结果再次证实了SCH能促进创面愈合。H&E和Masson染色及Hyp结果表明,L-Mw组的促愈合效果最好,与YNBY组不存在明显差异(P>0.05)。此外,L-Mw组能显着降低白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量(P<0.05),提高白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)含量(P<0.05),同时促进VEGF、EGF、b FGF分泌(P<0.05),刺激转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、转化生长因子-β受体Ⅱ(Transforming growth factor receptor typeⅡ,TβRⅡ)、Smad家族3号蛋白(SMAD family member 3,Smad3)的m RNA表达(P<0.05),激活TGF-β/Smad通路,由此共同作用来改善机体的炎症和氧化应激水平、促进胶原合成,加快伤口愈合。第三批次动物实验旨在探究高、低分子量SCH在动物体内吸收的差异。实验设定了6个时间点采集大鼠血浆、胃、肠道和皮肤组织,观察胃肠内容物的变化情况,测定血液和皮肤里游离态/结合态的Pro、Hyp和5个Hyp结合小肽的含量,以及肠道内寡肽转运蛋白(Oligopeptide transporter 1,Pep T1)m RNA表达情况,综合分析SCH分子量对其体内吸收的影响,进而解释SCH促创面愈合的体内吸收机理。结果显示:低分子量SCH的胃排空速率和肠吸收速率较快;低分子量SCH中含有较多的结合态Hyp和Pro;低分子量SCH中Ala-Hyp-Gly、Pro-Hyp、Gly-Pro-Hyp、Hyp-Gly和Ile-Hyp的吸收速率较快,且含量均高于高分子量SCH;低分子量SCH能更快诱导十二指肠内Pep T1表达,同时刺激空肠中Pep T1在2 h内持续表达。综上,对比高、中、低分子量SCH促多雷(Sprague Dawley,SD)大鼠创面愈合效果,得出L-Mw-S的作用效果最优。其中L-Mw-S的制备条件为:底物浓度20%,酶添加量10000 U/(g prot),酶配比为水产蛋白酶﹕风味蛋白酶=6﹕4,酶解温度55℃,p H为7.0,酶解时间5 h。结合动物实验结果,可知SCH促大鼠创面愈合的吸收机理与SCH中的活性Hyp结合小肽被肠道完全吸收有关。这些小肽经小肠上皮的Pep T1途径被完整吸收,进而抑制机体炎症反应和氧化应激、促进生长因子分泌,同时激活TGF-β/Smad通路,诱导前胶原合成,从而加速伤口愈合。
杨青[5](2021)在《真空低温即食海参冻干片工艺研究》文中指出海参是一种名贵的海洋珍品,因其含有多种药理活性成分和营养物质而深受人们喜爱,古往今来海参被广泛应用于疾病康复和滋补养生。随着人们生活水平的不断提高,以及市场对海参产品需求的逐步扩大,推动着海参养殖、加工产业的发展。目前,市场上海参产品主要是以淡干海参、盐渍海参为主,海参加工方式也以传统蒸煮方式为主,需要经过长时间的泡发后再反复蒸煮,不仅影响海参的口感品质,而且造成了营养成分的大量流失。针对目前新型即食海参产品和相关加工技术的研究以及应用相对较少的问题。本论文以盐渍海参为原料,采用超声波辅助复水技术、真空低温加工技术和真空冷冻干燥技术,探讨了海参前处理技术以及新型即食海参加工技术对海参的质构、营养成分以及风味物质的影响和相互关系,为即食海参加工技术和产品质量的提升提供了理论依据。主要研究内容和结果如下:1、利用壳聚糖/超声波辅助复水的前处理方法,比传统水发,探索了在不同壳聚糖浓度、超声温度、超声频率、超声时间和复水时间盐渍海参复水的影响,优化和确立了即食冻干海参加工前处理工艺。研究发现:壳聚糖溶液浓度为0.50 g/100ml,超声温度为50℃,超声时间为45 min,超声波频率为53 k Hz,复水时间为96 h时,盐渍海参的复水率达到4.65倍,复水后海参总蛋白含量为55.75 g/100g,胶原蛋白为36.71 g/100g,水溶性蛋白含量为2.73 g/100g,海参水分含量为82.65%;而传统水发120h后,海参的复水率、总蛋白、胶原蛋白、水溶性蛋白分别为4.73倍、54.30 g/100g、35.02 g/100g、2.15 g/100g;由此可见,壳聚糖/超声波辅助复水方法不仅缩短了复水时间,而且海参的营养成分得到了更好的保留。并且超声复水后海参的质构也更为适宜,硬度、弹性、胶黏性、咀嚼性分别为7.29N、4.25mm、4.64N、10.8mj。2、利用真空低温加工技术,在真空度为0.08 Mpa条件下,考察了不同的温度和时间下,海参总蛋白、胶原蛋白、溶出蛋白、水分含量、感官以及质构的变化情况,探索了海参真空加工条件,优化确立了最佳加工工艺。结果表明:海参最佳的真空加工温度为90℃,最佳加工时间为80 min,该条件下即食海参的感官评分最高,同时也具有最佳的硬度、弹性和咀嚼性,分别为5.27 N、2.40 mm、11.13 mj;真空低温加工后的海参总蛋白、胶原蛋白保留较好,分别为47.00 g/100g、32.00 g/100g;溶出蛋白相对较少,含量为1.70 g/100g,水分含量68%。3、利用真空冷冻干燥技术,选取不同的冻干曲线,考察在不同的冻干温度、冻干时间以及选取的相应的温度和时间梯度条件下,分析了冻干前后即食海参总蛋白、胶原蛋白、水分含量、色泽以及质构的变化情况,探索了即食海参真空冷冻干燥工艺条件,优化确立了最佳冻干曲线。研究发现:海参真空冷冻干燥的最佳冻干时间为36 h、升华温度为25℃、冰晶温度为-26℃。该条件下即食海参冻干后水分含量最低,冻干效果最好。水分含量为3.75%,总蛋白含量为63.90 g/100g,水溶性蛋白为2.79 g/100g,胶原蛋白为36.28 g/100g。4、利用气相色谱-质谱联用技术分析了即食海参冻干片加工过程各环节的海参主要风味物质的变化情况,探讨了不同的加工方式以及不同的温度和时间对海参风味物质的影响。结果表明:海参的风味物质主要包括醇类、烃类、酮类、醛类等,其中对海参的风味影响较大的主要是醇类、烃类、醛类,通常占风味物质整体的90%以上。真空低温加工的即食海参,随着加工温度的升高,烃类物质的相对比例相对增大,酮类物质的相对比例相对稳定,醛类和醇类物质的相对比例有所下降;即食海参真空冷冻干燥,随着冰晶温度的降低,升华温度的升高,冻干时间的延长,冻干后烃类、醇类、酮类、醛类等物质的种类以及相对含量均有所下降。
张帅[6](2021)在《刺参岩藻聚糖硫酸酯对RAW264.7细胞炎症和自噬的影响》文中进行了进一步梳理海参是一种具有食用和药用价值的海洋动物,在我国沿海分布的食用海参中,刺参(Apostichopus japonicus)的营养品质和经济价值较高,生活中常见的是青刺参,近几年新品种紫色刺参也得到了广大消费者的喜爱,但目前对紫刺参的研究相对较少。海参体内含有多糖、活性肽、皂苷和磷脂等多种活性物质,其中海参多糖因生物活性高、毒性低而成为研究热点。海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)是海参多糖的一种,具有一定的抗炎作用,但其作用机制仍有待完善。近年来,研究发现自噬在调控炎症反应中发挥着重要作用,自噬作为炎症的负调节剂,可通过清除受损的细胞器和抑制促炎复合物形成等途径减缓炎症反应。本研究以青刺参和紫刺参的岩藻聚糖硫酸酯作为试验材料,构建了以脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞体外炎症模型,采用硝酸还原酶法、酶联免疫吸附法和实时荧光定量PCR测定细胞炎症介质及其相关基因的表达,以此评价青刺参岩藻聚糖硫酸酯(G-FUC)和紫刺参岩藻聚糖硫酸酯(P-FUC)的抗炎效果。采用qRT-PCR、免疫荧光法、Western blot法对细胞自噬相关基因和蛋白的表达进行测定,以探究自噬在青、紫刺参岩藻聚糖硫酸酯对脂多糖所致细胞炎症中发挥的作用。最后通过研究3-MA抑制自噬后SC-FUC对巨噬细胞炎症基因表达的影响,进一步验证SC-FUC是通过自噬对细胞炎症起到一定调控作用。研究结果如下:1.通过比较不同浓度LPS对RAW264.7细胞活力和形态的影响,发现0.25μg/mL LPS作用24 h对细胞无显着毒性且NO分泌量较大,可作为构建炎症模型的LPS刺激浓度和时间;通过测定不同浓度G-FUC和P-FUC在分别作用12、24和36 h后对细胞活力和吞噬活性的影响,发现50、100、200μg/m L的G-FUC或P-FUC作用24 h对细胞无显着毒性且能增强巨噬细胞的吞噬活性,分别作为后续实验的低、中、高剂量。2.通过研究青、紫SC-FUC对巨噬细胞炎症相关指标的影响,发现50、100、200μg/mL的G-FUC或P-FUC处理能显着降低细胞NO的释放量,并且50、100μg/mL的G-FUC或P-FUC对细胞中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌量有不同程度的抑制作用,而100和200μg/m L的P-FUC能显着增加抗炎因子IL-10的分泌量;不同浓度的G-FUC或P-FUC对细胞中tnf-α、il-6、il-1β、nlrp3、inos和cox-2等炎症相关基因的表达有抑制作用,其中50和100μg/m L SC-FUC降低炎症因子表达的效果较显着,并且与P-FUC处理组相比,G-FUC具有更强的抑制炎症细胞因子及相关基因表达的作用。3.通过研究青、紫SC-FUC对LPS诱导的RAW264.7细胞自噬的影响,发现各浓度G-FUC或P-FUC均能显着促进自噬基因lc3-II、beclin-1和lamp2的表达;免疫荧光和Western blot结果显示LC3-II和Beclin-1蛋白表达水平显着升高,与其m RNA变化趋势一致,并且发现细胞内溶酶体活性显着升高,表明G-FUC和P-FUC可以激活炎症状态下RAW264.7细胞的自噬;使用3-MA抑制细胞自噬后,G-FUC或P-FUC对巨噬细胞炎症因子基因表达没有显着的抑制作用。综上所述,本研究发现青、紫刺参岩藻聚糖硫酸酯可通过促进自噬对脂多糖所致细胞炎症反应有一定的抑制作用,并且与200μg/m L青、紫SC-FUC相比,50和100μg/m L有较好的抗炎效果。本试验为进一步完善海参营养评价体系提供研究基础,并为开发以海参多糖为活性物质的功能性食品或天然抗炎药物提供理论依据,促进海洋水产资源的深度开发与利用。
王婷婷[7](2021)在《海参肽对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖活性调节作用及其机制研究》文中认为食源性生物活性多肽因其来源广泛、制备工艺简单、易消化吸收以及活性多样等特点,逐渐成为健康功能因子开发的研究热点。糖尿病是仅次于肿瘤和心血管疾病的第三大慢性非传染性疾病,糖尿病会导致很多并发症,严重影响患者的生活质量。目前,对于具有降血糖作用的生物活性多肽或酶解产物的相关研究较少,降血糖肽的体外活性评价及其作用机理仍不完善。本论文着重于从海洋资源海参中,定向制备具有改善胰岛素抵抗和降血糖作用的生物活性肽,用T2DM动物模型深入研究海参肽降血糖活性及其分子机制研究,进而对活性肽进行鉴定和合成,并研究合成的活性肽对Hep G2细胞胰岛素抵抗以及对MES13细胞炎症和氧化应激的改善作用及其作用机制。本论文的主要研究内容及结果如下所述:(1)探究了木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味蛋白酶这6种蛋白酶对海参酶解产物的蛋白回收率、水解度、抗氧化活性及Hep G2-IR细胞葡萄糖摄取量的影响,结果发现木瓜蛋白酶酶解产物具有最强的抗氧化活性和改善胰岛素抵抗活性。木瓜蛋白酶与其它五种蛋白酶进行1:1双酶复配后,木瓜与复合蛋白酶复配的酶解产物的Hep G2-IR细胞葡萄糖摄取量最高,具有最强的改善胰岛素抵抗作用,在上述加酶方式的基础上,对加酶量和酶解时间进行进一步探究,筛选得出海参的酶解制备工艺为:木瓜蛋白酶与复合蛋白酶1:1进行复配,总加酶量为1%,酶解时间为4h,酶解温度55°C,p H 7。(2)通过STZ联合高脂饮食诱导的T2DM大鼠模型,研究了海参酶解物(Sea cucumber hydrolysates,SCH)的降血糖作用。结果表明,SCH能改善糖尿病大鼠的体重、饮水量、血脂代谢、肝功能和肾功能。而且,与模型组相比,SCH组的空腹血糖和糖化血红蛋白分别降低了40.39%和33.96%。此外,采用UPLC-q TOF-MS/MS对SCH进行鉴定得到242条肽。SCH的降血糖和降血脂作用可能由于其含有大量的疏水氨基酸和脂肪族氨基酸肽。通过Peptideranker评分和峰强度筛选得到30条具有潜在生物活性的肽。(3)为了探究SCH在STZ联合高脂饮食诱导的T2DM大鼠中降血糖的作用机制,我们测定了大鼠体内血脂代谢、血清胰岛素以及胰岛素依赖信号通路相关蛋白的表达。结果表明,SCH能够改善T2DM大鼠血糖水平、血脂代谢和胰岛素抵抗,潜在的分子机制研究表明,SCH激活PI3K/Akt信号通路,进一步调节GLUTs和GSK-3β蛋白的表达,从而促进糖原合成,提高胰岛素敏感性。通过对242个鉴定肽的进一步分析,认为SCH的抗糖尿病作用与低分子量的肽有关,这些肽含有丰富的疏水性氨基酸、脂肪族氨基酸和一些具有潜在的胰岛素增敏作用的特异性氨基酸,例如Pro、Phe、Leu/Ile和Ala。(4)为了鉴定SCH中具有改善胰岛素抵抗作用的活性肽,采用高糖和软脂酸(PA)联合诱导Hep G2细胞胰岛素抵抗模型(IR-Hep G2),评价海参肽对Hep G2细胞的促进葡萄糖摄取和改善胰岛素抵抗作用,并阐明其保护作用机制及相关信号通路。结果表明,SPA能够促进IR-Hep G2细胞葡萄糖摄取,分子机制表明SPA提高了IR-Hep G2细胞中GLUT2、p-GSK-3β、GS、IRS1、PI3K和p-Akt的表达,并且降低GSK-3β、p-GS和p-IRS1表达。综上所述,SPA可以通过激活PI3K/Akt胰岛素依赖性通路,减轻胰岛素抵抗,促进葡萄糖转运及糖原合成,从而改善IR-Hep G2细胞的糖代谢。(5)为了评价SCH对糖尿病肾病并发症(Diabetic nephropathy,DN)的影响,我们对T2DM大鼠肾脏组织进行了研究,旨在探讨SCH对STZ诱导的糖尿病大鼠的肾脏保护作用,并进一步探讨其作用机制。结果表明,SCH能显着减轻小鼠尿微量白蛋白,且SCH可通过提高SOD和GSH-px的活性和降低MDA的累积来减轻氧化应激。此外,SCH可降低IL-1β、TGF-β和TNF-α等炎症因子的水平。组织学观察还表明,SCH治疗可显着改善肾脏损伤,保护肾脏免受高血糖介导的氧化和炎症损伤。潜在的分子机制研究表明,SCH通过触发Akt/Nrf2信号通路和抑制TLR4/NF-κB信号通路改善肾脏的氧化应激和炎症水平,对糖尿病大鼠的肾病具有一定的保护作用。(6)为了探究海参肽的肾脏保护作用及相关机制通路,采用高糖诱导的MES13细胞损伤模型评价海参肽对小鼠肾小球系膜细胞的抗炎和抗氧化作用,并利用分子对接技术探讨了Nrf2和NF-κB通路下海参肽的抗氧化和抗炎作用机制。结果表明,WWGP和APGY的抗氧化作用与疏水性(Tyr、Pro和Ala)和芳香性氨基酸(Tyr、Trp和Phe)有关,潜在分子机制表明WWGP和APGY可能通过促进Nrf2的核转位减轻了一系列氧化应激反应。分子对接结果表明,WWGP和APGY可能直接与Keap1结合,干扰Keap1-Nrf2相互作用,从而调节Akt/Nrf2途径。另一方面,ALGP和WWGP的抗炎作用可能与其疏水性(Pro、Ala和Trp)、芳香性氨基酸(Tyr、Trp和Phe)和具有抗炎作用的特异性氨基酸如甘氨酸(Gly)等有关。潜在分子机制表明ALGP和WWGP通过阻止NF-κB的核移位减轻了一系列炎症反应。分子对接结果表明,ALGP和WWGP可能直接与TLR4结合,干扰IκBα-NF-κB的相互作用,抑制NF-κB的积累和核转位,从而调节TLR4/NF-κB信号通路。
汤奎[8](2021)在《不同色型刺参(Stichopus japonicas)营养成分分析及多糖的生物活性研究》文中研究指明刺参(Stichopus japonicus)是我国重要的经济物种,由于市场需求的增加和全球范围内刺参资源的过度捕捞,以及养殖过程中存在种质退化等问题,刺参产业的可持续发展受到影响。因此,开发优良品种以及增加养殖多样性是推动刺参产业健康发展的动力,也是维持产业发展的重要途径。在刺参新品系的选育中,除了抗病性、抗逆性和快速生长等常规目标外,体色也成为选育的重要性状,并对其市场价格有显着的影响。刺参体色主要有青色、黑色和红色,近些年研究人员培育出体色可稳定遗传的紫刺参和白刺参,这两种刺参有广阔的市场前景,但缺乏对其营养价值的研究。本文以青色、紫色和白色刺参为研究对象,分析比较了三种色型刺参体壁的营养成分;对青色和紫色刺参的多糖进行分离纯化,并以斑马鱼为研究对象研究了青色及紫色刺参的岩藻糖基化硫酸软骨素在斑马鱼尾鳍再生中的活性作用,研究结果如下:(1)三种色型刺参体壁的营养成分青色刺参蛋白含量显着低于紫色和白色刺参(p<0.05),三者脂肪含量无差异(p>0.05),青色刺参和紫色刺参的粗多糖含量高于白色刺参(p<0.05)。3种体色刺参检测出17种氨基酸,白色和紫色刺参氨基酸含量相对较高,为48%左右,而青色刺参体壁氨基酸含量为44%左右。紫色和白色刺参的赖氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、缬氨酸等氨基酸的含量均显着高于青色刺参(p<0.05)。3种刺参中亚油酸(LA)、花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)占较高比重,其中,LA作为重要必需脂肪酸在紫色和白色刺参中均显着高于青色刺参(p<0.05),为青色刺参的4.6倍左右,紫色和白色刺参的AA含量也显着高于青色刺参(p<0.05);而紫色和白色刺参的EPA和DHA含量显着低于青色刺参(p<0.05)。在检测的微量元素中,Fe在3种刺参中含量最高,紫色刺参Fe的含量显着低于青色和白色刺参(p<0.05),Mn在青色刺参中含量最高,显着高于紫色和白色刺参(p<0.05)。(2)岩藻糖基化硫酸软骨素(FCS)的分离纯化采用木瓜蛋白酶法提取了青色和紫色刺参的粗多糖,用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂将青色和紫色刺参的粗多糖进行分离纯化,采用氯化钠溶液梯度洗脱,均得到3个组分。浓缩、透析除盐后,用高效凝胶渗透色谱法鉴定多糖的纯度及分子量。研究发现,青色刺参的FCS(G-FCS)和紫色刺参的FCS(P-FCS)均呈现单一峰,纯度较高,G-FCS和P-FCS的分子量分别为19.5 k Da和18.8 k Da。红外光谱鉴定表明,两种多糖均具有岩藻糖基化硫酸软骨素结构。原子力显微镜观察显示,G-FCS多糖分子呈现出球状,而P-FCS多糖分子呈现出细长的链状结构。(3)岩藻糖基化硫酸软骨素(FCS)在斑马鱼尾鳍再生中的活性作用以切尾斑马鱼幼鱼为研究对象,比较了G-FCS和P-FCS对斑马鱼尾鳍再生的促进作用。对受精后3 d的斑马鱼幼鱼进行切尾,并用100 mg/L的G-FCS和P-FCS处理4 h。结果表明,G-FCS和P-FCS对斑马鱼尾鳍再生有不同的促进作用。P-FCS在斑马鱼切尾48 h后显着增加了尾鳍再生面积(p<0.05),并在斑马鱼切尾24 h后增强了斑马鱼的运动能力(p<0.05);而G-FCS对尾鳍再生面积和斑马鱼的运动能力无显着影响(p>0.05)。P-FCS促进了斑马鱼再生通路相关基因如wnt10a、msx1b、fgf20a、bmp2a和bmp4的转录水平上调(p<0.05),而G-FCS促进了msx1b、bmp2a、bmp2b和bmp4的转录水平上调(p<0.05)。此外,两种FCS可促进巨噬细胞的免疫调节作用。通过促进Toll样受体表达并激活NF-κB通路,从而刺激细胞因子的表达。P-FCS促进了inos、tnf-α、il-6、il-10及ifn-γ,且显着提高了NO和IL-1β的蛋白含量(p<0.05);G-FCS促进了il-6的表达,提高了NO的含量,但显着降低了TNF-α的蛋白含量(p<0.05)。G-FCS和P-FCS均展现出抗氧化能力,显着提高了SOD、CAT和G6PD的含量(p<0.05)。综上所述,本文比较了青色、紫色和白色刺参的营养价值,并研究了青色和紫色刺参的岩藻糖基化硫酸软骨素在斑马鱼尾鳍再生中的活性作用,为不同色型刺参的营养评定和开发利用提供参考,为研究天然再生辅助剂提供基础资料。
邓志怡,梁志宏[9](2021)在《海参肠道菌群可利用价值研究现状》文中研究说明随着海洋资源的开发利用,可食用海参的价值越来越受到人们的关注。基于海参自身的沉积食性,肠道微生物承担起海参内外环境营养要素的交换者。因此对海参肠道菌群的细致研究是很有价值的,但目前国内外针对海洋环境中海参肠道菌群这方面的研究报道还很少,对学者展开研究有一定的局限性。该文总结现有的海参文献报道,对其肠道菌群的构成、影响因素及相关功能性进行提炼,旨在为后续海参肠道菌群的开发与利用提供更多的理论参考。
杨环毓[10](2020)在《肽与植物提取物复配乳霜的抗衰老研究》文中认为皮肤衰老是机体整体老化的一部分,主要表现有皱纹、色斑的产生,皮肤弹性减退等。随着天然化和多功能化抗皮肤衰老产品的市场需求日益增加,肽和植物提取物的抗衰老活性研究成为热点。但目前多数研究停留在单一组分的活性评价,因此系统筛选出抗皮肤衰老功效较优的食源性肽和植物提取物,并将其制成复配乳霜,探究二者是否具有协同效应,对开发安全高效的抗衰老活性产品具有重要意义。本文以三种食源性肽(小麦肽、大豆肽、海参肽)和九种食源性的植物提取物(玫瑰茄粉、荷叶碱粉、菊花粉、决明子粉、芹菜素粉、玫瑰花粉、凉茶粉、红茶粉、绿茶粉)为研究对象,利用体外酪氨酸酶抑制试验、抑菌试验、体外细胞模型试验,筛选出防晒及抗氧化功能最强的活性肽和植物提取物,并将其制成复合乳霜,利用小鼠D-半乳糖诱导衰老模型验证复配乳霜的抗皮肤衰老功能。主要研究结果如下:(1)体外生物化学方法初步筛选具有抗衰老相关功能的肽和植物提取物:用紫外扫描法和紫外吸光度法比较肽和植物提取物的防晒功能,发现仅有红茶粉和绿茶粉在270 nm左右有明显吸收峰,1 mg/m L的红茶粉和绿茶粉可达到完全防护紫外线和高效防护紫外线效果,而三种活性肽对220-420 nm波段的紫外线吸收能力均比较差,均无防护紫外光效果;用DPPH自由基清除试验、总铁离子还原试验(FRAP法)、ABTS自由基清除试验比较肽和植物提取物的抗氧化功能,发现绿茶粉的抗氧化功能最强,DPPH自由基清除率IC50仅为(5.60±0.48)μg/m L,FRAP法测得总抗氧能力值为(8.69±0.17)mmol/g,ABTS法测得总抗氧化能力为(1.91±0.0046)mmol/g,红茶粉次之,而三种活性肽中,海参肽的抗氧化性最强,大豆肽次之,小麦肽最差。根据上述结果,初步筛选出小麦肽、大豆肽、海参肽、红茶粉及绿茶粉进入下一步研究。(2)细胞水平分析比较肽与植物提取物的抗皮肤衰老相关功能:用L929成纤维细胞周期检测试验、细胞凋亡试验、B16黑色素瘤细胞抑制增殖试验,发现当200μg/m L的海参肽作用于L929成纤维细胞和B16黑色素瘤细胞时,L929成纤维细胞的细胞增殖指数和细胞凋亡率由分别提高至(28.7±1.0)%和降至(1.89±0.085)%,B16黑色素瘤细胞的增殖率降至(72.7±2.1)%,对比空白对照组均有显着性差异(p<0.05),且均优于同浓度的其他活性肽。红茶粉和绿茶粉对L929细胞周期和细胞凋亡率均无显着性影响(p>0.05);与空白对照组相比,10μg/m L的红茶粉、绿茶粉能使B16黑色素瘤细胞的增殖率分别降至(79.2±0.94)%和(71.6±1.0)%。因此最终筛选结果为海参肽和绿茶粉。(3)动物试验评价复合乳霜的抗皮肤衰老功效:制备海参肽乳霜、绿茶粉乳霜及二者等比例混合的复合乳霜,作用于D-半乳糖诱导衰老模型小鼠的脱毛后背上,连续作用7周。实验结果显示,复合组的皮肤匀浆过氧化氢酶活力、超氧化物歧化酶活力及皮肤羟脯氨酸含量分别为(10.1±0.50)U/mgprot、(189±15)U/mgprot、(6.81±0.95)μg/m L比模型组分别提高了1.08 U/mgprot、33.9 U/mgprot、0.134μg/m L,优于海参肽乳霜和绿茶粉乳霜。以上研究结果表明海参肽和绿茶粉联合应用具有协同效应,值得进一步深入研究。
二、海参生物活性物质的研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、海参生物活性物质的研究(论文提纲范文)
(1)广西涠洲岛3种海参共附生细菌多样性及其延缓衰老活性分析(论文提纲范文)
0 引言 |
1 材料与方法 |
1.1 样品采集 |
1.2 试验材料 |
1.3 试验方法 |
1.3.1 细菌分离、纯化与保藏 |
1.3.2 细菌分子鉴定 |
1.3.3 细菌发酵粗提物制备 |
1.3.4 细菌发酵粗提物延缓衰老活性检测 |
2 结果与分析 |
2.1 海参共附生细菌的分离鉴定结果 |
2.2 不同培养基分离的海参共附生细菌分布情况 |
2.3 不同海参共附生细菌多样性分析结果 |
2.4 海参共附生细菌发酵粗提物延缓衰老活性分析结果 |
3 讨论 |
4 结论 |
(2)海参肽的应用研究进展(论文提纲范文)
1 海参肽的分离提取及纯化工艺研究进展 |
1.1 海参肽的分离提取工艺 |
1.2 海参肽的纯化 |
2 海参肽的理化特性及功能特性 |
2.1 抗氧化性作用 |
2.2 ACE抑制活性及降血压作用 |
2.3 延缓衰老 |
2.4 对糖尿病的预防和缓解作用 |
2.5 免疫调节作用 |
2.6 抗疲劳作用 |
2.7 抗肿瘤作用 |
3 海参肽的应用研究进展 |
3.1 应用于功能性食品领域 |
3.2 应用于护肤品领域 |
3.3 应用于药物领域 |
4 结 语 |
(3)不同菌种发酵对海参内脏酶解液风味的影响及抗肿瘤活性研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第一章 绪论 |
1.1 海参概述 |
1.1.1 海参简介 |
1.1.2 海参的加工利用现状 |
1.2 海参内脏的主要成分 |
1.2.1 海参蛋白及氨基酸 |
1.2.2 海参多糖 |
1.2.3 海参皂苷 |
1.3 海参内活性物质的功能研究 |
1.3.1 抗氧化活性 |
1.3.2 抗肿瘤活性 |
1.3.3 免疫调节活性 |
1.3.4 减肥和降血脂功能 |
1.3.5 降低血糖功能 |
1.4 发酵海产品的国内外研究现状 |
1.5 电子鼻、电子舌技术在食品中的应用 |
1.5.1 电子鼻 |
1.5.2 电子舌 |
1.6 本课题研究的意义、目的 |
1.7 主要研究内容 |
第二章 发酵海参内脏酶解液的工艺研究 |
2.1 引言 |
2.2 实验材料与仪器 |
2.2.1 实验材料 |
2.2.2 主要实验试剂 |
2.2.3 实验仪器 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 乳酸菌菌种的活化 |
2.3.2 酵母菌菌种的活化 |
2.3.3 发酵海参内脏酶解液的制备 |
2.3.4 海参内脏酶解液的制备 |
2.3.5 酵母菌发酵海参内脏酶解液单因素试验设计 |
2.3.6 酵母菌发酵海参内脏酶解液正交试验设计 |
2.3.7 乳酸菌发酵海参内脏酶解液单因素试验设计 |
2.3.8 乳酸菌发酵海参内脏酶解液正交试验设计 |
2.3.9 感官评分表 |
2.3.10 相关指标检测 |
2.4 结果与分析 |
2.4.1 酵母菌发酵海参内脏酶解液单因素实验结果 |
2.4.2 酵母菌发酵海参内脏酶解液正交实验结果 |
2.4.3 乳酸菌发酵酶解液单因素实验结果 |
2.4.4 乳酸菌发酵海参内脏酶解液正交实验结果 |
2.5 相关指标检测结果 |
2.5.1 溶液的糖浓度 |
2.5.2 脂肪含量 |
2.5.3 蛋白质含量 |
2.5.4 微生物菌落总数的测定 |
2.5.5 钠盐的含量 |
2.5.6 ABTS自由基清除能力 |
2.6 小结 |
第三章 乳酸菌发酵海参内脏酶解液对结肠癌小鼠的抗肿瘤作用 |
3.1 引言 |
3.2 材料和仪器 |
3.2.1 实验材料 |
3.2.2 实验动物 |
3.2.3 实验仪器 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 乳酸菌发酵海参内脏酶解液的制备 |
3.3.2 肿瘤细胞的复苏 |
3.3.3 肿瘤细胞的传代 |
3.3.4 实验动物的饲养 |
3.3.5 荷瘤小鼠模型的建立 |
3.3.6 实验分组及给药 |
3.3.7 统计学处理方法 |
3.4 乳酸菌发酵海参内脏酶解液抑制荷瘤小鼠体内肿瘤活性实验研究结果 |
3.4.1 肿瘤体积 |
3.4.2 荷瘤小鼠体重 |
3.4.3 乳酸菌发酵海参内脏酶解液的体内抑瘤作用 |
3.5 小结 |
第四章 不同发酵方式对海参内脏酶解液风味的影响 |
4.1 引言 |
4.2 实验材料与仪器 |
4.2.1 实验材料 |
4.2.2 实验仪器 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 电子鼻检测方法 |
4.3.2 电子舌检测方法 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 电子鼻测定分析(PCA)结果 |
4.4.2 电子鼻线型判别分析(LDA)结果 |
4.4.3 电子舌检测结果 |
4.5 小结 |
第五章 结论与展望 |
5.1 结论 |
5.2 展望 |
参考文献 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 |
致谢 |
(4)海参酶解物促SD大鼠皮肤创面愈合的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩略词对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 海参的研究进展 |
1.1.1 海参的概述 |
1.1.2 海参的营养和药用价值 |
1.1.3 海参的加工现状 |
1.1.4 海参酶解的研究进展 |
1.2 创面愈合的研究进展 |
1.2.1 创面愈合的概述 |
1.2.2 影响创面愈合的因素 |
1.2.3 创面愈合的实验模型 |
1.3 蛋白酶解物在促创面愈合方向的研究现状 |
1.4 肽消化吸收的研究进展 |
1.4.1 肽的概述 |
1.4.2 肽的消化机制 |
1.4.3 肽的吸收机制 |
1.5 立题背景、意义和研究内容 |
1.5.1 立题背景和意义 |
1.5.2 主要研究内容 |
1.5.3 主要技术路线 |
第二章 海参酶解物不同剂量组促SD大鼠皮肤创面愈合的研究 |
2.1 引言 |
2.2 实验材料和主要仪器 |
2.2.1 材料与试剂 |
2.2.2 实验主要仪器和设备 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 酶解条件的确定 |
2.3.2 海参酶解物(SCH)的制备 |
2.3.3 营养组成测定方法 |
2.3.4 分子量分布测定方法 |
2.3.5 实验动物分组及处理 |
2.3.6 伤口愈合率测定方法 |
2.3.7 组织切片染色分析方法 |
2.3.8 血液中炎症因子的Elisa分析 |
2.3.9 组织中Hyp和生长因子的Elisa分析 |
2.3.10 数据处理 |
2.4 结果与分析 |
2.4.1 海参营养成分分析 |
2.4.2 酶解条件的分析 |
2.4.3 SCH分子质量分布情况 |
2.4.4 SCH不同剂量组对大鼠体质量的影响 |
2.4.5 SCH不同剂量组对大鼠伤口愈合率的影响 |
2.4.6 SCH不同剂量组对大鼠伤口组织切片病理染色的影响 |
2.4.7 SCH不同剂量组对大鼠伤口组织中Hyp含量的影响 |
2.4.8 SCH不同剂量组对大鼠炎症指标的影响 |
2.4.9 SCH不同剂量组对大鼠伤口组织生长因子含量的影响 |
2.5 本章小结 |
第三章 海参酶解物不同分子量组促SD大鼠皮肤创面愈合的研究 |
3.1 引言 |
3.2 实验材料和主要仪器 |
3.2.1 材料与试剂 |
3.2.2 实验主要仪器和设备 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 不同分子量SCH的制备 |
3.3.2 氨基酸和矿物质组成测定方法 |
3.3.3 分子量分布测定方法 |
3.3.4 实验动物分组及处理 |
3.3.5 伤口愈合率测定方法 |
3.3.6 组织切片染色分析方法 |
3.3.7 血液中炎症因子的测定方法 |
3.3.8 血液和组织中氧化应激指标的测定方法 |
3.3.9 组织中Hyp、生长因子和通路相关因子的Elisa分析 |
3.3.10 组织中通路相关因子m RNA的 RT-PCR分析 |
3.3.11 数据处理 |
3.4 结果与分析 |
3.4.1 SCH不同分子量组样品的分子质量分布差异 |
3.4.2 SCH不同分子量组样品的氨基酸和矿物质组成差异 |
3.4.3 SCH不同分子量组对大鼠体质量的影响 |
3.4.4 SCH不同分子量组对大鼠伤口愈合率的影响 |
3.4.5 SCH不同分子量组对大鼠伤口组织切片病理染色的影响 |
3.4.6 SCH不同分子量组对大鼠伤口组织中Hyp含量的影响 |
3.4.7 SCH不同分子量组对大鼠炎症指标的影响 |
3.4.8 SCH不同分子量组对大鼠氧化应激的影响 |
3.4.9 SCH不同分子量组对大鼠伤口组织生长因子含量的影响 |
3.4.10 SCH不同分子量组对TGF-β/Smad信号通路的影响 |
3.5 本章小结 |
第四章 海参酶解物不同分子量组的体内吸收差异 |
4.1 引言 |
4.2 实验材料和主要仪器 |
4.2.1 材料与试剂 |
4.2.2 实验主要仪器和设备 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 实验动物分组及处理 |
4.3.2 胃肠内容物质量测定 |
4.3.3 血浆中游离态和结合态的Hyp、Pro含量测定 |
4.3.4 组织中游离态和结合态的Hyp、Pro含量测定 |
4.3.5 Hyp结合小肽标准曲线的建立 |
4.3.6 血浆中5 种Hyp结合小肽含量测定 |
4.3.7 组织中5 种Hyp结合小肽含量测定 |
4.3.8 十二指肠和空肠中Pep T1的RT-PCR分析 |
4.3.9 数据处理 |
4.4 结果与分析 |
4.4.1 大鼠胃肠的吸收情况 |
4.4.2 结合态和游离态Hyp的含量变化 |
4.4.3 结合态和游离态Pro的含量变化 |
4.4.4 大鼠血浆中5 种Hyp结合小肽的含量变化 |
4.4.5 大鼠组织中5 种Hyp结合小肽的含量变化 |
4.4.6 大鼠十二指肠和空肠中Pep T1的m RNA表达水平 |
4.4.7 SCH促大鼠创面愈合的体内吸收机理 |
4.5 本章小结 |
主要结论与展望 |
主要结论 |
展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录1:实验数据附图 |
附录2:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 |
(5)真空低温即食海参冻干片工艺研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 前言 |
1.1 海参 |
1.2 即食海参的加工技术现状 |
1.2.1 传统蒸煮加工技术 |
1.2.2 真空低温加工技术 |
1.2.3 真空冷冻干燥技术 |
1.3 海参风味物质的研究 |
1.4 研究目的与意义 |
1.5 研究思路与主要内容 |
1.5.1 研究思路 |
1.5.2 主要内容 |
2 盐渍海参超声波/壳聚糖复水工艺研究 |
2.1 引言 |
2.2 原料与仪器设备 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 盐渍海参前处理方法 |
2.3.2 超声波复水方法 |
2.3.3 海参复水率与水分含量的测定方法 |
2.3.4 海参主要营养成分的测定方法 |
2.3.5 海参质构的测定方法 |
2.3.6 海参风味成分的测定方法 |
2.4 结果分析 |
2.4.1 传统水发海参主要成分和质构测定 |
2.4.2 壳聚糖浓度对海参营养成分和质构的影响 |
2.4.3 超声温度对海参营养成分和质构的影响 |
2.4.4 超声时间对海参营养成分和质构的影响 |
2.4.5 超声频率对海参营养成分和质构的影响 |
2.4.6 复水时间对海参营养成分和质构的影响 |
2.5 本章小结 |
3 海参真空低温加工工艺研究 |
3.1 仪器与设备 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 加工工艺流程 |
3.2.2 加工条件 |
3.2.3 即食海参感官评价方法 |
3.2.4 海参营养成分与质构的测定方法 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 真空低温加工对海参外观的影响 |
3.3.2 不同加工时间对海参营养成分的影响 |
3.3.3 不同加工温度对海参营养成分的影响 |
3.3.4 不同加工温度和时间对海参质构的影响 |
3.4 真空低温加工工艺优化分析 |
3.4.1 工艺设计和结果 |
3.4.2 方差和模型的可信度分析 |
3.4.3 海参真空低温加工工艺优化 |
3.5 不同加工条件对海参挥发性成分的影响 |
3.6 本章小结 |
4 即食海参冻干片工艺研究 |
4.1 仪器与设备 |
4.2 实验方法 |
4.2.1 工艺流程 |
4.2.2 真空冷冻干燥对海参营养成分的影响 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 不同冻干曲线对海参水分的影响 |
4.3.2 不同冻干温度对海参蛋白含量的影响 |
4.3.3 不同冻干时间对海参蛋白含量的影响 |
4.4 不同冻干曲线对海参质构的影响 |
4.5 真空冷冻干燥加工工艺的优化 |
4.5.1 工艺设计与结果 |
4.5.2 冻干海参总蛋白含量优化 |
4.5.3 冻干海参水溶性蛋白的优化 |
4.5.4 冻干海参胶原蛋白的优化 |
4.5.5 冻干海参水分含量的优化 |
4.5.6 真空冷冻干燥加工工艺优化 |
4.6 真空冷冻干燥对海参挥发性成分的影响 |
4.7 本章小结 |
5 结论 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
(6)刺参岩藻聚糖硫酸酯对RAW264.7细胞炎症和自噬的影响(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略词表 |
第一章 文献综述 |
1.1 海参简述 |
1.1.1 海参的营养成分及功能 |
1.1.2 海参多糖 |
1.2 炎症简述 |
1.2.1 炎症介质 |
1.2.2 一氧化氮 |
1.2.3 细胞因子 |
1.2.4 体外炎症模型 |
1.2.5 TLR信号转导途径 |
1.2.6 NLRP3 炎性小体 |
1.3 自噬简述 |
1.3.1 自噬与炎症的联系 |
1.3.2 自噬抑制炎症反应 |
1.3.3 自噬促进炎症反应 |
1.3.4 自噬与炎性小体的关系 |
1.4 本研究的目的意义和主要内容 |
1.4.1 选题目的和意义 |
1.4.2 研究内容 |
1.4.3 技术路线 |
第二章 LPS诱导巨噬细胞RAW264.7 炎症模型的建立和SC-FUC的毒性评价 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 实验试剂与材料 |
2.1.2 主要实验仪器 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 RAW264.7 细胞处理方法: |
2.2.2 CCK-8 法检测LPS及青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞活力的影响 |
2.2.3 光学显微镜观察LPS对 RAW264.7 细胞形态的影响 |
2.2.4 LPS对 RAW264.7 细胞NO释放量的影响 |
2.2.5 中性红法检测青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞吞噬活性的影响 |
2.3 数据处理及分析 |
2.4 结果分析 |
2.4.1 LPS作用浓度探究 |
2.4.2 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞活力的影响 |
2.4.3 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞吞噬活性的影响 |
2.5 讨论 |
2.6 小结 |
第三章 青、紫刺参岩藻聚糖硫酸酯对LPS诱导的巨噬细胞炎症相关因子的影响 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 实验试剂与材料 |
3.1.2 主要实验仪器 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞NO释放量的影响 |
3.2.2 ELISA法检测青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞因子释放量的影响 |
3.2.3 qRT-PCR检测青、紫SC-FUC对细胞炎症相关基因mRNA转录的影响 |
3.3 数据处理及分析 |
3.4 结果分析 |
3.4.1 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞NO分泌量的影响 |
3.4.2 青、紫SC-FUC对RAW264.7细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-I0表达的影响 |
3.4.3 青、紫SC-FUC对RAW264.7细胞炎症相关基因mRNA转录的影响 |
3.4.4 青、紫 SC-FUC 对细胞炎性小体 NLRP3 表达的影响 |
3.5 讨论 |
3.6 小结 |
第四章 青、紫刺参岩藻聚糖硫酸酯对巨噬细胞自噬的影响 |
4.1 试验材料 |
4.1.1 实验试剂与材料 |
4.1.2 实验仪器 |
4.2 试验方法 |
4.2.1 qRT-PCR检测青、紫SC-FUC对细胞自噬相关基因mRNA转录的影响 |
4.2.2 免疫荧光法检测青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞中LC3和Beclin1 蛋白表达的影响 |
4.2.3 Western blot法检测青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞中LC3和Beclin1蛋白表达的影响 |
4.2.4 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞溶酶体活性的影响 |
4.3 数据处理及分析 |
4.4 结果分析 |
4.4.1 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞自噬相关基因mRNA转录的影响 |
4.4.2 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞LC3和Beclin1 蛋白表达的影响 |
4.4.3 青、紫SC-FUC对 RAW264.7 细胞溶酶体活性的影响 |
4.4.4 3-MA抑制自噬后青、紫SC-FUC对 RAW264.7细胞炎症相关基因表达的影响 |
4.5 讨论 |
4.6 小结 |
结论及创新点 |
结论 |
创新点 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简介 |
(7)海参肽对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖活性调节作用及其机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
论文中重要名词缩写对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 糖尿病的研究现状 |
1.2.1 糖尿病的分类 |
1.2.2 糖尿病的并发症 |
1.2.3 糖尿病的治疗方法 |
1.2.4 降血糖活性成分的研究进展 |
1.3 糖尿病肾病研究进展 |
1.3.1 发病机理 |
1.3.2 糖尿病肾病治疗进展 |
1.4 海参主要活性成分研究进展 |
1.4.1 海参概述 |
1.4.2 海参的主要营养成分研究进展 |
1.5 本课题研究的立题依据和主要研究内容 |
1.5.1 立题依据 |
1.5.2 主要研究内容 |
1.5.3 技术路线 |
第二章 海参酶解产物抗氧化及改善胰岛素抵抗功效研究 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 实验材料 |
2.2.2 实验方法 |
2.2.3 数据分析 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 海参氨基酸组成 |
2.3.2 海参酶解蛋白酶筛选及酶解工艺优化 |
2.4 本章小结 |
第三章 海参酶解物调节Ⅱ型糖尿病大鼠血糖活性研究及活性肽鉴定 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 实验材料 |
3.2.2 实验方法 |
3.2.3 数据分析 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 海参酶解物的组成分析 |
3.3.2 海参酶解物的鉴定和表征 |
3.3.3 海参酶解物对糖尿病大鼠的体重、饮水量、空腹血糖、糖化血红蛋白的影响 |
3.3.4 海参酶解物对糖尿病大鼠口服葡萄糖耐量的影响 |
3.3.5 海参酶解物对糖尿病大鼠血脂代谢的影响 |
3.3.6 海参酶解物对糖尿病大鼠脏器指数及肝肾功能的影响 |
3.4 本章小结 |
第四章 海参酶解物调节Ⅱ糖尿病大鼠血糖作用机制研究 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 实验材料 |
4.2.2 实验方法 |
4.2.3 数据分析 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 海参酶解物对糖尿病大鼠肝脏氧化应激的影响 |
4.3.2 海参酶解物对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响 |
4.3.3 海参酶解物对糖尿病大鼠组织病理的影响 |
4.3.4 海参酶解物对糖尿病大鼠肝脏和骨骼肌糖原含量及胰岛素信号转导的影响 |
4.4 本章小结 |
第五章 海参酶解物中胰岛素增敏肽对软脂酸诱导的HepG2细胞损伤的保护作用及其机制研究 |
5.1 引言 |
5.2 材料与方法 |
5.2.1 实验材料 |
5.2.2 实验方法 |
5.2.3 数据分析 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 海参酶解物的潜在活性肽对软脂酸诱导HepG2葡萄糖摄取的影响 |
5.3.2 不同浓度的AAE、SPA和ALGP对软脂酸诱导HepG2葡萄糖摄取的影响 |
5.3.3 SPA对GLUTs和GSK-3的影响 |
5.3.4 SPA对PI3K/Akt通路调控的影响 |
5.3.5 SPA在胃蛋白酶-胰酶体外模拟胃肠道消化中的稳定性 |
5.4 本章小结 |
第六章 海参酶解物改善Ⅱ糖尿病大鼠肾病并发症作用机制研究 |
6.1 引言 |
6.2 材料与方法 |
6.2.1 实验材料 |
6.2.2 实验方法 |
6.2.3 数据分析 |
6.3 结果与讨论 |
6.3.1 海参酶解物对糖尿病大鼠尿微量白蛋白的影响 |
6.3.2 海参酶解物对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏GSH-px、SOD活性及MDA含量的影响 |
6.3.3 海参酶解物对糖尿病大鼠肾脏炎症因子的影响 |
6.3.4 组织病理学分析 |
6.3.5 海参酶解物对糖尿病大鼠Akt/Nrf2/Keap1信号通路的影响 |
6.3.6 海参酶解物对糖尿病大鼠TLR4/NF-кB信号通路的影响 |
6.4 本章小结 |
第七章 海参酶解物中抗炎肽及抗氧化肽对高糖诱导的MES13细胞损伤的保护作用及其机制研究 |
7.1 引言 |
7.2 材料与方法 |
7.2.1 实验材料 |
7.2.2 实验方法 |
7.2.3 数据分析 |
7.3 结果与讨论 |
7.3.1 WWGP和APGY对高糖诱导MES13 细胞氧化应激的影响 |
7.3.2 WWGP和APGY对Akt/Nrf2通路调控的影响 |
7.3.3 Keap1与抗氧化肽的分子对接 |
7.3.4 ALGP和WWGP对MES13 细胞IL-1β和TNF-α含量的影响 |
7.3.5 ALGP和WWGP对TLR4/NF-κB通路调控的影响 |
7.3.6 TLR4 与抗炎肽的分子对接 |
7.3.7 ALGP、WWGP和APGY在胃蛋白酶-胰酶体外模拟胃肠道消化中的稳定性 |
7.4 本章小结 |
第八章 结论与展望 |
8.1 结论 |
8.2 主要创新点 |
8.3 展望 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
攻读博士学位期间发表论文情况 |
(8)不同色型刺参(Stichopus japonicas)营养成分分析及多糖的生物活性研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 海参概述 |
1.2 刺参概述 |
1.2.1 刺参的生物学分类和分布 |
1.2.2 刺参的生物学特征 |
1.2.3 不同色型刺参的研究进展 |
1.3 海参的营养价值 |
1.4 海参多糖概述 |
1.4.1 海参多糖的提取分离 |
1.4.2 海参多糖的化学组成分析 |
1.5 海参多糖的生物活性研究进展 |
1.6 斑马鱼尾鳍再生 |
1.6.1 尾鳍的基本结构 |
1.6.2 尾鳍的再生过程 |
1.6.3 尾鳍再生过程中的信号通路 |
1.6.4 参与再生的关键因子 |
1.7 选题的目的及意义 |
第二章 三种刺参体壁营养成分分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料和仪器 |
2.1.2 试验方法 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 刺参体壁营养成分的基本组成 |
2.2.2 刺参体壁氨基酸组成 |
2.2.3 刺参体壁脂肪酸组成 |
2.2.4 刺参体壁微量元素分析 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 青色、紫色刺参多糖的纯化及结构分析 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验材料和试剂 |
3.1.2 试验方法 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 粗多糖的提取 |
3.2.2 粗多糖的分离纯化 |
3.2.3 多糖的纯度鉴定及分子量测定 |
3.2.4 FCS的红外结构 |
3.2.5 原子显微镜观察多糖形貌 |
3.3 讨论 |
3.4 本章小结 |
第四章 青色、紫色刺参多糖对斑马鱼尾鳍再生的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验材料和仪器 |
4.1.2 试验方法 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 斑马鱼尾鳍再生观察 |
4.2.2 斑马鱼运动能力分析 |
4.2.3 FCS对斑马鱼再生基因表达的影响 |
4.2.4 FCS对斑马鱼免疫的影响 |
4.2.5 FCS对 TLR受体及其信号分子表达的影响 |
4.2.6 FCS对斑马鱼氧化应激的影响 |
4.3 讨论 |
4.4 本章小结 |
结论及创新点 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简介 |
(9)海参肠道菌群可利用价值研究现状(论文提纲范文)
1 海参肠道菌群研究进展 |
1.1 海参肠道菌群组成 |
1.2 海参肠道益生菌潜力研究现状 |
2 海参肠道菌群构成的影响因素 |
2.1 环境因素 |
2.2 人为因素 |
2.3 其它因素 |
3 海参肠道功能性菌株 |
4 海参肠道菌群的应用 |
5 展望 |
(10)肽与植物提取物复配乳霜的抗衰老研究(论文提纲范文)
致谢 |
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 皮肤的衰老 |
1.1.1 皮肤衰老的概述 |
1.1.2 皮肤衰老的内在因素 |
1.1.3 皮肤衰老的外在因素 |
1.2 肽和植物提取物抗衰老相关功能研究进展 |
1.2.1 防晒功能 |
1.2.2 抗氧化功能 |
1.2.3 抗皱功能 |
1.2.4 美白功能 |
1.2.5 保湿功能 |
1.2.6 抑菌功能 |
1.3 抗衰老功效评价方法 |
1.3.1 生物化学方法 |
1.3.2 细胞模型评价方法 |
1.3.3 动物及人体评价方法 |
1.4 肽与植物提取物的联合应用进展 |
1.5 本课题选题依据和研究内容 |
1.5.1 选题依据 |
1.5.2 研究内容 |
第二章 体外生物化学方法初步筛选具有抗衰老相关功能的肽和植物提取物 |
2.1 前言 |
2.2 材料、试剂与设备 |
2.2.1 材料与试剂 |
2.2.2 试验设备 |
2.3 试验方法 |
2.3.1 防晒功能研究 |
2.3.2 抗氧化功能研究 |
2.3.3 美白功能研究 |
2.3.4 抑菌功能研究 |
2.3.5 数据统计分析 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 紫外扫描法测定防晒功能 |
2.4.2 紫外吸光度法测定防晒功能 |
2.4.3 DPPH自由基清除能力 |
2.4.4 FRAP还原能力 |
2.4.5 ABTS法自由基清除能力 |
2.4.6 酪氨酸酶的抑制率 |
2.4.7 抑菌圈 |
2.4.8 最小抑菌浓度 |
2.5 本章小结 |
第三章 细胞水平分析比较肽与植物提取物的抗皮肤衰老相关功能 |
3.1 前言 |
3.2 材料、试剂与设备 |
3.2.1 材料与试剂 |
3.2.2 试验设备 |
3.3 试验方法 |
3.3.1 样品的处理 |
3.3.2 L929成纤维细胞的培养 |
3.3.3 L929成纤维细胞增殖率的测定 |
3.3.4 L929成纤维细胞过氧化氢损伤模型 |
3.3.5 L929成纤维细胞周期检测 |
3.3.6 L929成纤维细胞凋亡率检测 |
3.3.7 B16黑色素瘤细胞培养 |
3.3.9 B16黑色素瘤细胞增殖率测定 |
3.3.10 B16黑色素瘤细胞内酪氨酸酶抑制率测定 |
3.3.11 B16黑色素瘤细胞内黑色素含量测定 |
3.3.12 数据统计分析 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 L929成纤维细胞增殖率 |
3.4.2 L929成纤维细胞过氧化氢损伤模型的建立 |
3.4.3 L929成纤维细胞氧化损伤预保护能力 |
3.4.4 L929成纤维细胞氧化损伤同时保护能力 |
3.4.5 L929成纤维细胞氧化损伤修复能力 |
3.4.6 L929成纤维细胞周期 |
3.4.7 L929成纤维细胞凋亡率 |
3.4.8 B16黑色素瘤细胞增殖率 |
3.4.9 B16黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性抑制率 |
3.4.10 B16黑色素瘤细胞内黑色素含量 |
3.5 本章小结 |
第四章 动物试验评价复合乳霜的抗皮肤衰老功效 |
4.1 前言 |
4.2 材料、试剂与设备 |
4.2.1 材料与试剂 |
4.2.2 试验设备 |
4.3 试验方法 |
4.3.1 乳霜的制备 |
4.3.2 产品感官与理化性质测试 |
4.3.3 安全性能测定 |
4.3.4 D-半乳糖诱导衰老模型小鼠试验 |
4.3.5 数据统计分析 |
4.4 结果与谈论 |
4.4.1 产品感官与理化性质 |
4.4.2 产品安全性能 |
4.4.3 小鼠皮肤切片H&E染色 |
4.4.4 小鼠皮肤切片Evg染色 |
4.4.5 小鼠皮肤匀浆超氧化物歧化酶活力 |
4.4.6 小鼠皮肤匀浆丙二醛含量 |
4.4.7 小鼠皮肤匀浆过氧化氢酶活力 |
4.4.8 小鼠皮肤匀浆总抗氧化能力 |
4.4.9 小鼠皮肤羟脯氨酸含量 |
4.5 本章小结 |
第五章 结论与展望 |
5.1 主要结论 |
5.2 创新点 |
5.3 展望 |
参考文献 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
四、海参生物活性物质的研究(论文参考文献)
- [1]广西涠洲岛3种海参共附生细菌多样性及其延缓衰老活性分析[J]. 银江林,李蜜,易湘茜,刘永宏,于清武,高程海. 南方农业学报, 2021
- [2]海参肽的应用研究进展[J]. 霍韵滢,叶加兰,吴若彤,张鑫清,郭雅欣,颜大昌,罗玮鹏,林小妍,张可琪,陈忻,许锋. 广州化工, 2021(17)
- [3]不同菌种发酵对海参内脏酶解液风味的影响及抗肿瘤活性研究[D]. 闫泽文. 烟台大学, 2021(12)
- [4]海参酶解物促SD大鼠皮肤创面愈合的研究[D]. 程敏君. 江南大学, 2021(01)
- [5]真空低温即食海参冻干片工艺研究[D]. 杨青. 烟台大学, 2021(12)
- [6]刺参岩藻聚糖硫酸酯对RAW264.7细胞炎症和自噬的影响[D]. 张帅. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [7]海参肽对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖活性调节作用及其机制研究[D]. 王婷婷. 广西大学, 2021(01)
- [8]不同色型刺参(Stichopus japonicas)营养成分分析及多糖的生物活性研究[D]. 汤奎. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [9]海参肠道菌群可利用价值研究现状[J]. 邓志怡,梁志宏. 食品研究与开发, 2021(05)
- [10]肽与植物提取物复配乳霜的抗衰老研究[D]. 杨环毓. 浙江大学, 2020(01)